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AngHV ORF51和ORF95基因的原核表达及多克隆抗体的制备

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
英文缩略表第11-12页
第一章 文献综述第12-30页
 引言第12-13页
   ·疱疹病毒第13-21页
     ·疱疹病毒的一般生物学特性第13-14页
     ·疱疹病毒的结构特点第14-15页
     ·疱疹病毒感染的特点第15页
     ·疱疹病毒的分类第15-18页
     ·与鱼类相关的疱疹病毒第18-19页
     ·鱼类疱疹病毒研究第19-21页
   ·鳗鲡疱疹病毒病的研究进展第21-30页
     ·鳗鲡生物学特征第21-22页
     ·鳗鲡的常见病害第22-23页
     ·鳗鲡疱疹病毒概述第23-24页
     ·鳗鲡疱疹病毒病流行病学特征第24-25页
     ·鳗鲡疱疹病毒病的诊断第25-26页
     ·鳗鲡疱疹病毒病的防治第26-27页
     ·鳗鲡疱疹病毒的基因组第27-28页
     ·鳗鲡疱疹病毒的结构蛋白第28-30页
第二章 AngHV-FJ ORF51、ORF95 基因的克隆及序列分析第30-52页
   ·实验材料第30-31页
     ·试验细胞、病毒、菌株第30页
     ·主要试剂第30-31页
     ·主要仪器与设备第31页
   ·试剂的配制第31-33页
   ·实验方法第33-40页
     ·细胞的复苏第33页
     ·EO 细胞的传代第33页
     ·AngHV-FJ 的细胞扩繁第33-34页
     ·病毒 DNA 的提取第34页
     ·引物的设计、合成第34页
     ·ORF51 和 ORF95 基因的 PCR 扩增第34-35页
     ·凝胶电泳第35页
     ·基因片段的回收纯化第35-36页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第36-37页
     ·目的基因与 pMD19-T vector 连接第37-38页
     ·转化第38页
     ·质粒 DNA 提取第38-39页
     ·酶切鉴定第39页
     ·序列分析第39-40页
   ·结果与分析第40-51页
     ·AngHV-FJ 的扩繁第40-41页
     ·引物设计、合成第41-42页
     ·目的基因的扩增第42页
     ·T 克隆的鉴定第42-43页
     ·ORF51 和 ORF95 基因序列分析第43-44页
     ·ORF51 和 ORF95 蛋白序列分析第44-51页
   ·小结第51-52页
第三章 AngHV-FJ ORF51、ORF95 在大肠杆菌中的表达第52-67页
   ·实验材料第52-53页
     ·试验菌株、质粒第52页
     ·主要试剂第52-53页
     ·主要仪器与设备第53页
   ·试剂的配制第53-56页
   ·实验方法第56-59页
     ·表达质粒的构建第56页
     ·蛋白的诱导表达第56-57页
     ·蛋白表达条件的优化第57-58页
     ·蛋白的 Western Blot 检测第58-59页
   ·结果与分析第59-65页
     ·表达质粒的构建第59页
     ·ORF51 蛋白的诱导表达第59-60页
     ·ORF95 蛋白的诱导表达第60-61页
     ·重组蛋白表达条件的优化第61-63页
     ·表达蛋白的 Western Blot 检测第63-65页
   ·讨论第65-67页
第四章 AngHV-FJ ORF51、ORF95 蛋白的纯化及多克隆抗体的制备第67-76页
   ·实验材料第67-68页
     ·实验动物第67页
     ·实验试剂第67-68页
     ·实验仪器第68页
   ·试剂的配制第68-69页
   ·实验方法第69-72页
     ·ORF51 蛋白的纯化第69页
     ·ORF95 蛋白的纯化第69-71页
     ·蛋白浓度的测定第71页
     ·多克隆兔抗血清的制备第71-72页
     ·间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清抗体的效价第72页
   ·结果与分析第72-75页
     ·ORF51 蛋白的纯化第72-73页
     ·ORF95 蛋白的纯化第73-74页
     ·ORF51 蛋白兔抗血清效价的测定第74-75页
     ·ORF95 蛋白兔抗血清效价的测定第75页
   ·讨论第75-76页
第五章 结论第76-77页
参考文献第77-83页
致谢第83-84页
攻读硕士学位期间发表的论文第84页

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