| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-17页 |
| ·岩原鲤的研究概况 | 第11-13页 |
| ·生物学特征 | 第11-13页 |
| ·人工养殖 | 第13页 |
| ·胰岛素样生长因子-I(IGF-I)家族成员及其生物学功能 | 第13-17页 |
| ·胰岛素样生长因子家族成员 | 第13-14页 |
| ·IGF-I的生物学特征 | 第14页 |
| ·IGF-I的分子结构 | 第14页 |
| ·IGF-I的作用机制 | 第14-15页 |
| ·IGF-I的生物学功能 | 第15-16页 |
| ·类胰岛素因子的研究现状 | 第16-17页 |
| 第2章 绪论 | 第17-21页 |
| ·研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| ·研究的范围与内容 | 第18-21页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| ·主要研究方法(或技术路线,实施方案): | 第19-21页 |
| 第3章 岩原鲤IGF-I CDNA克隆与序列分析 | 第21-35页 |
| ·实验动物、载体和菌种 | 第21页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·菌种及质粒 | 第21页 |
| ·试剂和试剂盒 | 第21-22页 |
| ·主要分子生物学试剂 | 第21页 |
| ·试剂的配制 | 第21-22页 |
| ·试剂盒 | 第22页 |
| ·仪器与设备 | 第22-23页 |
| ·引物设计 | 第23页 |
| ·总RNA的制备及RNA完整性检测 | 第23-24页 |
| ·总RNA制备 | 第23-24页 |
| ·RNA的检测 | 第24页 |
| ·3'RACE原理和程序 | 第24-27页 |
| ·3'RACE原理 | 第24-25页 |
| ·IGF-IcDNA 3'末端扩增的操作程序 | 第25-26页 |
| ·岩原鲤IGF-I cDNA中间片段扩增 | 第26-27页 |
| ·5'RACE原理和程序 | 第27-31页 |
| ·5'RACE原理 | 第27-28页 |
| ·步骤 | 第28-31页 |
| ·目的片段的克隆与测序 | 第31-33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| ·目的片段的回收 | 第31页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第31-32页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体的连接 | 第32页 |
| ·质粒DNA转化大肠杆菌 | 第32页 |
| ·转化子的蓝白斑菌落筛选 | 第32页 |
| ·转化子的菌液PCR扩增鉴定 | 第32-33页 |
| ·测序与生物信息学分析 | 第33-35页 |
| ·测序 | 第33页 |
| ·分析工具 | 第33-35页 |
| 第4章 17B-雌二醇对肝胰脏组织IGF-I表达的影响 | 第35-39页 |
| ·试验材料 | 第35页 |
| ·试验方法 | 第35-37页 |
| ·试验分组 | 第35-36页 |
| ·岩原鲤编码区部分片断的PCR扩增 | 第36页 |
| ·岩原鲤β肌动蛋白部分片断PCR扩增 | 第36-37页 |
| ·PCR产物相对体积测定 | 第37页 |
| ·数据分析 | 第37-39页 |
| 第5章 结果与分析 | 第39-51页 |
| ·设计基因特异性PCR引物 | 第39页 |
| ·岩原鲤肝胰脏总RNA的提取 | 第39页 |
| ·岩原鲤肝胰脏总cDNA的获得 | 第39-40页 |
| ·岩原鲤胰岛素样生长因子-I(IGF-I)的克隆 | 第40-41页 |
| ·IGF-IcDNA 3'末端的扩增与克隆 | 第40页 |
| ·IGF-IcDNA 5'末端的扩增与克隆 | 第40-41页 |
| ·IGF-I中间片段的克隆 | 第41页 |
| ·岩原鲤IGF-I的序列分析 | 第41-43页 |
| ·岩原鲤IGF-I推导蛋白的一级结构分析 | 第43-47页 |
| ·IGF-I推导蛋白的基本参数 | 第43页 |
| ·IGF-I推导氨基酸组份分析 | 第43-44页 |
| ·IGF-I基因推导的氨基酸序列同源性分析 | 第44-46页 |
| ·IGF-I基因推导的氨基酸的系统发育树分析 | 第46-47页 |
| ·岩原鲤蛋白的二级结构预测及结构域分析 | 第47-49页 |
| ·岩原鲤蛋白的二级结构预测及分析 | 第47-48页 |
| ·岩原鲤蛋白的疏水性预测及分析 | 第48-49页 |
| ·IGF-I蛋白多肽链中抗原肽的分析 | 第49页 |
| ·岩原鲤IGF-I蛋白的三级结构预测及分析 | 第49-50页 |
| ·17B-雌二醇对肝胰脏组织IGF-I表达的影响 | 第50-51页 |
| 第6章 讨论 | 第51-55页 |
| ·岩原鲤总RNA的提取 | 第51页 |
| ·引物设计 | 第51-52页 |
| ·3'RACE引物的设计 | 第51-52页 |
| ·5'RACE引物的设计 | 第52页 |
| ·PCR反应条件优化 | 第52-53页 |
| ·岩原鲤IGF-I蛋白的同源性分析 | 第53页 |
| ·17B-雌二醇对肝胰脏组织IGF-I表达的影响 | 第53-55页 |
| 第7章 结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 缩写词 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 硕士学位期间发表的论文及参与的课题 | 第65页 |