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原生质体融合构建纤维素发酵产油脂菌株的研究

中文摘要第1-12页
Abstract第12-14页
1 引言第14-29页
   ·微生物油脂的研究进展第14-18页
     ·产油脂微生物的种类第15-16页
     ·微生物油脂的组成及生理功能第16-17页
     ·微生物油脂的生产原料第17-18页
   ·微生物降解纤维素的研究进展第18-19页
     ·自然界纤维素的应用第18页
     ·纤维素降解微生物的种类第18-19页
   ·原生质体融合技术研究进展第19-27页
     ·原生质体融合的过程第20-27页
       ·直接亲本及其遗传标记选择第20-21页
       ·原生质体的制备与再生技术第21-24页
       ·亲本原生质体诱导融合第24-26页
       ·遗传标记的选择与融合子的检出第26-27页
       ·融合子的鉴定第27页
   ·研究的目的和意义第27-29页
2 材料与方法第29-35页
   ·材料第29-30页
     ·菌种第29页
     ·培养基第29页
     ·主要试剂第29页
     ·RAPD-PCR 所用引物第29-30页
     ·主要仪器第30页
   ·方法第30-35页
     ·亲本菌丝培养方法第30页
     ·亲本原生质体的制备与计数第30-31页
     ·亲本原生质体的再生第31页
     ·亲本原生质体制备酶液的优化第31页
       ·单一酶对亲本菌株原生质体产量的影响第31页
       ·混合酶液组合对亲本菌株原生质体产量的影响第31页
     ·亲本菌株原生质体制备条件的优化第31-33页
       ·单因素试验第31-32页
       ·MOD-1 原生质体制备条件的 Plackett-Burman(PB)试验设计第32页
       ·MOD-1 原生质体制备条件的最陡爬坡试验第32页
       ·MOD-1 原生质体制备条件的中心组合试验第32-33页
     ·亲本原生质体的灭活第33页
     ·亲本原生质体的融合第33页
     ·融合菌株的获得第33-34页
       ·融合菌株的初筛第33页
       ·融合菌株的复筛第33-34页
       ·融合菌株的稳定性检验第34页
     ·融合菌株的鉴定第34-35页
3 结果与分析第35-63页
   ·MOD-1 原生质体制备与再生条件优化第35-43页
     ·MOD-1 原生质体制备的酶液优化第35-37页
       ·单一酶最佳浓度第35页
       ·混合酶液最佳组合第35-37页
     ·MOD-1 原生质体制备及再生条件各单因素的优化第37-39页
       ·菌龄第37页
       ·酶解时间第37-38页
       ·酶解温度第38页
       ·稳渗剂种类第38-39页
     ·MOD-1 原生质体制备及再生条件的响应面法优化第39-43页
       ·PB 试验设计及其结果第40-41页
       ·最陡爬坡试验结果第41页
       ·中心组合试验设计及其结果第41-43页
       ·响应面分析模型的验证试验第43页
   ·TP4 原生质体制备与再生条件优化第43-47页
     ·TP4 原生质体制备的酶液优化第43-45页
       ·单一酶最佳浓度第43-44页
       ·混合酶液最佳组合酶第44-45页
     ·TP4 原生质体制备及再生条件各单因素的优化第45-47页
       ·菌龄第45页
       ·酶解时间第45-46页
       ·酶解温度第46-47页
       ·稳渗剂种类第47页
   ·T44 原生质体制备与再生条件优化第47-51页
     ·T44 原生质体制备的酶液优化第47-49页
       ·单一酶最佳浓度第47-49页
       ·混合酶液最佳组合第49页
     ·T44 原生质体制备及再生条件的各单因素的优化第49-51页
       ·菌龄第49页
       ·酶解时间第49-50页
       ·酶解温度第50页
       ·稳渗剂种类第50-51页
   ·TL 原生质体制备与再生的条件优化第51-55页
     ·TL 原生质体制备的酶液优化第51-53页
       ·单一酶最佳浓度第51-52页
       ·混合酶液最佳组合第52-53页
     ·TL 原生质体制备及再生条件的各单因素优化第53-55页
       ·菌龄第53页
       ·酶解时间第53-54页
       ·酶解温度第54页
       ·稳渗剂种类第54-55页
   ·亲本原生质体的灭活条件优化第55-58页
     ·亲本原生质体紫外灭活条件的优化第55-57页
       ·MOD-1 原生质体的紫外灭活条件第55-56页
       ·TP4 原生质体的紫外灭活条件第56页
       ·T44 原生质体的紫外灭活条件第56页
       ·TL 原生质体的紫外灭活条件第56-57页
     ·亲本原生质体热灭活条件的优化第57-58页
       ·MOD-1 原生质体的热灭活条件第57页
       ·TP4 原生质体的热灭活条件第57页
       ·T44 原生质体的热灭活条件第57-58页
       ·TL 原生质体的热灭活条件第58页
   ·融合菌株的获得第58-63页
     ·融合子的初筛第58-60页
     ·融合子的复筛第60页
     ·融合菌株 MP-1 的产油脂稳定性分析第60-61页
     ·融合菌株 MP-1 的 RAPD 分析第61-63页
       ·RAPD 扩增结果第61页
       ·遗传相似系数及遗传距离分析第61-63页
4 讨论第63-65页
   ·关于细胞壁溶解酶的选择第63页
   ·关于亲本的选择及原生质体的灭活第63-64页
   ·融合菌株的生物学性状分析第64-65页
5 结论第65-66页
参考文献第66-73页
附图第73-75页
致谢第75-76页
硕士研究生期间发表的论文第76页

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