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玉米转录因子ABP9在转基因拟南芥逆境应答中的功能分析

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 前言第9-27页
   ·植物对非生物逆境的反应第9-10页
   ·活性氧(Reactive Oxygen Species, ROS)第10-16页
     ·活性氧的产生部位第11页
     ·活性氧在植物体内的作用第11-15页
     ·植物体内活性氧清除系统第15-16页
   ·脱落酸(Abscisic acid,ABA)第16-23页
     ·ABA 的功能第16-17页
     ·ABA 的生物合成调控第17-18页
     ·ABA 应答基因第18-19页
     ·依赖于ABA 途径中的顺式作用元件与反式作用因子第19-20页
     ·ABA 与逆境信号传导第20-23页
   ·利用转基因策略改变植物的抗逆性第23-24页
   ·研究背景及意义第24-26页
   ·实验设计第26-27页
2 材料与方法第27-44页
   ·材料第27-28页
     ·植物材料第27页
     ·菌种第27页
     ·载体第27页
     ·工具酶和修饰酶第27页
     ·化学试剂第27页
     ·试剂盒第27-28页
     ·分子量标准第28页
     ·引物第28页
     ·测序第28页
     ·基因芯片分析第28页
   ·方法第28-44页
     ·质粒DNA 的小量制备(碱裂解法)第28-29页
     ·从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段第29页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化(电击法)第29-30页
     ·植物稳定表达载体p81121ABP9 和pCHF3ABP9DN 的建构第30-31页
     ·农杆菌GV3101 电击感受态细胞的制备和农杆菌转化及检测第31-33页
     ·拟南芥转化及纯系筛选第33-35页
     ·拟南芥植物材料的种植与处理第35-36页
     ·植物材料总RNA 的提取第36-37页
     ·基因芯片分析第37页
     ·RT—PCR第37-38页
     ·转基因拟南芥生理指标测定第38-41页
     ·活性氧(ROS)含量的测定方法第41-44页
3 结果与分析第44-64页
   ·植物转化表达载体的建构第44-45页
   ·农杆菌转化第45-46页
   ·拟南芥转化第46-47页
   ·植物体内总RNA 的分离第47-48页
   ·ABP9 转基因拟南芥纯系植株基因芯片分析第48-55页
     ·与激素(脱落酸、赤霉素、乙烯、生长素等)相关的基因第48-50页
     ·与清除活性氧相关的基因第50-51页
     ·与 MYB、WRKY 和zinc finger 蛋白等转录因子相关的基因第51-55页
   ·ABP9 转基因拟南芥纯系植株RT-PCR 分析第55-57页
     ·拟南芥 Acti112 基因对反转录产物(模板)进行均一化第55-56页
     ·ABP9 对ABA 相关基因的调控第56-57页
   ·ABP9 对拟南芥ABA 应答的调控第57-60页
     ·ABA 处理对转基因植株与野生型萌发率、根伸长和气孔开度的影响第57-59页
     ·间接酶联免疫法(ELISA)测定植物内源ABA 含量第59-60页
   ·ABP9 转基因植株对体内活性氧(ROS)的影响第60-63页
     ·电子自旋共振(electron spin resonance, ESR)检测自由基含量第60-61页
     ·H_2DCF-DA 荧光标记保卫细胞中ROS 含量第61-62页
     ·组织化学定位法测定叶片内ROS 含量第62-63页
   ·ABP9 基因对植物生长发育的影响第63-64页
4 结论和讨论第64-68页
   ·结论第64页
   ·讨论第64-66页
   ·结束语第66-68页
参考文献第68-75页
致谢第75页

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