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核酸末端保护新方法的研究及其在生物检测中的应用

摘要第1-8页
Abstract第8-16页
第1章 绪论第16-24页
   ·小分子和生物大分子相互作用的意义第16页
   ·小分子与蛋白质靶分子相互作用的研究方法第16-19页
     ·荧光偏振分析方法第17页
     ·荧光共振能量转移分析法第17-18页
     ·表面等离子共振第18-19页
     ·毛细管电泳第19页
     ·小分子微阵列技术第19页
     ·其他方法第19页
   ·功能化的核酸第19-22页
     ·标记检测第20-21页
     ·小分子修饰的DNA第21-22页
   ·本研究论文的工作内容第22-24页
第2章 末端保护分析方法用于小分子和蛋白质相互作用的电化学检测第24-42页
   ·前言第24-25页
   ·实验部分第25-28页
     ·仪器与试剂第25页
     ·用FA标记胺基修饰的寡核苷酸链第25-26页
     ·电泳试验第26-27页
     ·准备DNA修饰的SWNTs第27页
     ·电极表面的处理和组装第27页
     ·末端保护分析的电化学检测第27-28页
   ·结果与讨论第28-40页
     ·末端保护分析方法和基于此方法发展的电化学传感技术第28-29页
     ·毛细管电泳和凝胶电泳的分析第29-34页
     ·末端保护分析的电流响应第34-36页
     ·末端保护电化学分析的干扰实验第36-37页
     ·末端保护分析的光学表征第37-38页
     ·SEM对不同反应阶段的电极表面进行表征第38页
     ·传感器的交流阻抗行为第38-39页
     ·电化学保护分析的响应特征第39-40页
   ·小结第40-42页
第3章 基于末端保护分析发展的无标记的光化学方法用于小分子和蛋白质相互作用的研究第42-56页
   ·前言第42页
   ·实验部分第42-44页
     ·仪器与试剂第42-43页
     ·用FA标记胺基修饰的寡核苷酸链第43页
     ·末端保护分析的ABTS显色实验第43-44页
     ·末端保护分析的实时定量PCR实验第44页
   ·结果与讨论第44-55页
     ·基于hemin核酸识体检测FA-FR原理第44页
     ·紫外吸收光谱和光学照片第44-45页
     ·干扰实验第45-46页
     ·实时动力学曲线第46-47页
     ·工作曲线第47页
     ·基于纳米金变色检测FA-FR相互作用原理第47-48页
     ·粒径分析和透射电子显微镜表征第48-49页
     ·紫外吸收光谱和光学照片第49-50页
     ·基于RT-PCR探测小分子和蛋白质相互作用第50-51页
     ·ExoⅠ的用量对酶切效率的影响第51页
     ·降解时间对单链DNA寡核音酸降解效率的影响第51-52页
     ·RT-PCR定量特性第52-53页
     ·熔炼曲线第53-54页
     ·工作曲线第54-55页
   ·小结第55-56页
第4章 基于末端保护分析发展的高灵敏的蛋白质结合以及基因分型均相荧光传感器新方法的研究第56-78页
   ·前言第56-57页
   ·实验部分第57-59页
     ·试剂与仪器第57页
     ·电泳实验第57-59页
     ·等位特异性延伸反应第59页
     ·基因DNA的PCR扩增第59页
     ·末端保护分析的荧光实验第59页
   ·结果与讨论第59-77页
     ·核酸外切酶末端保护的推广第59-63页
     ·小分子-蛋白质相互作用的检测原理第63页
     ·毛细管电泳和凝胶电泳实验第63-65页
     ·Exo Ⅲ末端保护分析的荧光响应第65-66页
     ·荧光实时曲线考察Exo Ⅲ的末端保护分析第66页
     ·末端保护分析的工作曲线第66-68页
     ·Exo Ⅲ末端保护分析的特异性第68-69页
     ·基于Exo Ⅲ的保护发展的SNP基因分型方法第69-70页
     ·Exo Ⅲ末端保护用于基因分型的考察和分析第70-73页
     ·基于Exo Ⅲ末端保护分析用于SNP检测的荧光响应第73-74页
     ·基于末端保护的DNA基因分型的定量特性第74-75页
     ·基因组DNA的分析第75-77页
   ·小结第77-78页
第5章 共价捕获以及末端保护分析用于人甲基化转移酶和糖基化酶活性的检测第78-96页
   ·前言第78-80页
   ·实验部分第80-83页
     ·仪器与试剂第80页
     ·含氮杂DNA链的合成第80-81页
     ·金纳米颗粒的合成第81页
     ·DNA修饰的金纳米颗粒的制备第81页
     ·酶作用的底物的合成第81页
     ·酶活性分析第81-82页
     ·凝胶电泳分析第82页
     ·实验表征第82-83页
   ·结果与讨论第83-95页
     ·检测原理第83-84页
     ·Dnmt 1的凝胶电泳分析第84-85页
     ·Dnmt 1检测的紫外吸收光谱和光学照片图第85-87页
     ·表征实验第87-89页
     ·Dnmt 1活性检测的工作曲线第89-91页
     ·hOGG 1凝胶电泳图第91-92页
     ·hOGG 1的光学照片和紫外吸收响应光谱图第92-93页
     ·hOGG 1检测的工作曲线第93-95页
   ·小结第95-96页
结论第96-98页
参考文献第98-118页
附录第118-120页
致谢第120页

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