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玉米负重力性生长相关基因LAZY1的克隆及功能分析

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-23页
   ·植物体重力感受机制的研究进展第12-18页
     ·重力反应的过程第12-17页
       ·植物体对重力刺激的感知第12-15页
       ·信号转导与传递第15-17页
       ·植物体弯曲第17页
     ·LAZY1 基因的研究历史及现状第17-18页
   ·蛋白质互作研究技术介绍第18-23页
     ·酵母双杂交技术第18-20页
     ·免疫共沉淀技术第20-21页
     ·GST-Pulldown 技术第21-22页
     ·双分子荧光互补技术第22页
     ·荧光共振能量转移(FRET)技术第22-23页
2 材料与方法第23-37页
   ·材料第23-25页
     ·植物材料第23页
     ·菌株与载体第23-24页
     ·酶第24页
     ·主要引物第24-25页
     ·生化试剂第25页
   ·方法第25-37页
     ·LAZY1 基因序列的同源分析第25页
     ·基因组 DNA 的提取第25-26页
     ·总 RNA 的提取第26-27页
     ·质粒的提取第27-28页
       ·大肠杆菌质粒提取第27-28页
       ·酵母质粒的提取第28页
     ·载体的构建第28-29页
       ·亚细胞定位载体的构建第28-29页
       ·酵母双杂交诱饵载体的构建第29页
     ·PCR第29-31页
       ·常规 PCR第29页
       ·菌落 PCR第29-30页
       ·Site-Finding PCR第30-31页
     ·基因枪转化洋葱表皮瞬时表达第31-33页
       ·实验材料准备第31-32页
       ·DNA 包裹钨粉微粒第32页
       ·基因枪轰击操作第32-33页
     ·琼脂糖凝胶电泳与显色第33页
       ·琼脂糖凝胶的制备第33页
       ·电泳及显色第33页
     ·酵母双杂交文库的构建及评价第33-35页
       ·玉米材料处理与总 RNA 的提取第33-34页
       ·双链 cDNA 的合成与短片段的去除第34页
       ·酵母双杂交“Mate & Plat”文库的构建第34-35页
       ·文库的库容量及质量评价第35页
     ·酵母双杂交文库的筛选与分析第35-36页
       ·诱饵酵母与文库酵母的配合第35-36页
       ·阳性克隆验证与分析第36页
     ·部分试剂的配制第36-37页
3 结果与分析第37-46页
   ·玉米 LAZY1 基因的克隆与鉴定第37-40页
     ·玉米 B73 中 LAZY1 基因序列的同源分析第37-39页
     ·突变体中 LAZY1 基因序列的克隆与验证第39-40页
   ·生物信息学预测第40页
   ·LAZY1 的亚细胞定位结果第40-41页
   ·玉米胚芽鞘负向地生长时期的酵母双杂交文库的构建及评价第41-43页
     ·玉米胚芽鞘重力反应过程及 RNA 的提取第41-42页
     ·双链 cDNA 的合成与小片段 cDNA 的去除第42-43页
     ·酵母双杂交“Mate & Plat”文库的构建及质量评价第43页
   ·LAZY1 的酵母双杂交筛选结果第43-45页
   ·阳性克隆的分析第45-46页
4 讨论第46-49页
   ·LAZY1 基因的克隆与分析第46页
   ·玉米胚芽鞘负地性生长时期的酵母双杂交文库的构建及评价第46-48页
   ·酵母双杂交文库的筛选第48页
   ·进一步的研究计划第48-49页
5 结论第49-50页
参考文献第50-53页
7 附录第53-60页
   ·B73 与突变体 lazy1-1 中 LAZY1 基因的序列第53-57页
   ·突变体 lazy1-2 中 LAZY1 基因的序列第57-60页
8 致谢第60-61页
9 攻读硕士学位期间发表的论文第61页

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