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重组AAV介导多基因促进成熟性血管新生在小鼠后肢缺血微循环中的研究

中文摘要第1-8页
Abstract第8-20页
前言第20-22页
第1章 综述第22-42页
   ·血管重建与缺血性心脏病第22-27页
     ·动脉生成第22-24页
     ·血管新生第24-27页
   ·基因治疗与血管新生第27-42页
     ·基因治疗载体第28-30页
     ·血管新生因子第30-40页
     ·基因治疗现状第40-42页
第2章 材料与方法第42-54页
   ·实验材料第42-45页
     ·细胞第42页
     ·基因表达载体第42页
     ·动物第42-43页
     ·实验试剂第43-44页
     ·主要仪器及耗材第44-45页
   ·主要试剂的配制第45-47页
     ·细胞培养液第45-46页
     ·麻醉剂与拮抗剂第46页
     ·组织封闭液第46页
     ·X-gal稀释缓冲液第46页
     ·X-gal原溶液第46页
     ·X-gal工作液第46页
     ·FACS缓冲液第46-47页
   ·实验方法第47-53页
     ·细胞培养第47页
     ·细胞瞬时转染第47页
     ·体外2D成管实验第47-48页
     ·小鼠后肢缺血模型建立第48-49页
     ·非介入法测量血流灌注第49-50页
     ·免疫荧光染色第50-51页
     ·β-Galactosidase染色第51页
     ·实时定量PCR第51-53页
     ·荧光活化细胞分选技术(FACS)第53页
   ·统计学方法第53-54页
第3章 实验结果第54-84页
   ·Ang2对促血管新生因子诱导的ECs成管反应及PCs募集的影响第54-60页
     ·体外Ang2抑制Ang1而不是VEGF-A、APLN的促成管作用第54-56页
     ·Ang2抑制APLN、Ang1介导HEMCs对PCs的募集第56-58页
     ·Ang2显著抑制APLN、Ang1诱导bEnd3对PCs的募集第58-60页
   ·单因素VEGF-A或结合Ang2对小鼠缺血后肢再灌注的影响第60-67页
     ·Ang2降低小鼠后肢缺血早期(d7)VEGF-A诱导的血液复流第60-64页
     ·VEGF_A或其与Ang2结合均对缺血后肢的后期(d14)灌注无促进作用第64-67页
   ·Ang2对APLN促小鼠缺血后肢成熟血管新生的影响第67-74页
     ·持续或短暂表达Ang2对APLN诱导的早期(d7)血管新生的影第67-71页
     ·持续或短暂表达Ang2对APLN诱导的后期(d14)血管新生的影响第71-74页
   ·Ang1与Ang2对小鼠缺血后肢血管新生的影响第74-80页
     ·Ang1/Ang2短暂性表达促进早期(d7)成熟性血管新生第74-77页
     ·Ang1/Ang2短暂性表达促进后期(d14)成熟性血管新生第77-80页
   ·Ang1与APLN结合应用不能促进缺血后肢血液灌流的恢复第80-84页
第4章 讨论第84-91页
   ·体外Ang2抑制Ang1、APLN对PCs的募集作用第84-85页
   ·Ang2恶化VEGF-A对缺血后肢成熟性新生血管的负性作用第85-87页
   ·Ang2早期(d0-3)表达不能提高APLN促成熟性血管新生的作用第87-88页
   ·早期表达Ang2与Ang1结合显著地促进了缺血后肢再灌注第88-90页
   ·Ang1与APLN结合损伤了新生血管的生长第90-91页
第5章 结论第91-92页
创新点第92-93页
局限性第93-94页
参考文献第94-112页
作者简介及博士期间的学术成果第112-113页
致谢第113页

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