阿昔洛韦中基因毒性物质的检测及2/3水合物晶型的制备研究

【摘要】：阿昔洛韦(ACV)是一种重要的抗病毒药物,主要用于治疗单纯疱疹病毒所引起的各种感染。在阿昔洛韦质量研究中,总结发现阿昔洛韦合成工艺中使用的一种催化剂对甲苯磺酸属于基因毒性物质,在阿昔洛韦中的残留应控制在3ppm以下。因此有必要建立一种灵敏度高、重复性好的检测方法用于检测阿昔洛韦产品中对甲苯磺酸的残留。此外阿昔洛韦存在6种晶型,相比其他几种晶型,阿昔洛韦2/3水合物具有更好的生物利用度和临床疗效,需要对阿昔洛韦2/3水合物晶型的制备方法进行深入研究。本论文的研究围绕上述两个问题展开,具体内容如下:首先是阿昔洛韦中基因毒性物质对甲苯磺酸的检测:论文通过先固相萃取富集,后HPLC检测的方法,测定阿昔洛韦中对甲苯磺酸的残留。通过对固相萃取柱类型、样品上样速率、洗脱液浓度和洗脱速率等萃取分离参数的选择,建立阿昔洛韦中对甲苯磺酸的固相萃取方法为:0.1g阿昔洛韦溶于10mL浓度为10-4 M盐酸,在Cleanert SAX固相萃取柱上,阿昔洛韦溶液先以1.0mL/min上样,用10-4 M的HCl淋洗萃取柱至完全除去阿昔洛韦,最后用10mL浓度为1.0M盐酸洗脱,收集滤液定容到10mL,富集得到的对甲苯磺酸通过HPLC法进行定量分析。通过对流动相和检测条件的选择,建立对甲苯磺酸的色谱条件为:色谱柱:Inertsil ODS-SP C18柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈:0.1%磷酸溶液=15:85(v/v);柱温:30℃;流速:1.0mL/min;检测波长:222nm。通过对富集-检测方法的专属性、重复性、线性、灵敏度、准确度和耐用性的考察,证明该方法具有重复性好,灵敏度高,耐用性好,操作简便等优点,能有效检测阿昔洛韦中对甲苯磺酸的残留。第二部分是阿昔洛韦2/3水合物晶型制备研究:通过对降温结晶法、反溶剂沉淀法和反应沉淀法进行初步筛选后发现:降温结晶法和反溶剂沉淀法制得的产品失水率、PXRD数据与阿昔洛韦2/3水合物数据不符;而反应沉淀法得到的产品用TG、FT-IR和PXRD表征,发现其晶型属于阿昔洛韦2/3水合物。在反应沉淀法中,阿昔洛韦溶于氢氧化钠溶液形成阿昔洛韦钠盐,用盐酸中和后,沉淀结晶得到阿昔洛韦2/3水合物。通过对制备参数如:氢氧化钠浓度、盐酸浓度、盐酸滴加速率、结晶温度和搅拌速率等选择,确定反应沉淀法的制备参数如下:将阿昔洛韦溶于1.25M的氢氧化钠溶液中,以2mL/min的滴加速率滴加1.0M盐酸中和等量的氢氧化钠,控制溶液温度为10℃,搅拌速率为300rpm,待盐酸滴加完毕,停止搅拌,静置3h,将析出的阿昔洛韦晶体经减压抽滤,在50℃下干燥20h,得到阿昔洛韦2/3水合物。制备得到的阿昔洛韦产品采用TG、FT-IR和PXRD进行晶型表征属于阿昔洛韦2/3水合物。该制备方法收率为93%,且制备方法便于生产放大。将阿昔洛韦2/3水合物在40±2℃加速试验下,保存6个月,其PXRD和HPLC稳定性数据表明其具有很好的稳定性。实验最后,尝试用阿昔洛韦粗品制备阿昔洛韦2/3水合物,制得产品的TG和PXRD数据和阿昔洛韦2/3水合物的一致,但仍有杂质未降到合格水平。因此,从阿昔洛韦粗品制备阿昔洛韦2/3水合物的过程,仍需先对粗品纯化,再通过反应沉淀法制备阿昔洛韦2/3水合物。
【关键词】：阿昔洛韦 基因毒性物质 固相萃取 对甲苯磺酸 阿昔洛韦 2/3 水合物 晶型制备 晶型表征
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R914