| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一部分 硫利达嗪对类肝癌干细胞的杀伤作用研究 | 第9-23页 |
| 1 引言 | 第9-10页 |
| 2 材料与方法 | 第10-13页 |
| ·材料 | 第10页 |
| ·方法 | 第10-13页 |
| ·肝癌干细胞的悬浮培养 | 第10-11页 |
| ·MTT 检测药物对肝癌细胞的杀伤作用 | 第11页 |
| ·流式检测细胞周期 | 第11页 |
| ·克隆形成实验 | 第11页 |
| ·结晶紫染色观察细胞活性 | 第11-12页 |
| ·Hoechst33342 染色法检测细胞凋亡 | 第12页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第12页 |
| ·Western blot 检测相关目的蛋白及细胞凋亡蛋白 | 第12页 |
| ·实验数据的统计学分析 | 第12-13页 |
| 3 结果 | 第13-21页 |
| ·体外悬浮培养富集肝癌干细胞 | 第13页 |
| ·Western blot 检测肝癌干细胞相关蛋白表达的变化 | 第13-14页 |
| ·肝癌干细胞对传统化疗药物具有耐药性 | 第14-15页 |
| ·悬浮培养富集的肝癌干细胞生长速率迟缓 | 第15页 |
| ·MTT 检测硫利达嗪(Thioridazine)对肝癌细胞生长的抑制效果 | 第15-16页 |
| ·结晶紫染色检测 THO 对肝癌细胞的生长抑制效果 | 第16-17页 |
| ·Hoechst33342 染色实验检测 THO 诱导的肝癌细胞凋亡 | 第17页 |
| ·细胞流式检测 THO 诱导肝癌细胞发生凋亡现象 | 第17-18页 |
| ·Western blot 检测 THO 诱导肝癌细胞凋亡相关蛋白 | 第18-19页 |
| ·THO 联合 DOX 对肝癌细胞的增强杀伤作用 | 第19-21页 |
| 4 结论与讨论 | 第21-23页 |
| 第二部分 重组抑制肝癌单纯疱疹病毒相关质粒 tkBAC-fr 的构建 | 第23-48页 |
| 1 引言 | 第23-28页 |
| ·肝癌研究进展 | 第23-25页 |
| ·溶瘤单纯疱疹病毒（HSV）治疗肿瘤的现状 | 第25-27页 |
| ·粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony stimulating factor，GM-CSF) | 第27-28页 |
| 2 实验材料与方法 | 第28-42页 |
| ·实验材料 | 第28-31页 |
| ·生化试剂 | 第28-29页 |
| ·菌株与质粒 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29-30页 |
| ·主要溶液配制 | 第30页 |
| ·引物合成 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-42页 |
| ·分子克隆 | 第31-40页 |
| ·疱疹病毒的构建 | 第40-42页 |
| ·细胞培养 | 第40-41页 |
| ·病毒的包装 | 第41-42页 |
| 3. 实验结果 | 第42-47页 |
| ·tkBAC-fr 重组质粒的构建 | 第42-46页 |
| ·tkBAC-fr 质粒与疱疹病毒基因组进行同源重组 | 第46-47页 |
| 4. 结论与展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
