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刺参盐度调节相关基因的定量表达及组织学分析

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 文献综述第11-16页
   ·前言第11页
   ·盐度对刺参生理生态特征的影响第11-13页
     ·盐度对刺参存活与生长的影响第11-12页
     ·盐度对刺参呼吸代谢和排泄作用的影响第12页
     ·盐度对刺参渗透调节作用的影响第12页
     ·盐度对棘皮动物非特异性免疫及相关酶活的影响第12-13页
   ·盐度对水产动物组织学的影响第13页
   ·盐度相关基因及分子机制研究进展第13-14页
   ·Real-time PCR技术第14页
   ·原位杂交技术的应用第14-15页
     ·原位杂交的技术原理第15页
     ·原位杂交技术在水产动物上的应用第15页
   ·本研究的目的、意义及内容第15-16页
第二章 低盐急性胁迫对刺参生理相关指标的影响第16-27页
   ·实验材料与方法第16-22页
     ·实验材料第16页
     ·实验方法第16-18页
       ·盐度胁迫实验设计第16-17页
       ·体腔液渗透压测定第17页
       ·体腔液Na~+浓度的测定第17-18页
     ·体腔液K~+浓度的测定第18页
     ·体腔液Ca~(2+)浓度的测定第18-19页
     ·体腔液Cl~-浓度的测定第19页
     ·体腔液总蛋白的测定第19-20页
     ·体腔液细胞数量的测定第20页
     ·体腔液Na~+-K~+-ATP酶(NKA)活力的测定第20-21页
     ·体腔液谷丙转氨酶活性的测定第21页
     ·数据分析第21-22页
   ·结果分析第22-24页
     ·低盐胁迫对刺参体腔液渗透压的影响第22页
     ·低盐胁迫对刺参体腔液主要离子浓度的影响第22-23页
     ·低盐胁迫对刺参体腔液Na~+/K~+-ATPase活力的影响第23-24页
     ·低盐胁迫对刺参体腔液谷丙转氨酶的影响第24页
   ·讨论第24-27页
     ·低盐胁迫对刺参体腔液渗透压和离子浓度的影响第24-25页
     ·低盐胁迫对刺参体腔液Na~+/K~+-ATP酶的影响第25-26页
     ·低盐胁迫对刺参体腔液谷丙转氨酶活力的影响第26-27页
第三章 盐度胁迫下刺参各器官的组织学观察第27-34页
   ·材料和方法第27-28页
     ·实验材料第27页
       ·实验动物第27页
       ·主要试剂第27页
     ·实验方法第27-28页
   ·结果第28-33页
     ·盐胁迫对刺参肠组织的影响第28-29页
     ·盐胁迫对刺参呼吸树组织的影响第29-30页
     ·盐胁迫对刺参管足组织的影响第30-31页
     ·盐胁迫对刺参肌肉组织的影响第31-32页
     ·盐胁迫对刺参体壁组织的影响第32-33页
   ·讨论第33-34页
第四章 低盐胁迫下离子通道相关基因时空表达模式研究第34-48页
   ·材料和方法第34-37页
     ·实验材料第34页
     ·实验设计第34页
     ·总RNA的提取和反转录第34-35页
     ·引物设计与筛选第35-36页
     ·荧光定量PCR反应第36页
     ·数据处理第36-37页
   ·结果第37-45页
     ·总RNA提取及检测第37页
     ·低盐胁迫下盐度调节关键基因在刺参不同组织中的时空表达规律第37-45页
       ·水通道蛋白第37-38页
       ·钙转运ATP酶第38-39页
       ·F型H~+-ATP合成酶第39-40页
       ·Na~+/K~+-ATP酶第40-41页
       ·电压门控型钾离子通道第41-42页
       ·钙激活氯通道调节基因第42页
       ·乙酰胆碱受体α-9 亚基第42-43页
       ·钠-氯依赖性SNF家族基因第43页
       ·甘氨酸受体α亚基第43-44页
       ·烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NADH)第44-45页
   ·讨论第45-48页
第五章 低盐胁迫下Na~+/K~+-ATPase基因在刺参各组织的定位表达分析第48-55页
   ·材料与方法第48-50页
     ·实验材料第48-49页
       ·实验前暂养与胁迫处理第48-49页
       ·实验试剂第49页
       ·实验仪器第49页
     ·实验方法第49-50页
       ·样品固定第49页
       ·组织切片第49页
       ·核酸探针的制备第49页
       ·杂交反应具体步骤第49-50页
   ·实验结果第50-53页
     ·胁迫后观察第50页
     ·探针的制备第50页
     ·原位杂交检测结果第50-53页
       ·管足第50-51页
       ·疣足第51-52页
       ·肠第52页
       ·呼吸树第52-53页
       ·触手第53页
   ·讨论第53-55页
参考文献第55-62页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第62-64页

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