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拟南芥CBL10与CIPK11相互作用并调节质膜H~+ATPase的活性

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
1. 前言第8-19页
   ·植物逆境胁迫及其应对方式第8页
     ·植物逆境胁迫第8页
     ·植物应对逆境胁迫的方式第8页
   ·钙信号及其转导第8-9页
   ·CBL蛋白和CIPK蛋白第9-10页
     ·CBL蛋白第9-10页
     ·CIPK蛋白第10页
   ·CBL-CIPK信号系统第10-11页
     ·CBL-CIPK信号系统的作用机制第10-11页
     ·CBL、CIPK的亚细胞定位第11页
   ·CBL-CIPK信号系统的功能研究第11-16页
     ·CBL-CIPK信号系统与盐胁迫第12-13页
     ·CBL-CIPK信号系统与低钾胁迫第13-14页
     ·CBL-CIPK信号系统与高pH胁迫第14-15页
     ·CBL-CIPK信号系统的其他功能第15-16页
   ·互作蛋白筛选研究技术第16-17页
   ·技术路线第17页
   ·本研究目的和意义第17-19页
2. 实验材料与方法第19-35页
   ·实验材料与试剂第19-20页
     ·植物材料第19页
     ·菌株第19页
     ·载体第19页
     ·工具酶和试剂第19页
     ·仪器设备第19-20页
     ·引物第20页
   ·实验方法第20-35页
     ·RNA提取及反转录反应第20-22页
     ·酵母双杂交第22-29页
     ·体外互作实验第29-33页
     ·野生型和突变体拟南芥在不同环境下的表型分析第33页
     ·质膜H~+-ATPase活性的测定第33-35页
3. 结果与分析第35-50页
   ·拟南芥叶片RNA的提取及反转录第35页
   ·AtCBL10和AtCIPK11蛋白的酵母双杂交实验第35-38页
     ·目的基因CBL10、CIPK11的克隆第35-36页
     ·酵母双杂交表达载体的构建及鉴定第36-37页
     ·重组质粒转化酵母的菌液PCR检测第37页
     ·AtCBL10和AtCIPK11相互作用鉴定第37-38页
   ·AtCBL10和AtCIPK11蛋白的体外相互作用实验第38-41页
     ·目的基因CBL10、CIPK11的克隆第38-39页
     ·原核表达载体的构建及鉴定第39-40页
     ·重组质粒转化BL21感受态细胞的PCR检测第40页
     ·原核表达蛋白的pull-down和Western blot分析第40-41页
   ·野生型和突变体拟南芥在不同环境下的表型及统计分析第41-45页
     ·cb110突变体能够忍受外界高pH环境第41-43页
     ·cb110突变体对盐的敏感性增强第43-44页
     ·cb110突变体对金属离子的敏感性第44-45页
   ·野生型和突变体拟南芥质膜H~+-ATPase活性的测定第45-50页
     ·质膜纯度的测定第45-46页
     ·质膜囊泡质子转运的测定第46-47页
     ·CBL10 正调控质膜H~+-ATPase活性第47-50页
4. 讨论第50-53页
5. 结论第53-54页
参考文献第54-57页
试剂配方第57-61页
缩略语第61-62页
致谢第62页

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