摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第1章 绪论 | 第7-10页 |
1.1 肝癌现状与GPCR概述 | 第7-8页 |
1.2 GPR26简介 | 第8页 |
1.3 泛素化--蛋白酶体简介 | 第8-10页 |
第2章 GPR26在小鼠、肝癌病人和肝细胞中的表达情况 | 第10-23页 |
2.1 实验材料 | 第10-11页 |
2.1.1 主要试剂 | 第10-11页 |
2.1.2 主要仪器 | 第11页 |
2.2 实验方法 | 第11-17页 |
2.2.1 小鼠组织获取、样本收集和细胞培养 | 第11-12页 |
2.2.2 实时荧光定量 PCR(Q-PCR)与 PCR | 第12-15页 |
2.2.3 Western Blot实验 | 第15-17页 |
2.3 实验结果 | 第17-23页 |
2.3.1 GPR26在小鼠各组织中的表达 | 第17-19页 |
2.3.2 低表达量的 GPR26 在肝癌病人样本中仍表现出下降趋势 | 第19-20页 |
2.3.3 GPR26在正常肝细胞和肝癌细胞中的表达情况 | 第20-23页 |
第3章 GPR26对肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭作用研究 | 第23-37页 |
3.1 实验材料 | 第23-24页 |
3.1.1 主要试剂 | 第23页 |
3.1.2 主要仪器 | 第23-24页 |
3.2 实验方法 | 第24-29页 |
3.2.1 荧光素酶报告基因检测 | 第24-25页 |
3.2.2 CCK8检测实验 | 第25-27页 |
3.2.3 细胞侵袭与细胞迁移实验 | 第27-29页 |
3.3 实验结果 | 第29-37页 |
3.3.1 GPR26的信号通路验证 | 第29-30页 |
3.3.2 GPR26对肝癌细胞的增殖作用 | 第30-32页 |
3.3.3 GPR26对肝癌细胞的侵袭和迁移作用 | 第32-37页 |
第4章 GPR26对肝癌细胞的周期和凋亡作用研究 | 第37-48页 |
4.1 实验材料 | 第37-38页 |
4.1.1 主要试剂 | 第37页 |
4.1.2 主要仪器 | 第37-38页 |
4.2 实验方法 | 第38-40页 |
4.2.1 流式细胞仪测细胞周期 | 第38-39页 |
4.2.2 流式细胞仪测细胞凋亡 | 第39页 |
4.2.3 Western Blot实验 | 第39-40页 |
4.3 实验结果 | 第40-48页 |
4.3.1 GPR26对肝癌细胞周期的作用 | 第40-42页 |
4.3.2 GPR26对肝癌细胞凋亡的作用 | 第42-44页 |
4.3.3 GPR26抑制肝癌细胞周期、促进肝癌细胞凋亡的作用机制 | 第44-48页 |
第5章 GPR26体内裸鼠成瘤功能研究 | 第48-56页 |
5.1 实验材料 | 第48-49页 |
5.1.1 实验材料 | 第48页 |
5.1.2 主要试剂 | 第48页 |
5.1.3 主要仪器 | 第48-49页 |
5.2 实验方法 | 第49-52页 |
5.2.1 筛稳转细胞 | 第49-50页 |
5.2.2 裸鼠植瘤 | 第50页 |
5.2.3 免疫组化 | 第50-52页 |
5.3 实验结果 | 第52-56页 |
5.3.1 GPR26对裸鼠成瘤的作用 | 第52-54页 |
5.3.2 肿瘤免疫组化结果 | 第54-56页 |
第6章 讨论 | 第56-60页 |
6.1 低表达量的基因或者蛋白也可以在癌症或相关疾病中发挥作用 | 第56页 |
6.2 GPR26的低表达可能与其甲基化和快速泛素化降解有关 | 第56-58页 |
6.3 GPR26可作为肝癌治疗的一个靶点 | 第58-60页 |
附录 | 第60-61页 |
1.主要缓冲液及部分试剂的配置 | 第60页 |
2.英文缩略词表 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-64页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |