中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-24页 |
·遗传学新领域——行为遗传学 | 第13-15页 |
·果蝇行为遗传学简介 | 第15-20页 |
·果蝇的基本特征 | 第15-16页 |
·果蝇作为模式生物的应用 | 第16页 |
·果蝇的行为 | 第16-17页 |
·GAL4/UAS 系统简介 | 第17-19页 |
·LIMK1 研究现状 | 第19页 |
·LIMK1 的生物学功能 | 第19-20页 |
·果蝇的背地性行为 | 第20-23页 |
·果蝇背地性行为的遗传学调控 | 第20-21页 |
·调控果蝇背地性行为的器官 | 第21-23页 |
·本研究的目的意义 | 第23-24页 |
2 实验材料与方法 | 第24-50页 |
·果蝇品系与培养方法 | 第24-25页 |
·果蝇(Drosophila melanogaster) | 第24-25页 |
·试剂及培养基 | 第25-31页 |
·核酸电泳缓冲液 | 第25页 |
·碱法质粒抽提液的配制 | 第25页 |
·LB 培养基 | 第25-26页 |
·果蝇基本培养基 | 第26页 |
·原位杂交试剂和溶液 | 第26-31页 |
·果蝇基因组 DNA 的提取试剂配制 | 第31页 |
·主要仪器设备 | 第31-32页 |
·实验方法 | 第32-50页 |
·背地性行为学实验设计 | 第32-34页 |
·背地性行为模型—果蝇爬管 | 第32页 |
·果蝇爬管行为学实验方法 | 第32-33页 |
·背地性行为模型—果蝇垂直迷宫 | 第33页 |
·果蝇垂直迷宫行为学实验方法 | 第33-34页 |
·果蝇背地性行为预实验 | 第34页 |
·果蝇杂交 | 第34页 |
·原位杂交 | 第34-44页 |
·果蝇 RNA 提取、纯化及保护 | 第34-35页 |
·反转录(Reverse transcript)cDNA 第一链合成 | 第35页 |
·原位杂交探针引物设计 | 第35页 |
·正义探针、反义探针合成 | 第35-36页 |
·质粒 DNA 的转化 | 第36页 |
·菌落 PCR 法鉴定 | 第36-37页 |
·DNA 序列测定及分析 | 第37页 |
·原位杂交探针制备 | 第37-42页 |
·果蝇头部固定与包埋 | 第42-44页 |
·LIMK1-GAL4 转基因的构建 | 第44-48页 |
·果蝇基因组 DNA 的提取 | 第44页 |
·PCR 扩增 | 第44-45页 |
·目的片段回收 | 第45-46页 |
·转化和筛选 | 第46页 |
·DNA 序列测定及分析 | 第46页 |
·质粒 DNA 的提取(小量碱法) | 第46-47页 |
·质粒酶切 | 第47页 |
·连接转化 | 第47页 |
·重组质粒 LIMK1 -GAL4 转基因 | 第47-48页 |
·LIMK1 反转录 PCR 和实时荧光定量 PCR | 第48-50页 |
·引物设计 | 第48页 |
·果蝇 RNA 提取、纯化及保护 | 第48页 |
·反转录 PCR | 第48页 |
·实时荧光定量 PCR | 第48-50页 |
3 结果与分析 | 第50-69页 |
·果蝇背地性行为预实验 | 第50页 |
·果蝇背地性行为相关基因的遗传筛选 | 第50-55页 |
·Mef2-GAL4 启动子筛选 | 第50-53页 |
·Appl-GAL4 启动子筛选 | 第53页 |
·F-GAL4 启动子筛选 | 第53-55页 |
·LIMK1 原位杂交及结果 | 第55-56页 |
·功能质粒的构建 | 第55-56页 |
·果蝇 RNA 的提取 | 第55页 |
·LIMK1 原位杂交转录模板的 PCR 合成 | 第55-56页 |
·LIMK1-GAL4 转基因及结果 | 第56-59页 |
·LIMK1-GAL4 转基因载体的构建 | 第56-57页 |
·LIMK1-GAL4 转基因果蝇系的建立 | 第57-58页 |
·LIMK1 的表达定位 | 第58-59页 |
·LIMK1 表达量下调对果蝇背地性行为的影响 | 第59-61页 |
·LIMK1 激酶活性缺失对果蝇背地性行为的影响 | 第61-62页 |
·limk1 突变体果蝇的背地性行为 | 第62-64页 |
·LIMK1 调控的背地性行为与发育的关系 | 第64-66页 |
·LIMK1 表达量下调对果蝇听觉的影响 | 第66-67页 |
·LIMK1 与 TRP family 的相互作用关系 | 第67-69页 |
4 讨论 | 第69-73页 |
·LIMK1 调控果蝇背地性行为与发育的关系 | 第69-70页 |
·LIMK1 过表达对果蝇背地性行为的影响 | 第70页 |
·limk1 突变体的背地性行为 | 第70页 |
·LIMK1 表达量下调对果蝇听觉的影响 | 第70-71页 |
·LIMK1 与 TRP family 相互作用关系 | 第71-72页 |
·LIMK1 互作蛋白研究 | 第72-73页 |
5 结论 | 第73-75页 |
·果蝇背地性行为相关基因的遗传筛选 | 第73页 |
·LIMK1 的表达定位 | 第73页 |
·LIMK1 表达量下调对果蝇背地性行为的影响 | 第73页 |
·LIMK1 激酶活性缺失对果蝇背地性行为的影响 | 第73页 |
·LIMK1 过表达对果蝇背地性行为的影响 | 第73页 |
·limk1 突变体的背地性行为 | 第73页 |
·LIMK1 调控的背地性行为与发育的关系 | 第73-74页 |
·LIMK1 表达量下调对果蝇听觉的影响 | 第74页 |
·LIMK1 与 TRP family 的相互作用关系 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
硕士研究生期间发表的论文 | 第81页 |