| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 前言 | 第8-26页 |
| ·柱花草概述 | 第8-9页 |
| ·柱花草(STYLOSANTHES GUIANENSIS CV.)的生物学特性 | 第8页 |
| ·柱花草遗传转化研究进展 | 第8-9页 |
| ·植物抗寒基因工程概述 | 第9-22页 |
| ·植物抗寒生理 | 第9-10页 |
| ·植物的冷诱导基因 | 第10-11页 |
| ·植物抗寒基因工程 | 第11-22页 |
| ·前景展望 | 第22-24页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| ·本研究的技术路线 | 第25-26页 |
| 2 材料和方法 | 第26-41页 |
| ·材料和试剂 | 第26-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·生化试剂 | 第26-27页 |
| ·培养基及电渗液 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-41页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第27-33页 |
| ·质粒导入农杆菌 | 第33-34页 |
| ·叶盘法转化柱花草 | 第34-39页 |
| ·三种植物表达载体转化拟南芥 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-53页 |
| ·三个表达载体的鉴定 | 第41-43页 |
| ·植物表达载体PVKH-35S-CBF3-PA 的鉴定 | 第41页 |
| ·植物表达载体PVKH-35S-ATGOLS3-PA 的鉴定 | 第41-42页 |
| ·双价植物表达载体PVKH-35S-CBF3-PA -35S-ATGOLS3-PA 的鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组农杆菌的鉴定 | 第43-44页 |
| ·农杆菌介导的柱花草遗传转化及分析 | 第44-48页 |
| ·最适HYG 筛选压的确定 | 第44-45页 |
| ·转基因抗性植株的获得 | 第45-46页 |
| ·转基因柱花草的PCR 检测 | 第46-47页 |
| ·转基因柱花草的SOUTHERN 杂交检测 | 第47-48页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥遗传转化及分析鉴定 | 第48-53页 |
| ·最适HYG 筛选压的确定 | 第48-49页 |
| ·转基因拟南芥单拷贝插入纯合子植株的获得及分析 | 第49-53页 |
| 4. 讨论 | 第53-58页 |
| ·关于植物表达载体的构建 | 第53页 |
| ·关于双价表达载体 | 第53-54页 |
| ·转基因柱花草的发展前景 | 第54页 |
| ·关于柱花草转化体的选择培养 | 第54页 |
| ·关于柱花草生根过程中的玻璃化现象 | 第54-55页 |
| ·关于真空抽滤转化法 | 第55-56页 |
| ·转化的适宜时期 | 第55页 |
| ·关于表面活性剂 | 第55-56页 |
| ·关于MES 在拟南芥抗性苗筛选中的作用 | 第56页 |
| ·关于转基因拟南芥早期世代的不稳定性 | 第56-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献(REFERENCE) | 第59-67页 |
| 缩写词(ABBREVIATION) | 第67-68页 |
| 致 谢 | 第68-69页 |
| 详细摘要 | 第69-73页 |
