| 中文摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 缩略词表 | 第15-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-32页 |
| 1 问题由来 | 第17-18页 |
| 2 文献综述 | 第18-30页 |
| ·骨骼肌发育一般规律 | 第18-19页 |
| ·调节骨骼肌生长的重要细胞因子 | 第19-22页 |
| ·细胞因子激活的骨骼肌转录因子研究进展 | 第22-23页 |
| ·负调节骨骼肌生长发育的Myostatin信号通路研究进展 | 第23-30页 |
| ·调节Myostatin蛋白分泌的基因研究进展 | 第25-27页 |
| ·调节Myostatin蛋白复合体活化的基因研究进展 | 第27-28页 |
| ·调节Myostatin配体与受体结合的基因研究进展 | 第28-30页 |
| 3 研究目的和意义 | 第30-32页 |
| 第二章 受Myostatin调节的猪FS结构域家族基因的克隆与功能研究 | 第32-67页 |
| 1 前言 | 第32-34页 |
| 2 实验材料与方法 | 第34-51页 |
| ·实验材料 | 第34-38页 |
| ·DNA样品 | 第34-35页 |
| ·组织样品 | 第35页 |
| ·主要载体和细胞系 | 第35-36页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第36-37页 |
| ·主要实验仪器 | 第37页 |
| ·主要分析网址以及软件 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-51页 |
| ·组织RNA抽提 | 第38页 |
| ·cDNA合成 | 第38-39页 |
| ·猪FS结构域家族基因克隆 | 第39-43页 |
| ·猪FS结构域家族基因定位方法 | 第43页 |
| ·猪FS结构域家族基因半定量方法 | 第43页 |
| ·猪FS结构域家族基因和骨骼肌标记基因荧光定量PCR方法 | 第43-44页 |
| ·猪WFIKKN2基因与性状关联分析 | 第44-45页 |
| ·猪WFIKKN2基因转录本在Myostatin信号通路中功能研究 | 第45-51页 |
| ·猪WFIKKN2和MSTN相关载体构建 | 第45-47页 |
| ·细胞转染实验 | 第47-48页 |
| ·启动子活性检测 | 第48-49页 |
| ·猪WFIKKN2基因不同转录本功能验证 | 第49-50页 |
| ·猪WFIKKN2 TV1抑制Myostatin信号通路影响骨骼肌的分化 | 第50-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-63页 |
| ·猪FSTL3、WFIKKN1和WFIKKN2基因及其序列分析 | 第51-53页 |
| ·猪FSTL3、WFIKKN1和WFIKKN2基因染色体定位结果 | 第53页 |
| ·猪FS结构域家族基因表达规律与骨骼肌生长的规律 | 第53-58页 |
| ·猪FSTL3、WFIKKN1、WFIKKN2和MSTN基因半定量结果 | 第53-54页 |
| ·骨骼肌中猪FSTL3、WFIKKN1、WFIKKN2和MSTN表达规律 | 第54-56页 |
| ·通城和大白猪骨骼肌生长规律比较 | 第56-58页 |
| ·猪WFIKKN2基因与性状关联分析结果 | 第58-59页 |
| ·猪WFIKKN2基因转录本在Myostatin信号通路中功能研究 | 第59-63页 |
| ·猪Myostatin下调WFIKKN2基因启动子活性 | 第59-60页 |
| ·猪WFIKKN2基因不同转录本功能验证 | 第60-61页 |
| ·猪WFIKKN2通过抑制Myostatin信号通路影响骨骼肌的分化 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| ·猪FS结构域家族基因编码蛋白与Myostatin互作关系 | 第63-64页 |
| ·猪FS结构域家族基因表达特征的讨论 | 第64-65页 |
| ·猪WFIKKN2基因与性状关联结果讨论 | 第65页 |
| ·猪WFIKKN2功能研究讨论 | 第65页 |
| 5 小结 | 第65-67页 |
| 第三章 TEF-1靶基因验证 | 第67-78页 |
| 1 前言 | 第67-68页 |
| ·TEF-1转录增强因子研究进展 | 第67页 |
| ·靶基因鉴定方法 | 第67-68页 |
| 2 实验材料与方法 | 第68-72页 |
| ·实验材料 | 第68-69页 |
| ·实验方法 | 第69-72页 |
| ·TEF-1下游靶基因启动子预测以及筛选 | 第69页 |
| ·TEF-1候选靶基因定量PCR | 第69-70页 |
| ·TEF-1候选靶基因启动子活性检测 | 第70-72页 |
| ·TEF-1候选靶基因启动子载体构建 | 第70-71页 |
| ·双荧光报告系统检测TEF-1调节的靶基因启动子活性 | 第71-72页 |
| 3 结果与分析 | 第72-76页 |
| ·TEF-1下游靶基因候选基因筛选结果 | 第72页 |
| ·TEF-1超表达C2C12中Nudt6,Fzr1,Tcta表达变化 | 第72-74页 |
| ·TEF-1候选靶基因Nudt6,Fzr1启动子活性检测 | 第74-76页 |
| 4 讨论 | 第76页 |
| 5 小结 | 第76-78页 |
| 第四章 TEF-1靶基因NUDT6在猪中的克隆、定位、表达模式及其与性状关联研究 | 第78-93页 |
| 1 前言 | 第78-79页 |
| 2 实验材料与方法 | 第79-81页 |
| ·实验材料 | 第79页 |
| ·实验方法 | 第79-81页 |
| ·猪NUDT6和FGF-2基因的克隆 | 第79页 |
| ·猪NUDT6基因的定位 | 第79-80页 |
| ·猪NUDT6和FGF-2基因的定量分析 | 第80-81页 |
| ·猪NUDT6基因多态性检测以及性状关联分析 | 第81页 |
| 3 结果与分析 | 第81-91页 |
| ·猪NUDT6与FGF-2基因序列分析结果 | 第81-84页 |
| ·猪NUDT6基因定位结果 | 第84页 |
| ·猪NUDT6与FGF-2基因组织表达特征 | 第84-87页 |
| ·猪NUDT6多态性以及性状关联结果 | 第87-91页 |
| 4 讨论 | 第91-92页 |
| ·猪NUDT6和FGF-2基因相关关系讨论 | 第91页 |
| ·猪NUDT6基因与性状关联分析讨论 | 第91-92页 |
| 5 小结 | 第92-93页 |
| 结论 | 第93-94页 |
| 本研究的特色与主要创新点 | 第94页 |
| 本研究不足之处 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-107页 |
| 附录一 NUDT6基因转录本mRNA全长以及预测蛋白质序列 | 第107-108页 |
| 附录二 FSTL3基因DNA,mRNA全长以及预测蛋白质序列 | 第108-111页 |
| 附录三 WFIKKN1基因部分DNA,mRNA以及预测蛋白质序列 | 第111-113页 |
| 附录四 WFIKKN2基因DNA,mRNA以及预测蛋白质序列 | 第113-118页 |
| 附录五 不同物种FST和FSTL3氨基酸序列比对图和进化树 | 第118-121页 |
| 附录六 不同物种Myostatin和GDF-11氨基酸序列比对图和进化树 | 第121-123页 |
| 附录七 不同物种WFIKKN1和WFIKKN2氨基酸序列比对图和进化树 | 第123-126页 |
| 研究生期间论文发表情况 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127页 |
