摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-8页 |
1. 前言 | 第8-19页 |
·植物逆境胁迫及其应对方式 | 第8页 |
·植物逆境胁迫 | 第8页 |
·植物应对逆境胁迫的方式 | 第8页 |
·钙信号及其转导 | 第8-9页 |
·CBL蛋白和CIPK蛋白 | 第9-10页 |
·CBL蛋白 | 第9-10页 |
·CIPK蛋白 | 第10页 |
·CBL-CIPK信号系统 | 第10-11页 |
·CBL-CIPK信号系统的作用机制 | 第10-11页 |
·CBL、CIPK的亚细胞定位 | 第11页 |
·CBL-CIPK信号系统的功能研究 | 第11-16页 |
·CBL-CIPK信号系统与盐胁迫 | 第12-13页 |
·CBL-CIPK信号系统与低钾胁迫 | 第13-14页 |
·CBL-CIPK信号系统与高pH胁迫 | 第14-15页 |
·CBL-CIPK信号系统的其他功能 | 第15-16页 |
·互作蛋白筛选研究技术 | 第16-17页 |
·技术路线 | 第17页 |
·本研究目的和意义 | 第17-19页 |
2. 实验材料与方法 | 第19-35页 |
·实验材料与试剂 | 第19-20页 |
·植物材料 | 第19页 |
·菌株 | 第19页 |
·载体 | 第19页 |
·工具酶和试剂 | 第19页 |
·仪器设备 | 第19-20页 |
·引物 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-35页 |
·RNA提取及反转录反应 | 第20-22页 |
·酵母双杂交 | 第22-29页 |
·体外互作实验 | 第29-33页 |
·野生型和突变体拟南芥在不同环境下的表型分析 | 第33页 |
·质膜H~+-ATPase活性的测定 | 第33-35页 |
3. 结果与分析 | 第35-50页 |
·拟南芥叶片RNA的提取及反转录 | 第35页 |
·AtCBL10和AtCIPK11蛋白的酵母双杂交实验 | 第35-38页 |
·目的基因CBL10、CIPK11的克隆 | 第35-36页 |
·酵母双杂交表达载体的构建及鉴定 | 第36-37页 |
·重组质粒转化酵母的菌液PCR检测 | 第37页 |
·AtCBL10和AtCIPK11相互作用鉴定 | 第37-38页 |
·AtCBL10和AtCIPK11蛋白的体外相互作用实验 | 第38-41页 |
·目的基因CBL10、CIPK11的克隆 | 第38-39页 |
·原核表达载体的构建及鉴定 | 第39-40页 |
·重组质粒转化BL21感受态细胞的PCR检测 | 第40页 |
·原核表达蛋白的pull-down和Western blot分析 | 第40-41页 |
·野生型和突变体拟南芥在不同环境下的表型及统计分析 | 第41-45页 |
·cb110突变体能够忍受外界高pH环境 | 第41-43页 |
·cb110突变体对盐的敏感性增强 | 第43-44页 |
·cb110突变体对金属离子的敏感性 | 第44-45页 |
·野生型和突变体拟南芥质膜H~+-ATPase活性的测定 | 第45-50页 |
·质膜纯度的测定 | 第45-46页 |
·质膜囊泡质子转运的测定 | 第46-47页 |
·CBL10 正调控质膜H~+-ATPase活性 | 第47-50页 |
4. 讨论 | 第50-53页 |
5. 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-57页 |
试剂配方 | 第57-61页 |
缩略语 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |