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展青霉素特异性抗体的制备及其免疫学检测方法的研究

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 引言第13-26页
   ·展青霉素的研究现状第13-24页
     ·展青霉素的发现第13-14页
     ·展青霉素的毒性研究第14-16页
     ·展青霉素的产生与降解第16-19页
     ·展青霉素在食品中的污染情况第19-20页
     ·展青霉素的检测方法第20-24页
       ·薄层色谱法第20页
       ·高效液相色谱法第20-21页
       ·气相液谱法第21页
       ·色谱联用技术第21-22页
       ·免疫学检测法第22-24页
   ·研究目的及意义第24-25页
   ·研究内容第25-26页
2 材料与方法第26-42页
   ·实验材料第26-28页
     ·各种生化试剂第26页
     ·菌株第26页
     ·培养基和缓冲溶液第26-27页
     ·实验动物第27页
     ·主要仪器与设备第27-28页
   ·实验方法第28-42页
     ·人工检测原 P1-OVA 的合成与鉴定第28-30页
       ·展青霉素的提取及检测第28-29页
       ·展青霉素的修饰第29-30页
       ·包被原 P1-OVA 的制备第30页
       ·酶标抗原 P1-HRP 的制备第30页
       ·人工抗原 P1-OVA 和 P1-HRP 的鉴定第30页
     ·人工半抗原 P2 的合成与鉴定第30-33页
       ·半抗原合成方法第30-33页
       ·展青霉素半抗原的鉴定第33页
     ·人工抗原 P2-BSA 及 P2-OVA 的合成与鉴定第33页
       ·人工抗原的合成第33页
       ·人工抗原的鉴定第33页
     ·兔多克隆抗体的制备第33-35页
       ·白兔免疫过程第33-34页
       ·兔血清效价检测第34页
       ·兔多克隆抗体的纯化第34-35页
     ·鼠多克隆抗体的制备第35页
       ·BALB/C 小鼠免疫过程第35页
       ·小鼠血清效价检测第35页
       ·小鼠多克隆抗体的纯化第35页
     ·单克隆抗体的制备第35-36页
       ·BALB/C 小鼠的免疫第35页
       ·杂交瘤细胞系的制备与筛选第35-36页
       ·杂交瘤细胞的单克隆化第36页
       ·单克隆抗体的大量制备第36页
     ·直接 ELISA 方法的研究第36-37页
     ·双抗体夹心 ELISA 方法的研究第37页
     ·间接竞争 ELISA 方法的研究第37-39页
       ·间接竞争 ELISA 方法的建立第37-38页
       ·pH 值对 ELISA 的影响第38页
       ·展青霉素在 ELISA 反应过程中的稳定性第38页
       ·不同底物的选择第38页
       ·抗原抗体最佳稀释浓度的确定第38-39页
       ·不同底物反应时间的确定第39页
     ·胶体金免疫层析检测技术的研究第39-42页
       ·胶体金的制备第39页
       ·胶体金标记最佳 pH 值的确定第39-40页
       ·胶体金标记最佳抗体用量的确定第40页
       ·金标抗体的制备第40-41页
       ·免疫层析试纸条的制备第41-42页
3 结果与分析第42-63页
   ·人工包被原 P1-OVA 的合成与鉴定第42-44页
     ·提取的展青霉素 HPLC 分析第42-43页
     ·展青霉素的修饰结果第43页
     ·包被原 P1-OVA 的制备与鉴定第43-44页
   ·人工半抗原 P2 的合成与鉴定第44-48页
   ·人工半抗原 P2-BSA 及 P2-OVA 的合成与鉴定第48页
   ·兔多克隆抗体的制备第48-50页
     ·兔血清效价检测结果第48-49页
     ·兔多克隆抗体的纯化结果第49-50页
     ·纯化后的多克隆抗体效价亲和性检测第50页
   ·鼠多克隆抗体的制备第50-51页
     ·小鼠血清效价检测结果第50-51页
     ·小鼠多克隆抗体纯化结果第51页
   ·单克隆抗体的制备第51-53页
     ·小鼠血清效价检测结果第51-52页
     ·细胞的融合及筛选第52页
     ·单克隆抗体的制备第52-53页
   ·直接 ELISA 检测方法的结果第53-54页
   ·双抗体夹心 ELISA 检测方法的结果第54页
   ·间接竞争 ELISA 检测方法的研究第54-59页
     ·pH 值对 ELISA 的影响第54-55页
     ·展青霉素在 ELISA 反应过程中的稳定性第55-56页
     ·不同底物的选择第56页
     ·抗原抗体最佳稀释浓度的确定第56-57页
     ·不同底物反应时间的确定第57-58页
     ·间接竞争 ELISA 方法检测展青霉素第58-59页
   ·胶体金免疫层析检测技术研究第59-63页
     ·胶体金制备的结果第59-60页
     ·胶体金标记的最佳 pH 测定结果第60页
     ·胶体金标记的最佳抗体浓度测定结果第60-61页
     ·胶体金免疫层析试纸条制备结果第61-63页
       ·金标抗体稀释度的确定第61页
       ·T 线和 C 线的优化结果第61-62页
       ·胶体金免疫层析试纸条对展青霉素的检测第62-63页
4 讨论第63-69页
   ·展青霉素半抗原的合成第63-64页
   ·载体蛋白及偶联方法的选择第64-66页
   ·检测抗原的制备第66页
   ·展青霉素抗体的制备第66-67页
   ·展青霉素免疫学检测方法的建立第67-69页
5 结论第69-70页
参考文献第70-77页
致谢第77页

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