中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-23页 |
·植物体重力感受机制的研究进展 | 第12-18页 |
·重力反应的过程 | 第12-17页 |
·植物体对重力刺激的感知 | 第12-15页 |
·信号转导与传递 | 第15-17页 |
·植物体弯曲 | 第17页 |
·LAZY1 基因的研究历史及现状 | 第17-18页 |
·蛋白质互作研究技术介绍 | 第18-23页 |
·酵母双杂交技术 | 第18-20页 |
·免疫共沉淀技术 | 第20-21页 |
·GST-Pulldown 技术 | 第21-22页 |
·双分子荧光互补技术 | 第22页 |
·荧光共振能量转移(FRET)技术 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-37页 |
·材料 | 第23-25页 |
·植物材料 | 第23页 |
·菌株与载体 | 第23-24页 |
·酶 | 第24页 |
·主要引物 | 第24-25页 |
·生化试剂 | 第25页 |
·方法 | 第25-37页 |
·LAZY1 基因序列的同源分析 | 第25页 |
·基因组 DNA 的提取 | 第25-26页 |
·总 RNA 的提取 | 第26-27页 |
·质粒的提取 | 第27-28页 |
·大肠杆菌质粒提取 | 第27-28页 |
·酵母质粒的提取 | 第28页 |
·载体的构建 | 第28-29页 |
·亚细胞定位载体的构建 | 第28-29页 |
·酵母双杂交诱饵载体的构建 | 第29页 |
·PCR | 第29-31页 |
·常规 PCR | 第29页 |
·菌落 PCR | 第29-30页 |
·Site-Finding PCR | 第30-31页 |
·基因枪转化洋葱表皮瞬时表达 | 第31-33页 |
·实验材料准备 | 第31-32页 |
·DNA 包裹钨粉微粒 | 第32页 |
·基因枪轰击操作 | 第32-33页 |
·琼脂糖凝胶电泳与显色 | 第33页 |
·琼脂糖凝胶的制备 | 第33页 |
·电泳及显色 | 第33页 |
·酵母双杂交文库的构建及评价 | 第33-35页 |
·玉米材料处理与总 RNA 的提取 | 第33-34页 |
·双链 cDNA 的合成与短片段的去除 | 第34页 |
·酵母双杂交“Mate & Plat”文库的构建 | 第34-35页 |
·文库的库容量及质量评价 | 第35页 |
·酵母双杂交文库的筛选与分析 | 第35-36页 |
·诱饵酵母与文库酵母的配合 | 第35-36页 |
·阳性克隆验证与分析 | 第36页 |
·部分试剂的配制 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-46页 |
·玉米 LAZY1 基因的克隆与鉴定 | 第37-40页 |
·玉米 B73 中 LAZY1 基因序列的同源分析 | 第37-39页 |
·突变体中 LAZY1 基因序列的克隆与验证 | 第39-40页 |
·生物信息学预测 | 第40页 |
·LAZY1 的亚细胞定位结果 | 第40-41页 |
·玉米胚芽鞘负向地生长时期的酵母双杂交文库的构建及评价 | 第41-43页 |
·玉米胚芽鞘重力反应过程及 RNA 的提取 | 第41-42页 |
·双链 cDNA 的合成与小片段 cDNA 的去除 | 第42-43页 |
·酵母双杂交“Mate & Plat”文库的构建及质量评价 | 第43页 |
·LAZY1 的酵母双杂交筛选结果 | 第43-45页 |
·阳性克隆的分析 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
·LAZY1 基因的克隆与分析 | 第46页 |
·玉米胚芽鞘负地性生长时期的酵母双杂交文库的构建及评价 | 第46-48页 |
·酵母双杂交文库的筛选 | 第48页 |
·进一步的研究计划 | 第48-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-53页 |
7 附录 | 第53-60页 |
·B73 与突变体 lazy1-1 中 LAZY1 基因的序列 | 第53-57页 |
·突变体 lazy1-2 中 LAZY1 基因的序列 | 第57-60页 |
8 致谢 | 第60-61页 |
9 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第61页 |