| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 缩略语 | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-21页 |
| 1 糖尿病的现状和 2 型糖尿病的发病机制 | 第13-16页 |
| ·糖尿病的现状 | 第13-14页 |
| ·2 型糖尿病的发病机制 | 第14-16页 |
| 2 2 型糖尿病模型动物研究进展 | 第16-17页 |
| 3 霍乱毒素 B 亚基研究进展 | 第17-19页 |
| 4 鲨肝活性肽研究进展 | 第19页 |
| 5 家蚕杆状病毒表达系统研究进展 | 第19-21页 |
| ·家蚕杆状病毒表达系统的发现 | 第19-20页 |
| ·家蚕杆状病毒表达系统的优势 | 第20-21页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第21-24页 |
| 1 实验目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 研究内容 | 第22-23页 |
| 3 实验流程图 | 第23-24页 |
| 第三章 CTB-APSL 基因的生物信息学分析 | 第24-29页 |
| 1 序列与工具 | 第24页 |
| ·序列 | 第24页 |
| ·工具和软件 | 第24页 |
| 2 方法 | 第24-25页 |
| ·CTB-APSL 基因的获得 | 第24页 |
| ·CTB-APSL 基因的序列分析 | 第24-25页 |
| 3 结果 | 第25-28页 |
| ·CTB-APSL 基因的序列 | 第25页 |
| ·疏水性分析 | 第25-26页 |
| ·跨膜区和信号肽分析 | 第26-28页 |
| ·二级结构的预测 | 第28页 |
| ·功能位点分析 | 第28页 |
| 4 讨论 | 第28-29页 |
| 第四章 CTB-APSL 融合蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第29-47页 |
| 1 材料与试剂 | 第29-33页 |
| ·质粒与菌株 | 第29页 |
| ·工具酶与试剂 | 第29页 |
| ·仪器 | 第29-30页 |
| ·主要试剂的配置 | 第30-33页 |
| 2 方法 | 第33-42页 |
| ·pET-28a(+)-CTB-APSL 重组质粒的构建 | 第33-41页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达与分析 | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-46页 |
| ·获得 CTB、APSL 和 CTB-APSL 片段 | 第42-44页 |
| ·重组质粒 pET-28a(+)-CTB-APSL 的鉴定 | 第44页 |
| ·序列测定 | 第44页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达与分析 | 第44-45页 |
| ·融合蛋白的 Western blotting 检测 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-47页 |
| 第五章 CTB-APSL 融合蛋白在家蚕杆状病毒表达系统中的表达 | 第47-66页 |
| 1 材料与试剂 | 第47-48页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·主要试剂的配制 | 第47-48页 |
| 2 方法 | 第48-56页 |
| ·pFastBac1-CTB-APSL 重组转移质粒的构建 | 第48-51页 |
| ·重组基因组 Bacmid-CTB-APSL 的构建 | 第51-53页 |
| ·重组病毒 BmNPV-CTB-APSL 的获得及鉴定 | 第53-54页 |
| ·CTB-APSL 融合蛋白的表达与收集 | 第54-55页 |
| ·ELISA 法测定融合蛋白表达量与 GM1 结合力 | 第55-56页 |
| ·融合蛋白的 Western blotting 检测 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-65页 |
| ·pFastBac1-CTB-APSL 重组转移质粒的鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组 Bacmid 的 PCR 鉴定 | 第57-58页 |
| ·重组 Bacmid 转染家蚕细胞 | 第58-59页 |
| ·重组病毒 BmNPV-CTB-APSL 的鉴定 | 第59-60页 |
| ·序列测定 | 第60页 |
| ·重组病毒的滴度测定 | 第60-61页 |
| ·CTB-APSL 融合蛋白在家蚕中的表达 | 第61-63页 |
| ·融合蛋白 GM1 受体结合能力分析 | 第63页 |
| ·融合蛋白的 Western blotting 检测 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65-66页 |
| 第六章 口服 CTB-APSL 融合蛋白对 2 型糖尿病模型小鼠的治疗 | 第66-84页 |
| 1 材料与试剂 | 第66-67页 |
| ·材料 | 第66页 |
| ·试剂 | 第66页 |
| ·主要试剂的配制 | 第66-67页 |
| 2 方法 | 第67-69页 |
| ·2 型糖尿病小鼠模型的建立 | 第67页 |
| ·实验动物分组给药和处理 | 第67-68页 |
| ·指标检测 | 第68-69页 |
| 3 结果 | 第69-81页 |
| ·2 型糖尿病模型小鼠状态 | 第69页 |
| ·不同给药处理小鼠体重的变化 | 第69-70页 |
| ·不同给药处理小鼠空腹血糖的变化 | 第70-72页 |
| ·不同给药处理对小鼠肾脏系数和脾脏系数的影响 | 第72-73页 |
| ·不同给药处理对小鼠空腹胰岛素的影响 | 第73-74页 |
| ·不同给药处理对小鼠脂代谢的影响 | 第74-76页 |
| ·不同给药处理对小鼠肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6 的影响 | 第76-77页 |
| ·不同给药处理对小鼠胰腺病理组织学的影响 | 第77-78页 |
| ·不同给药处理对小鼠肝脏病理组织学的影响 | 第78-79页 |
| ·不同给药处理对小鼠肾脏病理组织学的影响 | 第79-80页 |
| ·不同给药处理对小鼠脾脏病理组织学的影响 | 第80-81页 |
| 4 讨论 | 第81-84页 |
| 结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-91页 |
| 附录：研究生期间取得的科研成果 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
