摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-11页 |
1 引言 | 第11-20页 |
·Toll样家族 | 第11-17页 |
·TLR信号转导 | 第11-12页 |
·TLR4 | 第12-13页 |
·TLR3 | 第13-15页 |
·TLR信号通路与疾病的关联 | 第15-17页 |
·Rab蛋白家族 | 第17-18页 |
·RNA干扰技术 | 第18-20页 |
·RNA干扰简介 | 第18页 |
·RNA干扰作用机制 | 第18-19页 |
·siRNA的合成和导入方法 | 第19页 |
·RNA干扰技术在生物医学领域的应用 | 第19-20页 |
·研究意义及目的 | 第20页 |
2 Rab7瞬时沉默表达模式及基因沉默对TLR4/TLR3通路的影响 | 第20-39页 |
·材料 | 第21-25页 |
·实验材料及试剂 | 第21页 |
·仪器 | 第21页 |
·试剂配制 | 第21-23页 |
·引物 | 第23-25页 |
·实验方法 | 第25-29页 |
·小鼠巨噬细胞株RAW264.7的培养 | 第25页 |
·细胞计数 | 第25页 |
·siRNA的转染 | 第25页 |
·细胞总RNA的提取及cDNA的制备 | 第25-27页 |
·BCA法测定蛋白浓度 | 第27页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第27页 |
·Western blotting检测 | 第27-28页 |
·MTT法检测 | 第28页 |
·RT-PCR和Real-time PCR检测 | 第28-29页 |
·NO、INOS含量测定 | 第29页 |
·结果分析 | 第29-39页 |
·基因沉默后Rab7的表达 | 第29-30页 |
·MTT法检测转染细胞的生长状况 | 第30-31页 |
·Rab7基因沉默对LPS刺激的巨噬细胞的影响 | 第31-37页 |
·RAW264.7细胞的培养和刺激 | 第31-32页 |
·Rab7基因沉默促进LPS刺激的巨噬细胞中TNF-α、IL-1βIL-6的表达 | 第32-33页 |
·Rab7基因沉默促进LPS刺激的巨噬细胞中IFN-β、IP-10的表达 | 第33-35页 |
·Rab7基因沉默促进LPS诱导的NO/iNOS的产生 | 第35-36页 |
·Rab7基因沉默对LPS诱导的TLR4表达的影响 | 第36-37页 |
·Rab7基因沉默对PolyI:C刺激的巨噬细胞的影响 | 第37-39页 |
·Rab7基因沉默促进PolyI:C刺激的巨噬细胞中IFN-β、IP-10的表达 | 第37-38页 |
·Rab7基因沉默促进PolyI:C刺激的巨噬细胞中 iNOS 的表达#8 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39-41页 |
4 结论 | 第41页 |
5 展望 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
作者简介 | 第49页 |