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壳聚糖—硬脂酸嫁接物/蛋白质/DNA三元复合物基因给药系统研究

致谢第1-5页
中文摘要第5-7页
Abstract第7-13页
引言第13-17页
1 壳聚糖-硬脂酸嫁接物的合成及其理化性质研究第17-27页
   ·试剂与仪器第17-18页
     ·试剂第17页
     ·仪器第17-18页
   ·实验方法第18-20页
     ·低分子量壳聚糖的制备及分子量测定第18页
     ·壳聚糖硬脂酸嫁接物(CS-SA)的合成第18页
     ·核磁共振分析第18-19页
     ·氨基取代度的测定第19页
     ·临界胶束浓度测定第19页
     ·胶束粒径与表面电位的测定第19-20页
     ·透射电子显微镜观察第20页
   ·结果与讨论第20-25页
     ·壳聚糖-硬脂酸嫁接物的合成第20-21页
     ·壳聚糖-硬脂酸嫁接物氨基取代度第21-22页
     ·壳聚糖-硬脂酸嫁接物的临界胶团浓度第22-23页
     ·壳聚糖-硬脂酸嫁接物的粒径与表面电位第23-25页
   ·小结第25-27页
2 壳聚糖-硬脂酸嫁接物/蛋白质/DNA三元复合物的制备及基因转染行为研究第27-49页
   ·试剂与仪器第27-28页
     ·试剂第27-28页
     ·仪器第28页
   ·实验方法第28-32页
     ·牛血清白蛋白(BSA)的甲酯化及等电点的测定第28页
     ·复合物的制备第28-29页
     ·复合物的粒径和表面电位测定第29页
     ·复合物的透射电子显微镜观察第29页
     ·复合物的凝胶阻滞分析第29-30页
     ·HEK293细胞的培养第30页
     ·复合物的细胞转染及荧光观察第30页
     ·复合物的细胞转染定量研究第30页
     ·嫁接物胶束的荧光标记第30页
     ·复合物的细胞摄取及胞内定位第30-31页
     ·复合给药系统的细胞毒性第31-32页
   ·结果与讨论第32-48页
     ·BSA的甲酯化及等电点(pI)的测定第32-34页
     ·嫁接物胶束/DNA元复合物的粒径与表面电位第34页
     ·嫁接物胶束/DNA元复合物的凝胶阻滞分析第34-35页
     ·嫁接物胶束/DNA元复合物的细胞转染第35-36页
     ·嫁接物胶束/BSA/DNA三元复合物的制备及粒径测定第36-37页
     ·嫁接物胶束/BSA/DNA三元复合物的凝胶阻滞分析第37-38页
     ·元复合物、三元复合物的透射电子显微镜观察第38-39页
     ·嫁接物胶束/DNA三元复合物细胞转染及荧光观察第39-40页
     ·嫁接物胶束/BSA/DNA三元复合物细胞转染定量考察第40-41页
     ·复合物的细胞摄取及细胞内定位第41-45页
     ·复合物长时间细胞转染及荧光观察第45-46页
     ·细胞毒性第46-48页
   ·小结第48-49页
3 壳聚糖-硬脂酸嫁接物/蛋白质/pshSUR三元复合物介导的survivin基因干扰研究第49-61页
   ·试剂与仪器第49-50页
     ·试剂第49页
     ·仪器第49-50页
   ·试验方法第50-53页
     ·胞培养第50页
     ·Survivin shRNA重组质粒的合成与抽提第50页
     ·实时荧光定量PCR(Real time-PCR)法的建立第50-52页
     ·Real time-PCR法选择最佳survivin shRNA重组质粒(pshSUR)第52页
     ·壳聚糖-硬脂酸嫁接物/蛋白质/pshSUR三元复合物给药系统的制备第52页
     ·壳聚糖-硬脂酸嫁接物/蛋白质/pshSUR三元复合物给药系统对MCF-7细胞的化疗增敏作用评价第52-53页
     ·壳聚糖-硬脂酸嫁接物/蛋白质/pshSUR三元复合物给药系统对MCF-7/Adr细胞逆转耐药作用评价第53页
   ·结果与讨论第53-59页
     ·Real time-PCR法的建立第53-55页
     ·最佳survivin shRNA重组质粒(pshSUR)的选择第55-56页
     ·壳聚糖-硬脂酸嫁接物/蛋白质/pshSUR三元复合物给药系统对MCF-7、MCF-7/Adr细胞逆转耐药作用评价第56-59页
   ·小结第59-61页
4 结论第61-63页
参考文献第63-69页
综述第69-85页
 参考文献第79-85页
作者简历第85页

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