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肌酸激酶活性Cys 283位点的极性微环境以及活性与结构变化关系的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
综述部分 肌酸激酶的研究进展第9-34页
 前言第10-11页
 一、化学修饰研究第11-24页
  1. 蛋白质的化学修饰第11-14页
  2. 蛋白质侧链基团的修饰反应第14-15页
  3. 特定的氨基酸残基侧链基团的反应试剂第15-17页
  4. 琉基的化学修饰第17-18页
  5. 化学修饰反应条件的影响第18-20页
  6. 酶活性修饰过程中底物反应动力学第20-24页
 二、结构变化研究第24-28页
 参考文献(Reference)第28-34页
实验部分I 兔肌肌酸激酶活性半胱氨酸位点(Cys 283) 的极性环境研究第34-56页
 前言第35页
 一、实验材料及仪器第35-37页
  1. 常用溶液与缓冲液第35-36页
  2. 抑制剂第36页
  3. 底物第36页
  4. 主要仪器第36-37页
 二、实验方法第37-44页
  1. 兔肌肌酸激酶的分离提纯与浓度测定第37-38页
  2. 肌酸激酶的测活方法(pH-比色法)第38-39页
  3. 肌酸激酶的失活动力学实验第39-40页
  4. 肌酸激酶的底物反应动力学实验第40-41页
  5. 相关动力学理论分析第41-44页
 三、实验结果第44-50页
  1. 肌酸激酶的失活动力学分析第44-46页
  2. 肌酸激酶的底物反应动力学分析第46-50页
 四、讨论第50-51页
 五、参考文献(Reference)第51-56页
实验部分 II 兔肌肌酸激酶的失活与结构变化之间的关系研究第56-69页
 前言第57页
 一、实验材料及仪器第57-58页
  1. 常用溶液与缓冲液第57页
  2. 相关试剂第57-58页
  3. 主要仪器第58页
 二、实验方法第58-59页
  1. 肌酸激酶的分离提纯和浓度测定第58页
  2. 肌酸激酶的活力测定第58-59页
  3. 酶的氧化第59页
  4. 内源荧光和外源 ANS荧光测定第59页
 三、实验结果第59-64页
  1. 氧化型 DTT对肌酸激酶活性的影响第59页
  2. 肌酸激酶在不同浓度的氧化型 DTT溶液中的失活动力学第59-62页
  3. 氧化型 DTT对肌酸激酶内源荧光和 ANS荧光光谱的影响第62-64页
 四、实验讨论第64-65页
 五、参考文献(Reference)第65-69页
附录一第69-70页
致谢第70-71页
个人简历第71页

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