| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-20页 |
| ·红曲与红曲霉的研究背景 | 第8-9页 |
| ·红曲的介绍 | 第8页 |
| ·红曲霉的生物学特征 | 第8页 |
| ·红曲霉的分类 | 第8-9页 |
| ·红曲霉的代谢产物 | 第9-11页 |
| ·红曲色素 | 第9-10页 |
| ·莫纳可林(Monacolins)类物质 | 第10-11页 |
| ·酶类活性物质 | 第11页 |
| ·其它代谢产物 | 第11页 |
| ·红曲霉中的桔霉素 | 第11-13页 |
| ·桔霉素的毒性研究 | 第11-12页 |
| ·桔霉素合成途径的探究 | 第12-13页 |
| ·控制桔霉素产量的方法 | 第13-14页 |
| ·菌种选育 | 第13-14页 |
| ·发酵条件的优化 | 第14页 |
| ·桔霉素相关基因的研究 | 第14页 |
| ·红曲霉基因工程技术 | 第14-18页 |
| ·农杆菌介导转化 | 第14-15页 |
| ·Tail-PCR扩增T-DNA侧翼未知序列 | 第15-17页 |
| ·基因敲除 | 第17-18页 |
| ·研究目的及意义 | 第18页 |
| ·本实验研究内容 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-39页 |
| ·实验材料与仪器 | 第20-25页 |
| ·实验菌株 | 第20页 |
| ·实验试剂 | 第20-21页 |
| ·实验仪器 | 第21-22页 |
| ·溶液配制 | 第22-23页 |
| ·培养基配制 | 第23-24页 |
| ·PCR扩增所用的引物 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-39页 |
| ·农杆菌介导红曲霉的转化 | 第25-27页 |
| ·Tail-PCR扩增T-DNA侧翼未知序列 | 第27-32页 |
| ·括霉素合成相关的开放阅读框(ORFs)基因的定点敲除 | 第32-39页 |
| 3 结果与讨论 | 第39-59页 |
| ·农杆菌介导红曲霉的转化 | 第39-40页 |
| ·农杆菌介导的红曲霉转化库的构建 | 第39-40页 |
| ·红曲霉转化库中桔霉素突变子的初筛 | 第40页 |
| ·红曲霉产桔霉素及色素相关基因的Tail-PCR的克隆 | 第40-43页 |
| ·突变子基因组的PCR鉴定 | 第40-41页 |
| ·突变株基因组的Tail-PCR扩增 | 第41-43页 |
| ·桔霉素合成相关的开放阅读框(ORFs)基因的定点敲除 | 第43-57页 |
| ·突变重组质粒ORF1、ORF3、ORF4、ORF5的构建 | 第43-53页 |
| ·突变重组质粒的转化 | 第53页 |
| ·转化突变株的PCR验证 | 第53-56页 |
| ·突变株产桔霉素的检测 | 第56页 |
| ·突变株产色素的检测 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 4 结论 | 第59-60页 |
| 5 展望 | 第60-61页 |
| 6 参考文献 | 第61-65页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第65-66页 |
| 8 致谢 | 第66页 |
