摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 绪论 | 第9-15页 |
1 研究背景 | 第9-10页 |
2 相关文献综述 | 第10-14页 |
·油菜油脂研究进展 | 第10-11页 |
·拟南芥与油菜在遗传学上的同线性和共线性 | 第11-12页 |
·拟南芥的生物信息学和基因组学研究进展 | 第12-14页 |
3 本研究目的与意义 | 第14-15页 |
第二章 拟南芥AtCS82基因的生物信息学及表达情况分析 | 第15-25页 |
1 材料与方法 | 第15-18页 |
·材料 | 第15页 |
·供试材料 | 第15页 |
·分子生物学试剂 | 第15页 |
·仪器设备 | 第15页 |
·方法 | 第15-18页 |
·AtCS82基因的生物信息学分析 | 第15-16页 |
·拟南芥植株的生长条件 | 第16页 |
·拟南芥植株总RNA的提取 | 第16-17页 |
·RNA反转录成cDNA | 第17-18页 |
·AtCS82基因在拟南芥不同组织中的表达分析 | 第18页 |
2 结果与分析 | 第18-24页 |
·AtCS82基因的生物信息学分析 | 第18-23页 |
·AtCS82蛋白质理化性质 | 第18-21页 |
·AtCS82蛋白质的结构特征 | 第21-22页 |
·AtCS82蛋白的聚类分析 | 第22-23页 |
·拟南芥不同组织中AtCS82基因的表达水平分析 | 第23-24页 |
3 小结与讨论 | 第24-25页 |
第三章 AtCS82基因T-DNA插入纯合突变体的筛选 | 第25-33页 |
1 材料与方法 | 第25-28页 |
·材料 | 第25页 |
·供试材料 | 第25页 |
·分子生物学试剂 | 第25页 |
·仪器设备 | 第25页 |
·方法 | 第25-28页 |
·拟南芥植株的生长条件 | 第25页 |
·拟南芥植株总DNA的提取 | 第25-26页 |
·拟南芥植株总RNA的提取 | 第26页 |
·RNA反转录成cDNA | 第26页 |
·T-DNA插入纯合子的双引物法检测 | 第26-28页 |
·纯合突变体中AtCS82基因表达的RT-PCR验证 | 第28页 |
2 结果与分析 | 第28-31页 |
·cs82-a突变体纯合子筛选 | 第28-29页 |
·cs82-b突变体纯合子筛选 | 第29-30页 |
·cs82-c突变体纯合子筛选 | 第30-31页 |
·AtCS82基因T-DNA插入突变体纯合子筛选结果统计 | 第31页 |
3 小结与讨论 | 第31-33页 |
第四章 AtCS82基因过表达载体构建与拟南芥的遗传转化 | 第33-51页 |
1 材料与方法 | 第33-44页 |
·材料 | 第33-36页 |
·供试材料 | 第33页 |
·菌株和载体 | 第33页 |
·分子生物学试剂 | 第33页 |
·仪器设备 | 第33页 |
·培养基 | 第33-36页 |
·抗生素 | 第36页 |
·方法 | 第36-44页 |
·AtCS82基因全长CDS的克隆 | 第36页 |
·PCR产物回收 | 第36-37页 |
·克隆片段的测序与比对 | 第37-38页 |
·质粒提取 | 第38页 |
·克隆片段与目的载体的连接 | 第38-39页 |
·感受态细胞的制备 | 第39-40页 |
·热激法转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第40-41页 |
·冻融法转化根癌农杆菌GV3101感受态细胞 | 第41-42页 |
·拟南芥植株的培育 | 第42页 |
·浸花法转化拟南芥 | 第42-43页 |
·筛选拟南芥的潮霉素浓度的确定 | 第43页 |
·拟南芥植株总DNA的提取 | 第43页 |
·拟南芥植株总RNA的提取 | 第43页 |
·RNA反转录成cDNA | 第43页 |
·拟南芥转化子的筛选和鉴定 | 第43-44页 |
·转化子的过表达分析 | 第44页 |
2 结果与分析 | 第44-49页 |
·AtCS82基因全长CDS的克隆 | 第44-45页 |
·测序结果比对 | 第45-46页 |
·AtCS82基因过表达载体构建与验证 | 第46页 |
·过表达载体转化根癌农杆菌GV3101 | 第46-47页 |
·潮霉素筛选拟南芥浓度的确定 | 第47页 |
·拟南芥转化子的获得 | 第47-48页 |
·转基因植株过表达分析 | 第48-49页 |
3 小结与讨论 | 第49-51页 |
第五章 总结与创新点 | 第51-52页 |
1 总结 | 第51页 |
2 创新点 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
缩写表 | 第57-59页 |
致谢 | 第59-61页 |
作者简介 | 第61页 |