中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
前言 | 第8-10页 |
主要材料 | 第10-11页 |
第一部分 RNA干扰质粒Pcnlacl-tel、正义RNA质粒Pcnlacl-S-tel、反义RNA质粒Pcnlacl-A-tel的构建。 | 第11-31页 |
实验步骤和方法 | 第12-22页 |
一、RNA干扰质粒Pcnlacl-tel的构建。 | 第12-14页 |
1、新生隐球菌基因组DNA的获得 | 第12-13页 |
2、新生隐球菌Cnlacl基因部分序列的扩增 | 第13-14页 |
二、PCR引物对新生隐球菌不同菌株DNA的扩增 | 第14-22页 |
3、目的片段的克隆: | 第14-17页 |
4、质粒Pcnlacl-tel的构建 | 第17-20页 |
5、正义RNA质粒Pcnlacl-S-tel的构建 | 第20-21页 |
6、反义RNA质粒Pcnlacl-A-tel的构建 | 第21-22页 |
结果 | 第22-29页 |
讨论 | 第29-31页 |
第二部分 新生隐球菌对外源性质粒的转化、筛选和鉴定 | 第31-42页 |
实验步骤和方法 | 第31-34页 |
1.超大规模质粒抽提: | 第31-32页 |
2.醋酸锂化学转化法 | 第32-33页 |
3.电转化方法 | 第33-34页 |
结果 | 第34-35页 |
讨论 | 第35-42页 |
硕士期间书写论文 | 第42页 |
参考文献 | 第42-44页 |
综述 | 第44-53页 |
致谢 | 第53页 |