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2010年~2012年中国H6亚型禽流感病毒生物学特性研究及H6HA单克隆抗体的制备

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 引言第12-19页
   ·HA 蛋白的结构与功能第12-17页
     ·HA 蛋白与病毒的侵入和出芽第12-13页
     ·HA 蛋白的裂解第13-14页
     ·HA 蛋白与唾液酸受体特异性第14页
     ·HA 受体结合特性在传播过程中的选择压力第14-15页
     ·HA 蛋白与糖基化第15-16页
     ·HA 蛋白糖基化位点与受体结合特异性第16-17页
     ·HA 蛋白糖基化与抗原特异性第17页
   ·我国 H6 亚型禽流感病毒的流行与监测第17-18页
   ·本研究的目的和意义第18-19页
第二章 H6 亚型禽流感病毒进化分析第19-28页
   ·材料第19-20页
     ·病毒第19页
     ·试验用 SPF 鸡胚第19页
     ·主要试剂第19页
     ·引物及参考序列第19-20页
   ·方法第20页
     ·病毒基因组 RNA 提取和反转录第20页
     ·禽流感病毒基因的扩增和目的片段的回收第20页
     ·病毒全基因的序列测定第20页
     ·全基因的序列的拼接与糖基化位点分析第20页
     ·基因型划定第20页
   ·结果与分析第20-27页
     ·PCR 及序列测定结果第20-21页
     ·HA 基因的遗传进化分析第21页
     ·NA 基因的遗传进化分析第21-24页
     ·内部基因的遗传进化分析第24-26页
     ·基因型第26-27页
   ·讨论第27-28页
第三章 H6 亚型禽流感病毒的抗原性分析第28-33页
   ·材料与方法第28-29页
     ·病毒分离株第28页
     ·SPF 鸡胚和 SPF 鸡第28页
     ·试剂及实验室耗材第28页
     ·病毒特异性血清的制备第28页
     ·交叉血凝抑制试验第28页
     ·抗原差异性分析第28-29页
   ·结果第29页
     ·交叉 HA-HI 试验结果第29页
     ·r 值结果第29页
   ·讨论第29-33页
第四章 H6 亚型禽流感病毒对小鼠的致病性试验第33-37页
   ·材料第33页
     ·病毒第33页
     ·小鼠第33页
   ·方法第33页
     ·鸡胚半数感染量(EID50)的检测第33页
     ·小鼠致病性试验第33页
     ·小鼠脏器病毒滴定第33页
   ·结果第33-36页
     ·鸡胚半数感染量检测结果第33-34页
     ·H6 亚型禽流感病毒对 BALB/c 小鼠感染与致病性试验结果第34-36页
   ·讨论第36-37页
第五章 针对 H6 亚型禽流感病毒 HA 蛋白单克隆抗体的制备第37-46页
   ·材料和方法第37-38页
     ·实验材料第37-38页
   ·试验方法第38-41页
     ·免疫原的制备第38页
     ·动物免疫第38页
     ·饲养细胞的制备第38页
     ·小鼠骨髓瘤细胞的准备第38页
     ·细胞融合第38-39页
     ·针对 H6HA 蛋白阳性杂交瘤细胞的筛选第39页
     ·单克隆抗体的鉴定第39-40页
     ·单克隆抗体的大量制备第40页
     ·单克隆抗体效价的测定第40-41页
     ·单克隆抗体的抗原覆盖性实验第41页
   ·结果第41-45页
     ·杂交瘤细胞筛选结果第41页
     ·单克隆抗体对病毒血凝素蛋白的反应性第41-42页
     ·杂交瘤细胞染色体数目分析第42-43页
     ·单克隆抗体效价的测定第43页
     ·单克隆抗体亚类的鉴定第43-44页
     ·Western-blotting 方法检验对病毒蛋白的反应性第44页
     ·抗体覆盖率检测结果第44-45页
   ·讨论第45-46页
     ·免疫原和免疫程序第45页
     ·细胞培养和杂交瘤细胞的建立第45-46页
第六章 全文结论第46-47页
参考文献第47-52页
致谢第52-53页
作者简介第53页

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