| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表（Abbreviation） | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-20页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒 | 第12-16页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒简介 | 第12页 |
| ·PRRSV基因组结构及编码蛋白 | 第12-14页 |
| ·PRRSV与天然免疫 | 第14-15页 |
| ·Nsp1β 研究进展 | 第15-16页 |
| ·慢病毒载体研究进展 | 第16页 |
| ·蛋白质组学与PRRSV | 第16-20页 |
| ·蛋白质组学简介 | 第16-19页 |
| ·PRRSV蛋白质组学研究进展 | 第19-20页 |
| 第2章 研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 第3章 材料与方法 | 第21-40页 |
| ·实验材料 | 第21-27页 |
| ·细胞、毒株、菌株与实验动物 | 第21页 |
| ·载体与质粒 | 第21-22页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第22-23页 |
| ·Western Blot实验所需材料 | 第23页 |
| ·ELISA实验所需材料及相关试剂 | 第23-24页 |
| ·主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第24-26页 |
| ·实验所需主要抗体 | 第26页 |
| ·主要实验仪器及设备 | 第26-27页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-40页 |
| ·目的基因片段的扩增 | 第27-28页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备（氯化钙法） | 第28页 |
| ·重组蛋白的表达及纯化 | 第28-29页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析检测目的基因的表达 | 第29-30页 |
| ·单克隆抗体的制备流程 | 第30-32页 |
| ·间接酶联免疫吸附试验筛选阳性克隆 | 第32-33页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的克隆（有限稀释法） | 第33-34页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第34页 |
| ·Western Blot检测分析 | 第34页 |
| ·单克隆抗体的间接免疫荧光验证（IFA） | 第34-35页 |
| ·单克隆抗体的亚型鉴定 | 第35页 |
| ·重组慢病毒阳性质粒的构建 | 第35页 |
| ·慢病毒的包装 | 第35-36页 |
| ·蛋白质组学分析细胞样品的制备 | 第36页 |
| ·全细胞蛋白质的提取 | 第36页 |
| ·蛋白质的酶解 | 第36-37页 |
| ·iTRAQ 8 plex试剂标记肽段 | 第37页 |
| ·SCX分离 | 第37页 |
| ·基于Triple TOF 5600的LC -MSMS分析 | 第37-38页 |
| ·生物信息学分析 | 第38-40页 |
| 第4章 结果与分析 | 第40-52页 |
| ·PRRSV nsp1β 的表达及纯化 | 第40-42页 |
| ·PRRSV nsp1β 原核表达质粒的构建 | 第40页 |
| ·PRRSV nsp1β 的表达条件的选择 | 第40-41页 |
| ·PRRSV nsp1β 的纯化 | 第41-42页 |
| ·PRRSV nsp1β 单克隆抗体的制备及验证 | 第42-44页 |
| ·间接免疫荧光（IFA）验证抗nsp1β 单克隆抗体 | 第42-43页 |
| ·Western Blot验证抗nsp1β 单克隆抗体 | 第43页 |
| ·PRRSV nsp1β 单克隆抗体亚型的鉴定 | 第43-44页 |
| ·PRRSV nsp1β 蛋白质组学数据的分析及验证 | 第44-52页 |
| ·PRRSV nsp1β 重组慢病毒的包装 | 第44-45页 |
| ·PRRSV nsp1β 蛋白质组学数据统计 | 第45-46页 |
| ·利用生物信息学软件分析nsp1β 蛋白质组学数据 | 第46-50页 |
| ·蛋白质组学数据可靠性分析 | 第50页 |
| ·PRRSV nsp1β 抑制RIG-I信号通路调控的天然免疫反应 | 第50-52页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第52-55页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| ·PRRSV nsp1β 的表达与纯化 | 第52页 |
| ·PRRSV nsp1β 单克隆抗体的制备 | 第52-53页 |
| ·PRRSV nsp1β 的蛋白质组学数据的探讨 | 第53-54页 |
| ·结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 附表 | 第63-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
