摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
文章中出现的缩写符号说明 | 第6-10页 |
第一章 综述 | 第10-25页 |
1 免疫系统的概述 | 第10页 |
2 棘皮动物的非特异性免疫 | 第10-13页 |
·免疫识别 | 第10-11页 |
·免疫信号的传导 | 第11-12页 |
·免疫效应 | 第12-13页 |
·细胞免疫 | 第12-13页 |
·体液免疫 | 第13页 |
3 棘皮动物免疫系统的研究意义 | 第13-14页 |
4 补体系统 | 第14-19页 |
·补体系统成分的分类 | 第14-15页 |
·补体系统的固有成分 | 第14页 |
·补体系统的调控因子 | 第14-15页 |
·补体受体 | 第15页 |
·补体系统的激活途径 | 第15-19页 |
·经典途径 | 第15-16页 |
·凝集素途径 | 第16-17页 |
·替代途径 | 第17-18页 |
·终末途径 | 第18-19页 |
·其他途径 | 第19页 |
·有关补体的研究现状 | 第19页 |
5 补体C3的研究背景 | 第19-23页 |
·补体C3的结构 | 第19-21页 |
·补体C3的多态性及相关疾病的研究 | 第21-22页 |
·补体C3多态性的相关研究 | 第21页 |
·与C3基因与有关的疾病 | 第21-22页 |
·补体C3的生物学功能 | 第22-23页 |
·调理作用 | 第22页 |
·炎症介质作用 | 第22页 |
·溶胞效应 | 第22页 |
·清除免疫复合物 | 第22页 |
·免疫调节作用 | 第22-23页 |
·补体C3分子的研究进展 | 第23页 |
6 多克隆抗体的概述 | 第23-24页 |
·多克隆抗体的优点 | 第23页 |
·抗体的应用 | 第23-24页 |
·免疫定位 | 第23-24页 |
·酶联免疫 | 第24页 |
·Western blot | 第24页 |
7 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
第二章 仿刺参补体AjC3基因的分段克隆 | 第25-34页 |
1 材料与方法 | 第25-29页 |
·材料 | 第25页 |
·实验仪器 | 第25页 |
·实验动物 | 第25页 |
·实验药品及配制 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-29页 |
·目的片段的筛选 | 第25-26页 |
·PCR引物的设计 | 第26页 |
·总RNA的提取 | 第26-27页 |
·cDNA的合成 | 第27页 |
·PCR扩增目的基因片段 | 第27-28页 |
·胶回收PCR产物 | 第28页 |
·目的基因片段与pEASY-T1克隆载体连接 | 第28-29页 |
·转化 | 第29页 |
·PCR鉴定阳性克隆 | 第29页 |
·目的基因的氨基酸序列分析 | 第29页 |
2 结果 | 第29-33页 |
·目的片段的筛选 | 第29-30页 |
·体腔细胞总RNA的提取 | 第30-31页 |
·目的基因片段的克隆 | 第31-32页 |
·目的片段氨基酸序列分析 | 第32-33页 |
3 讨论 | 第33-34页 |
第三章 仿刺参补体AjC3基因的原核表达及多克隆抗体的制备 | 第34-47页 |
1 材料与方法 | 第34-38页 |
·材料 | 第34页 |
·实验仪器 | 第34页 |
·实验动物 | 第34页 |
·实验药品及配制 | 第34页 |
·方法 | 第34-38页 |
·质粒的提取 | 第34-35页 |
·原核表达重组质粒的构建 | 第35-36页 |
·重组菌株表达条件的优化 | 第36页 |
·重组蛋白的大量诱导及表达形式的鉴定 | 第36页 |
·重组蛋白的纯化 | 第36页 |
·Western bloting分析 | 第36-37页 |
·多克隆抗体的制备 | 第37页 |
·间接ELISA检测效价 | 第37-38页 |
·Western blot检测多克隆抗体特异性 | 第38页 |
·Western blot检测AjC3蛋白在各组织中的分布 | 第38页 |
2 结果 | 第38-45页 |
·pGS-21a-1d、pGS-21a-2d、pGS-21a-3d重组质粒的构建 | 第38页 |
·表达菌株pGS21a-2d、pGS21a-3d表达条件的优化 | 第38-40页 |
·重组蛋白表达形式的鉴定 | 第40-42页 |
·重组蛋白的纯化及Western blot分析 | 第42-43页 |
·间接ELISA检测效价 | 第43-44页 |
·Western blot检测多克隆抗体特异性 | 第44页 |
·Western blot检测AjC3在各组织中的分布 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
附录 | 第55-57页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第57-60页 |
致谢 | 第60页 |