| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第8-21页 |
| ·乳酸菌及其胞外多糖 | 第8-17页 |
| ·乳酸菌胞外多糖的结构及理化性质 | 第9页 |
| ·乳酸菌胞外多糖的生理功能 | 第9-10页 |
| ·乳酸菌胞外多糖的生物合成 | 第10-14页 |
| ·乳酸菌胞外多糖生物合成的功能基因研究 | 第14-17页 |
| ·乳酸菌基因组学研究 | 第17-18页 |
| ·外源基因在乳酸菌中的表达 | 第18页 |
| ·本实验研究的意义与研究内容 | 第18-21页 |
| ·研究的背景和意义 | 第18-19页 |
| ·研究的主要内容 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-40页 |
| ·材料 | 第21-29页 |
| ·菌种、质粒及引物 | 第21-23页 |
| ·试剂 | 第23-24页 |
| ·仪器与设备 | 第24-25页 |
| ·抗生素 | 第25页 |
| ·工具酶及DNA、蛋白Marker | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·标准溶液的配制 | 第26-29页 |
| ·实验方法 | 第29-40页 |
| ·在线网络服务器和生物信息学软件 | 第30页 |
| ·Lb.kefiranofaciens ZW3染色体DNA的提取 | 第30页 |
| ·eps基因簇中各基因的扩增 | 第30-32页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第32页 |
| ·乳酸菌质粒pMG36e-EPS基因的酶切与连接 | 第32-34页 |
| ·乳酸菌重组质粒pMG36e-EPS基因的电转化 | 第34-35页 |
| ·乳酸菌质粒的提取方法 | 第35-36页 |
| ·乳酸菌重组质粒pMG36e-EPS基因的验证 | 第36页 |
| ·重组乳酸乳球菌及WH-C1生长曲线的测定 | 第36页 |
| ·WANG1296蛋白在乳酸乳球菌WH-C1中的表达 | 第36-37页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测 | 第37-38页 |
| ·苯酚-硫酸法标准曲线的制作 | 第38页 |
| ·重组乳酸菌及其野生菌胞外多糖产量的测定 | 第38-40页 |
| 3 结果与讨论 | 第40-63页 |
| ·马奶酒样乳杆菌ZW3基因组分析 | 第40-42页 |
| ·Lb.kefiranofaciens ZW3染色体基因组基本特点 | 第40页 |
| ·Lb.kefiranofaciens ZW3的质粒基因组基本特点 | 第40-42页 |
| ·马奶酒样乳杆菌ZW3胞外多糖合成相关基因簇 | 第42-45页 |
| ·胞外多糖合成相关基因簇基本特点 | 第42-43页 |
| ·胞外多糖合成基因簇中各基因的特征比对 | 第43-45页 |
| ·乳酸菌表达载体pMG36e-EPS基因的构建 | 第45-50页 |
| ·Lb.kefiranofaciens ZW3中eps基因簇中基因片段的PCR扩增 | 第46-47页 |
| ·乳酸菌表达载体pMG36e-EPS基因的验证 | 第47-48页 |
| ·乳酸乳球菌WH-C1及其转化子的生长曲线测定 | 第48-50页 |
| ·马奶酒样乳杆菌ZW3 WANG 1296基因的生物信息学分析 | 第50-59页 |
| ·WANG 1296基因核苷酸和蛋白质序列同源性比对和分析 | 第50-51页 |
| ·WANG 1296基因蛋白质序列理化特性 | 第51-53页 |
| ·WANG1296蛋白的结构特性 | 第53-56页 |
| ·WANG1296蛋白的跨膜结构区分析 | 第56-57页 |
| ·WANG1296蛋白的信号肽分析 | 第57-58页 |
| ·WANG1296蛋白的亚细胞定位分析 | 第58-59页 |
| ·W.ANG_1296基因在乳酸乳球菌WH-C1/pMG36e-WANG1296中表达 | 第59-63页 |
| ·WANG1296蛋白在乳酸乳球菌转化子WH-C1/pMG36e-WANG1296中的表达 | 第59-60页 |
| ·重组乳酸乳球菌WH-C1及其野生菌胞外多糖产量分析 | 第60-63页 |
| 4 结论 | 第63-64页 |
| 5 展望 | 第64-65页 |
| 6 参考文献 | 第65-73页 |
| 7 致谢 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74页 |
