摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 前言 | 第9-27页 |
·植物对非生物逆境的反应 | 第9-10页 |
·活性氧(Reactive Oxygen Species, ROS) | 第10-16页 |
·活性氧的产生部位 | 第11页 |
·活性氧在植物体内的作用 | 第11-15页 |
·植物体内活性氧清除系统 | 第15-16页 |
·脱落酸(Abscisic acid,ABA) | 第16-23页 |
·ABA 的功能 | 第16-17页 |
·ABA 的生物合成调控 | 第17-18页 |
·ABA 应答基因 | 第18-19页 |
·依赖于ABA 途径中的顺式作用元件与反式作用因子 | 第19-20页 |
·ABA 与逆境信号传导 | 第20-23页 |
·利用转基因策略改变植物的抗逆性 | 第23-24页 |
·研究背景及意义 | 第24-26页 |
·实验设计 | 第26-27页 |
2 材料与方法 | 第27-44页 |
·材料 | 第27-28页 |
·植物材料 | 第27页 |
·菌种 | 第27页 |
·载体 | 第27页 |
·工具酶和修饰酶 | 第27页 |
·化学试剂 | 第27页 |
·试剂盒 | 第27-28页 |
·分子量标准 | 第28页 |
·引物 | 第28页 |
·测序 | 第28页 |
·基因芯片分析 | 第28页 |
·方法 | 第28-44页 |
·质粒DNA 的小量制备(碱裂解法) | 第28-29页 |
·从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段 | 第29页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化(电击法) | 第29-30页 |
·植物稳定表达载体p81121ABP9 和pCHF3ABP9DN 的建构 | 第30-31页 |
·农杆菌GV3101 电击感受态细胞的制备和农杆菌转化及检测 | 第31-33页 |
·拟南芥转化及纯系筛选 | 第33-35页 |
·拟南芥植物材料的种植与处理 | 第35-36页 |
·植物材料总RNA 的提取 | 第36-37页 |
·基因芯片分析 | 第37页 |
·RT—PCR | 第37-38页 |
·转基因拟南芥生理指标测定 | 第38-41页 |
·活性氧(ROS)含量的测定方法 | 第41-44页 |
3 结果与分析 | 第44-64页 |
·植物转化表达载体的建构 | 第44-45页 |
·农杆菌转化 | 第45-46页 |
·拟南芥转化 | 第46-47页 |
·植物体内总RNA 的分离 | 第47-48页 |
·ABP9 转基因拟南芥纯系植株基因芯片分析 | 第48-55页 |
·与激素(脱落酸、赤霉素、乙烯、生长素等)相关的基因 | 第48-50页 |
·与清除活性氧相关的基因 | 第50-51页 |
·与 MYB、WRKY 和zinc finger 蛋白等转录因子相关的基因 | 第51-55页 |
·ABP9 转基因拟南芥纯系植株RT-PCR 分析 | 第55-57页 |
·拟南芥 Acti112 基因对反转录产物(模板)进行均一化 | 第55-56页 |
·ABP9 对ABA 相关基因的调控 | 第56-57页 |
·ABP9 对拟南芥ABA 应答的调控 | 第57-60页 |
·ABA 处理对转基因植株与野生型萌发率、根伸长和气孔开度的影响 | 第57-59页 |
·间接酶联免疫法(ELISA)测定植物内源ABA 含量 | 第59-60页 |
·ABP9 转基因植株对体内活性氧(ROS)的影响 | 第60-63页 |
·电子自旋共振(electron spin resonance, ESR)检测自由基含量 | 第60-61页 |
·H_2DCF-DA 荧光标记保卫细胞中ROS 含量 | 第61-62页 |
·组织化学定位法测定叶片内ROS 含量 | 第62-63页 |
·ABP9 基因对植物生长发育的影响 | 第63-64页 |
4 结论和讨论 | 第64-68页 |
·结论 | 第64页 |
·讨论 | 第64-66页 |
·结束语 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
致谢 | 第75页 |