| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-11页 |
| 1 引言 | 第11-17页 |
| ·Rab家族背景介绍 | 第11-13页 |
| ·Rab的结构和定位 | 第11页 |
| ·Rab的功能 | 第11-12页 |
| ·Rab的循环 | 第12页 |
| ·Rab与疾病 | 第12-13页 |
| ·Rab5a、Rab7及Rab9简介 | 第13-14页 |
| ·Toll家族背景介绍 | 第14页 |
| ·TLR9的研究进展 | 第14-16页 |
| ·TLR9的结构和组织分布 | 第14-15页 |
| ·TLR9配体介绍 | 第15页 |
| ·TLR9介导的信号转导途径 | 第15-16页 |
| ·研究目的及意义 | 第16-17页 |
| 2 Rab5a及Rab9在小鼠各组织中的表达及其基因克隆 | 第17-32页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·细胞株、菌种及实验动物 | 第17页 |
| ·载体、酶及试剂 | 第17-18页 |
| ·试剂配制 | 第18页 |
| ·引物 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-27页 |
| ·小鼠巨噬细胞株RAW264.7的培养 | 第19页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第19-20页 |
| ·cDNA的制备 | 第20页 |
| ·Rab5a和Rab9全长序列的克隆、测序 | 第20-26页 |
| ·无内毒素质粒的大量提取 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-31页 |
| ·Rab5a和Rab9在小鼠各组织中的表达 | 第27-28页 |
| ·小鼠Rab5a和Rab9全长序列的克隆 | 第28-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| 3 Rab5a、Rab7和Rab9诱导表达模式的研究 | 第32-36页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·实验材料及试剂 | 第32页 |
| ·引物 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33页 |
| ·RAW264.7巨噬细胞的培养 | 第33页 |
| ·细胞计数 | 第33页 |
| ·CpG刺激后Rab5a、Rab7及Rab9 mRNA水平表达时效关系研究 | 第33页 |
| ·结果分析 | 第33-35页 |
| ·CpG刺激RAW264.7后RT-PCR检测Rab5a、Rab7、Rab9 mRNA表达水平 | 第33-34页 |
| ·RTQ-PCR检测Rab5a、Rab7及Rab9mRNA表达水平 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 4 Rab5a和Rab7调节巨噬细胞中Toll样受体信号转导通路的研究 | 第36-46页 |
| ·材料 | 第36-38页 |
| ·细胞株和主要试剂 | 第36-37页 |
| ·引物序列 | 第37页 |
| ·试剂配制 | 第37-38页 |
| ·实验步骤 | 第38-40页 |
| ·巨噬细胞株RAW264.7的培养 | 第38页 |
| ·细胞计数 | 第38页 |
| ·Rab5a突变载体的构建 | 第38-39页 |
| ·细胞转染 | 第39页 |
| ·蛋白提取 | 第39页 |
| ·BCA检测检测蛋白浓度 | 第39页 |
| ·SDS-PAGE | 第39-40页 |
| ·Western blotting | 第40页 |
| ·结果分析 | 第40-46页 |
| ·Rab5a和Rab7突变体稳定表达的细胞株的鉴定 | 第40-42页 |
| ·Rab5a促进CpG诱导的巨噬细胞中TNF-α、IL-1β的表达 | 第42-43页 |
| ·Rab5a促进CpG诱导的巨噬细胞中IFN-β的表达 | 第43-44页 |
| ·Rab7抑制CpG诱导的巨噬细胞中IL-6和IL-1β的表达 | 第44-45页 |
| ·Rab7抑制CpG诱导的巨噬细胞中IFN-β的表达 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 6 展望 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
