产高温蛋白酶细菌的筛选及其酶学性质的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 引言 | 第8-16页 |
| ·高温菌和温泉 | 第8页 |
| ·高温蛋白酶研究概况 | 第8-16页 |
| ·高温蛋白酶的分类和命名 | 第9-10页 |
| ·蛋白酶的分类与命名 | 第9页 |
| ·高温蛋白酶的分类 | 第9-10页 |
| ·高温蛋白酶的来源 | 第10-12页 |
| ·微生物作为蛋白酶的来源的优越性 | 第10页 |
| ·高温蛋白酶的产生菌 | 第10-11页 |
| ·嗜热真菌产生的高温蛋白酶 | 第11页 |
| ·高温细菌和高温古生菌是高温蛋白酶的最重要来源 | 第11-12页 |
| ·高温蛋白酶与中温蛋白酶酶学特征的差异 | 第12-14页 |
| ·高温蛋白酶的热稳定性是它不同于中温酶的首要特征 | 第13页 |
| ·高温蛋白酶对蛋白质变性剂有强烈的抗性 | 第13-14页 |
| ·高温蛋白酶具有耐有机溶剂的特性 | 第14页 |
| ·高温蛋白酶的功能及其作用 | 第14-16页 |
| ·高温蛋白酶的功能 | 第14页 |
| ·高温蛋白酶的应用 | 第14-15页 |
| ·课题意义 | 第15-16页 |
| 2 材料和方法 | 第16-30页 |
| ·材料 | 第16-18页 |
| ·生化试剂 | 第16页 |
| ·其他化学试剂 | 第16页 |
| ·常用溶液及配法 | 第16-17页 |
| ·培养基 | 第17-18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-30页 |
| ·菌株的筛选与分离纯化 | 第18-19页 |
| ·样品采集 | 第18-19页 |
| ·样品处理 | 第19页 |
| ·菌株初筛 | 第19页 |
| ·菌株复筛 | 第19页 |
| ·菌株的分离纯化 | 第19页 |
| ·菌株形态的显微观察 | 第19-20页 |
| ·普通染色 | 第19页 |
| ·革兰氏染色 | 第19-20页 |
| ·芽孢染色 | 第20页 |
| ·菌株生理生化实验 | 第20-22页 |
| ·卵磷脂酶的测定 | 第20页 |
| ·V-P试验 | 第20-21页 |
| ·淀粉水解 | 第21页 |
| ·明胶水解 | 第21页 |
| ·酪蛋白水解 | 第21页 |
| ·过氧化氢酶生成测定 | 第21-22页 |
| ·酪氨酸标准曲线的绘制及酶的比活力的测定 | 第22-23页 |
| ·酪氨酸标准曲线的绘制 | 第22页 |
| ·酶的比活力的测定 | 第22-23页 |
| ·不同营养成分和培养条件对菌株产生酶活的影响 | 第23-24页 |
| ·不同营养成分对菌株产生酶活的影响 | 第23页 |
| ·不同培养条件对菌株产生酶活的影响 | 第23-24页 |
| ·生长曲线与酶活力的测定 | 第24页 |
| ·高温蛋白酶的分离纯化 | 第24-28页 |
| ·(NH_4)_2SO_4盐析饱和度的确定 | 第24-25页 |
| ·(NH_4)_2SO_4盐析沉淀 | 第25页 |
| ·透析脱盐浓缩 | 第25-26页 |
| ·层析 | 第26页 |
| ·丙酮分级沉淀提纯 | 第26页 |
| ·高温蛋白酶SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定 | 第26-28页 |
| ·高温蛋白酶酶性质的研究 | 第28-30页 |
| ·高温蛋白酶的最适pH值 | 第28页 |
| ·高温蛋白酶的酸碱稳定性 | 第28-29页 |
| ·高温蛋白酶的最适反应温度 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-42页 |
| ·菌株筛选结果 | 第30-34页 |
| ·菌株的初筛结果 | 第30页 |
| ·菌株的复筛结果 | 第30-31页 |
| ·生理生化特性观察结果 | 第31-32页 |
| ·牛奶板滴板观察结果 | 第32页 |
| ·发酵液中培养测酶活 | 第32-33页 |
| ·显微观察结果 | 第33-34页 |
| ·革兰氏染色显微观察结果 | 第33页 |
| ·芽孢染色结果 | 第33-34页 |
| ·菌株TS1的生长曲线和产酶历程 | 第34页 |
| ·不同培养条件对酶活的影响 | 第34-38页 |
| ·碳源对菌体产高温蛋白酶的影响 | 第34-35页 |
| ·氮源对菌体产高温蛋白酶的影响 | 第35-36页 |
| ·不同金属离子的添加对产高温蛋白酶的影响 | 第36页 |
| ·不同的发酵初始pH值对产高温蛋白酶的影响 | 第36-37页 |
| ·不同的培养温度对产高温蛋白酶的影响 | 第37页 |
| ·不同的接种时间对产高温蛋白酶的影响 | 第37-38页 |
| ·不同的接种量对产高温蛋白酶的影响 | 第38页 |
| ·高温蛋白酶的分离纯化 | 第38-40页 |
| ·SephadexG-100凝胶层析分析 | 第38-39页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第39-40页 |
| ·高温蛋白酶酶性质的初步研究 | 第40-42页 |
| ·高温蛋白酶的最适pH | 第40页 |
| ·高混蛋白酶的酸碱稳定性 | 第40-41页 |
| ·高温蛋白酶的反应最适温度 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| ·高温蛋白酶菌株的筛选 | 第42页 |
| ·酵母提取物对菌体的增殖作用 | 第42页 |
| ·酪蛋白与酶产量的关系 | 第42页 |
| ·产酶历程与菌体生长 | 第42页 |
| ·发酵时间与紫外检测方法的准确性 | 第42-43页 |
| ·高温蛋白酶的分离纯化 | 第43页 |
| ·高温蛋白酶性质的研究 | 第43页 |
| ·本课题的研究前景 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
