| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-33页 |
| 第一章 植物病害防治 | 第12-17页 |
| 第一节 几种防治方法 | 第12-15页 |
| 1 植物检疫 | 第12-13页 |
| 2 农业防治 | 第13页 |
| 3 生物防治 | 第13页 |
| 4 物理机械防治 | 第13-14页 |
| 5 化学防治 | 第14-15页 |
| 第二节 生物防治 | 第15-17页 |
| 1 生物防治内涵 | 第15页 |
| 2 生物防治发展简况 | 第15-16页 |
| 3 综合防治基本内容 | 第16-17页 |
| 第二章 产酶溶杆菌研究进展 | 第17-22页 |
| 第一节 产酶溶杆菌生物学特性 | 第17-19页 |
| 1 产酶溶杆菌分类地位 | 第17页 |
| 2 产酶溶杆菌形态及生物学特征 | 第17-19页 |
| 第二节 产酶溶杆菌抗病机制 | 第19-22页 |
| 1 几丁质酶 | 第19页 |
| 2 β-1,3-葡聚糖酶 | 第19-20页 |
| 3 蛋白酶类 | 第20页 |
| 4 其它酶类 | 第20-21页 |
| 5 诱导抗性 | 第21页 |
| 6 调控基因 | 第21-22页 |
| 第三章 生防相关酶类及其作用 | 第22-33页 |
| 第一节 几丁质酶 | 第22-26页 |
| 1 几丁质酶的研究历史 | 第22页 |
| 2 微生物几丁质酶 | 第22-23页 |
| ·产几丁质酶的微生物种类 | 第22页 |
| ·微生物几丁质酶的性质 | 第22-23页 |
| 3 植物几丁质酶 | 第23-24页 |
| ·植物几丁质酶的分布和性质 | 第23页 |
| ·植物几丁质酶的分类 | 第23-24页 |
| ·植物几丁质酶的可诱导性 | 第24页 |
| 4 动物几丁质酶 | 第24页 |
| 5 几丁质酶在植物病害防治中的应用 | 第24-26页 |
| 第二节 β-1,3-葡聚糖酶 | 第26-29页 |
| 1 β-1,3-葡聚糖酶的分布 | 第26页 |
| 2 β-1,3-葡聚糖酶的结构与分类 | 第26页 |
| 3 β-1,3-葡聚糖酶在抗病中的作用 | 第26-29页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶的可诱导性 | 第27页 |
| ·转β-1,3-葡聚糖酶基因研究 | 第27页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶与其它防卫基因的协同表达 | 第27-29页 |
| 第三节 蛋白酶类 | 第29-33页 |
| 1 丝氨酸蛋白酶 | 第29页 |
| 2 a-水解蛋白酶 | 第29-32页 |
| ·产酶溶杆菌中a-水解蛋白酶的结构 | 第29-31页 |
| ·pro在蛋白表达和分泌中的作用 | 第31页 |
| ·影响a-水解蛋白酶分泌到胞外的因素 | 第31-32页 |
| 3 β-水解蛋白酶 | 第32-33页 |
| 第二部分 研究内容 | 第33-60页 |
| 第一章 产酶溶杆菌OH11菌株几丁质酶基因的克隆与表达 | 第33-43页 |
| 摘要 | 第33页 |
| Abstract | 第33-34页 |
| 1 材料与方法 | 第34-39页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·菌株与质粒 | 第34页 |
| ·培养基及抗生素的配制 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-37页 |
| ·产酶溶杆菌OH11菌株基因组DNA的提取 | 第35页 |
| ·产酶溶杆菌OH11菌株中几丁质酶基因的克隆与测序 | 第35-36页 |
| ·引物设计 | 第35页 |
| ·PCR扩增反应 | 第35页 |
| ·PCR产物的克隆和测序 | 第35-36页 |
| ·大肠杆菌热激感受态的制备和转化步骤 | 第36页 |
| ·质粒的提取 | 第36-37页 |
| ·质粒酶切 | 第37页 |
| ·几丁质酶蛋白的表达 | 第37-38页 |
| ·几丁质酶蛋白的纯化 | 第38-39页 |
| ·几丁质酶生物活性研究 | 第39页 |
| ·水解实验 | 第39页 |
| ·抑菌实验 | 第39页 |
| ·酶活性的测定 | 第39页 |
| 2 结果 | 第39-42页 |
| ·几丁质酶基因的克隆与测序 | 第39-41页 |
| ·几丁质酶蛋白的表达及功能 | 第41-42页 |
| ·几丁质酶蛋白的表达 | 第41页 |
| ·几丁质酶蛋白的水解活性 | 第41页 |
| ·几丁质酶蛋白的抑菌活性 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-43页 |
| 第二章 产酶溶杆菌OH11菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与表达 | 第43-53页 |
| 摘要 | 第43页 |
| Abstract: | 第43页 |
| 1 材料与方法 | 第43-47页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·菌株与质粒 | 第44页 |
| ·培养基及抗生素的配制 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-46页 |
| ·产酶溶杆菌OH11菌株基因组DNA的提取 | 第44页 |
| ·产酶溶杆菌OH11菌株中β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与测序 | 第44-46页 |
| ·gluA基因的克隆与测序 | 第44-45页 |
| ·引物设计 | 第44页 |
| ·PCR扩增反应 | 第44页 |
| ·PCR产物的克隆和测序 | 第44-45页 |
| ·gluB基因的克隆与测序 | 第45页 |
| ·引物设计 | 第45页 |
| ·PCR扩增反应 | 第45页 |
| ·PCR产物的克隆和测序 | 第45页 |
| ·gluC基因的克隆与测序 | 第45-46页 |
| ·引物设计 | 第45-46页 |
| ·PCR扩增反应 | 第46页 |
| ·PCR产物的克隆和测序 | 第46页 |
| ·大肠杆菌热激感受态的制备和转化 | 第46页 |
| ·质粒的提取 | 第46页 |
| ·质粒酶切 | 第46页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶蛋白的表达 | 第46页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶蛋白的纯化 | 第46页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶基因的生物活性研究 | 第46-47页 |
| ·水解实验 | 第46页 |
| ·抑菌实验 | 第46-47页 |
| ·酶活性的测定 | 第47页 |
| 2 结果 | 第47-52页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与测序 | 第47-49页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶基因的表达及纯化蛋白的功能 | 第49-52页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶基因的表达 | 第49-50页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶基因的水解活性 | 第50-51页 |
| ·β-1,3-葡聚糖酶基因的抑菌活性 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-53页 |
| 第三章 产酶溶杆菌OH11菌株中a-水解蛋白酶基因的克隆与表达 | 第53-60页 |
| 摘要 | 第53页 |
| Abstract: | 第53-54页 |
| 1 材料与方法 | 第54-55页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·菌株与质粒 | 第54页 |
| ·培养基及抗生素的配制 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-55页 |
| ·产酶溶杆菌OH11菌株基因组DNA的提取 | 第54页 |
| ·产酶溶杆菌OH11菌株中a-水解蛋白酶基因的克隆与测序 | 第54-55页 |
| ·引物设计 | 第54页 |
| ·PCR扩增反应 | 第54页 |
| ·PCR产物的克隆和测序 | 第54-55页 |
| ·大肠杆菌热激感受态的制备和转化 | 第55页 |
| ·质粒的提取 | 第55页 |
| ·质粒酶切 | 第55页 |
| ·a-水解蛋白酶的表达 | 第55页 |
| ·a-水解蛋白酶的纯化 | 第55页 |
| ·a-水解蛋白酶的生物活性研究 | 第55页 |
| ·水解实验 | 第55页 |
| ·抑菌实验 | 第55页 |
| ·酶活性的测定 | 第55页 |
| 2 结果 | 第55-59页 |
| ·a-水解蛋白酶基因的克隆与测序 | 第55-57页 |
| ·a-水解蛋白酶蛋白的表达及功能 | 第57-59页 |
| ·a-水解蛋白酶蛋白的表达 | 第57-58页 |
| ·a-水解蛋白酶的水解活性 | 第58页 |
| ·a-水解蛋白酶的抑菌活性 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 附录一 本实验中所用的试剂的配制方法 | 第69-72页 |
| 附录二 文章中克隆的基因在NCBI上的登录信息 | 第72-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
