| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第8-18页 |
| ·植物的耐盐机制进展 | 第8-13页 |
| ·植物对盐胁迫的形态适应性 | 第8-9页 |
| ·植物对盐胁迫的生理适应性 | 第9-13页 |
| ·离子平衡机制 | 第9-10页 |
| ·渗透调节机制 | 第10-11页 |
| ·活性氧的清除机制 | 第11-12页 |
| ·植物代谢途径的改变 | 第12页 |
| ·植物激素含量的改变 | 第12页 |
| ·分子水平耐盐性 | 第12-13页 |
| ·植物基因分离及功能验证进展 | 第13-15页 |
| ·获取目的基因的方法 | 第13-14页 |
| ·基因功能验证主要方法 | 第14-15页 |
| ·本研究的目意义及技术路线 | 第15-18页 |
| ·研究的目的意义 | 第15-17页 |
| ·研究技术路线 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-29页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·材料 | 第18页 |
| ·主要器材 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-29页 |
| ·盐胁迫下角果木根部水溶性蛋白的测定 | 第18-19页 |
| ·红树角果木的处理 | 第18页 |
| ·总蛋白含量测定 | 第18-19页 |
| ·角果木根部总RNA的制备及检测 | 第19页 |
| ·转录组测序与分析 | 第19-20页 |
| ·数字表达谱测序及分析 | 第20-21页 |
| ·部分差异表达基因的半定量RT-PCR验证 | 第21-22页 |
| ·K-means聚类基因的定量检测 | 第22页 |
| ·8个候选基因cDNA的获得及序列分析 | 第22-24页 |
| ·基因的TA克隆 | 第23页 |
| ·转化大肠杆菌感受态细胞 | 第23页 |
| ·重组质粒的提取及酶切鉴定 | 第23-24页 |
| ·重组质粒DNA的酶切鉴定 | 第24页 |
| ·测序结果的生物信息学分析 | 第24页 |
| ·候选基因过表达载体的构建 | 第24-26页 |
| ·目的基因片段的预处理 | 第24页 |
| ·载体的预处理 | 第24-25页 |
| ·基于聚合反应的连接 | 第25页 |
| ·重组菌落的PCR验证 | 第25-26页 |
| ·过表达候选基因农杆菌工程菌的制备 | 第26页 |
| ·转过表达候选基因拟南芥的获得 | 第26-27页 |
| ·材料准备 | 第26页 |
| ·过表达载体的遗传转化 | 第26-27页 |
| ·转基因过表达植株的潮霉素筛选 | 第27页 |
| ·外源基因在转基因植株中的表达检测 | 第27页 |
| ·过表达植株的RT-PCR检测 | 第27页 |
| ·表达植株荧光标记检测 | 第27页 |
| ·拟南芥筛选中盐浓度的确定 | 第27-29页 |
| ·筛选培养基的配置 | 第27页 |
| ·筛选过程 | 第27-28页 |
| ·转基因拟南芥的耐盐鉴定 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-51页 |
| ·盐胁迫对角果木水溶性蛋白合成的影响 | 第29页 |
| ·角果木根部总RNA的提取 | 第29-30页 |
| ·盐胁迫下角果木根部表达基因的转录组测序及分析 | 第30-32页 |
| ·角果木根部盐胁迫差异基因表达谱分析 | 第32-35页 |
| ·盐胁迫下角果木根部差异基因的表达验证 | 第35-39页 |
| ·盐胁迫差异基因的半定量RT-PCR检测 | 第35-36页 |
| ·盐胁迫差异基因的real-time PCR分析结果 | 第36-39页 |
| ·候选基因全长分离及分析 | 第39-46页 |
| ·植物表达载体构建 | 第46-47页 |
| ·拟南芥遗传转化及功能验证 | 第47-49页 |
| ·转基因植株的获得 | 第47页 |
| ·转基因植株的潮霉素筛选 | 第47页 |
| ·转基因植株的潮霉素PCR鉴定 | 第47-48页 |
| ·转基因拟南芥的荧光检测结果 | 第48-49页 |
| ·转基因拟南芥的耐盐性鉴定 | 第49-51页 |
| ·拟南芥筛选浓度的确定 | 第49页 |
| ·转基因拟南芥的耐盐鉴定 | 第49-51页 |
| 6 讨论 | 第51-54页 |
| 7 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 附录 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61页 |