摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一部分 前言 | 第8-16页 |
·HPV分子生物学简介 | 第9-10页 |
·病毒的类型分化 | 第10-11页 |
·HPV的致病机理 | 第11-14页 |
·HPV的防治及问题 | 第14-15页 |
·本课题的研究目标 | 第15-16页 |
第二部分 材料及方法 | 第16-32页 |
·实验材料 | 第16-21页 |
·标本 | 第16页 |
·菌种和质粒 | 第16页 |
·主要实验仪器和设备 | 第16-18页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·主要溶液的配制 | 第19-21页 |
·引物设计及合成 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-32页 |
·实验思路 | 第21页 |
·实验流程 | 第21-32页 |
·质粒PQE40-HPV6b L1少量制备 | 第21-23页 |
·制备的质粒DNA的电泳检验 | 第23页 |
·PCR扩增HPV6b L1片段 | 第23-25页 |
·PEGFP-C1质粒提取 | 第25页 |
·PCR产物纯化物及PEGFP-C1载体质粒的双酶切 | 第25页 |
·酶切产物的纯化 | 第25-26页 |
·连接反应 | 第26-27页 |
·感受态细胞制备 | 第27页 |
·重组DNA的转化 | 第27-28页 |
·重组DNA鉴定 | 第28-29页 |
·重组质粒测序 | 第29页 |
·细胞转染 | 第29页 |
·绿色荧光融合蛋白的表达检测和RT-PCR检测HPV6b L1 mRNA的生成 | 第29-32页 |
第三部分 实验结果 | 第32-36页 |
·PCR扩增HPV6bL1基因 | 第32页 |
·PEGFP-HPV6bL1表达载体的构建 | 第32-33页 |
·重组体平板筛选及鉴定 | 第33-34页 |
·绿色荧光蛋白的表达 | 第34-35页 |
·RT-PCR检测到HPV6bL1mRNA的生成 | 第35-36页 |
第四部分 讨论 | 第36-39页 |
第五部分 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
附录一 缩略词表 | 第45-46页 |
附录二 pQE40-HPV6L1连接序列 | 第46-47页 |
附录三 基因测序报告图 | 第47-49页 |
附录四 氨基酸缩写及遗传密码表 | 第49-50页 |
参加学术活动及在学期间发表论文 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |