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治疗严重脓毒症创新药物——活化C蛋白样物质的开发

缩写与中英文对照第1-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
第一章 前言第12-31页
   ·脓毒症第12-13页
   ·活化C蛋白第13-20页
     ·C蛋白和活化C蛋白第13-15页
     ·活化C蛋白的生物学效应第15-19页
       ·活化C蛋白的抗凝溶栓作用第15-16页
       ·活化C蛋白的抗炎作用第16-17页
       ·寸内皮细胞的调控作用第17-18页
       ·活化C蛋白对严重脓毒症的治疗第18-19页
     ·活化C蛋白及其相关产品的开发第19-20页
       ·活化C蛋白第19页
       ·人体内活化C蛋白水平的诊断第19-20页
       ·血栓调节蛋白和内皮细胞C蛋白受体第20页
   ·来源于蛇毒的作用于血液系统的蛋白质第20-29页
     ·蛇毒类凝血酶第21-22页
       ·理化性质第21-22页
       ·临床应用第22页
     ·蛇毒凝血酶第22-24页
     ·蛇毒C蛋白激活剂第24-25页
     ·蛇毒凝血酶原激活剂第25-26页
     ·蛇毒凝血因子V激活剂第26页
     ·蛇毒凝血因子X激活剂第26页
     ·蛇毒血小板聚集抑制因子第26-27页
     ·凝血酶抑制剂第27-28页
     ·蛇毒纤溶酶原激活剂第28-29页
   ·本课题的立题意义和研究内容第29-31页
     ·立题意义第29-30页
     ·研究内容第30-31页
第二章 在不同蛇毒中筛选活化C蛋白样物质的研究第31-36页
   ·材料第31-32页
     ·蛇毒第31页
     ·主要试剂第31-32页
     ·主要仪器和设备第32页
   ·试验方法第32页
     ·活化部分凝血活酶时间的测定第32页
     ·蛇毒水解显色肽能力的测定第32页
   ·试验结果第32-34页
     ·不同蛇毒对人血浆活化部分凝血活酶时间的影响第32-33页
     ·不同蛇毒对活化C蛋白特异显色肽水解的能力第33-34页
   ·讨论第34-35页
   ·小结第35-36页
第三章 蝮蛇毒中活化C蛋白样物质的分离纯化及其特性的研究第36-58页
   ·材料第37-38页
     ·蛇毒第37页
     ·层析填料第37页
     ·主要生化试剂第37页
     ·主要仪器和设备第37-38页
   ·试验方法第38-46页
     ·阴离子交换层析分离蝮蛇毒第38页
     ·凝胶过滤层析第38-39页
     ·延长活化部分凝血活酶时间的测定第39页
     ·水解显色肽能力的测定第39页
     ·精氨酸酯酶活性的测定第39页
     ·胆碱酯酶第39页
     ·蛋白水解酶第39-40页
     ·L-氨基酸氧化酶第40页
     ·考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度第40-41页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第41-43页
       ·制备分离胶及浓缩胶第41-42页
       ·样品的处理与上样第42页
       ·电泳第42-43页
       ·固定、染色、脱色第43页
     ·等电聚焦电泳法(IEF)测定蛋白质的等电点第43-45页
       ·凝胶液的配制第43页
       ·装管及聚合第43-44页
       ·电泳第44页
       ·剥胶第44页
       ·固定及染色第44-45页
     ·HPLC检测纯度第45页
     ·凝胶过滤预装柱检测纯度第45页
     ·酶促反应中Km禾Vmax的测定第45-46页
   ·结果第46-57页
     ·阴离子交换层析第46-47页
     ·活化部分凝血活酶时间的测定第47页
     ·水解显色肽能力的测定第47-49页
     ·凝胶过滤层析纯化第49-51页
     ·SDS-PAGE纯度检测第51-52页
     ·凝胶过滤预装柱检测纯度第52-53页
     ·HPLC检测纯度第53页
     ·分子量测定第53-54页
     ·等电点测定第54-55页
     ·其它几种酶活性的检测第55页
     ·蛋白酶抑制剂对酶促反应的影响第55页
     ·酶促反应中Km和Vmax的测定第55-57页
   ·讨论第57页
   ·小结第57-58页
第四章 活化C蛋白样物质对脓毒症试验动物的作用第58-63页
   ·材料第58-59页
     ·实验动物第58页
     ·主要试剂第58-59页
   ·试验方法第59-60页
     ·LPS对小鼠LD100的测定第59页
     ·在增敏剂作用下LPS对小鼠LD100的测定第59页
     ·APCL对正常小鼠毒性测定第59页
     ·APCL降低脓毒症小鼠死亡率的考察第59-60页
   ·结果第60-62页
     ·LPS对小鼠LD100的测定第60页
     ·在放线菌素D增敏作用下LPS对小鼠LD100的测定第60-61页
     ·APCL对正常小鼠毒性测定第61页
     ·APCL降低脓毒症小鼠死亡率第61-62页
   ·讨论第62页
   ·小结第62-63页
第五章 活化C蛋白样物质的聚乙二醇修饰第63-76页
   ·材料第64页
     ·层析填料第64页
     ·主要仪器设备第64页
     ·主要试剂第64页
   ·试验方法第64-67页
     ·APCL与mPEG-SPA(MW5000)的反应第64-65页
     ·聚乙二醇化APCL的分离纯化第65页
     ·SDS-PAGE分析聚乙二醇化APCL第65页
     ·凝胶过滤预装柱分析聚乙二醇化APCL第65页
     ·HPLC分析聚乙二醇化APCL第65页
     ·延长活化部分凝血活酶时间的测定第65页
     ·水解显色肽能力的测定第65-66页
     ·稳定性比较试验第66页
     ·双向琼脂扩散试验第66-67页
   ·结果第67-74页
     ·聚乙二醇化APCL的分离纯化第67-68页
     ·SDS-PAGE分析聚乙二醇化APCL第68页
     ·凝胶过滤预装柱分析聚乙二醇化APCL第68-70页
     ·HPLC分析聚乙二醇化APCL第70-71页
     ·延长活化部分凝血活酶时间的测定第71-72页
     ·水解显色肽能力的测定第72页
     ·稳定性比较试验第72-74页
     ·双向琼脂扩散试验第74页
   ·讨论第74-75页
   ·小结第75-76页
结论第76-77页
展望第77-78页
参考文献:第78-85页
致谢第85-86页
综述报告和发表论文第86页

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