缩写与中英文对照 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第一章 前言 | 第12-31页 |
·脓毒症 | 第12-13页 |
·活化C蛋白 | 第13-20页 |
·C蛋白和活化C蛋白 | 第13-15页 |
·活化C蛋白的生物学效应 | 第15-19页 |
·活化C蛋白的抗凝溶栓作用 | 第15-16页 |
·活化C蛋白的抗炎作用 | 第16-17页 |
·寸内皮细胞的调控作用 | 第17-18页 |
·活化C蛋白对严重脓毒症的治疗 | 第18-19页 |
·活化C蛋白及其相关产品的开发 | 第19-20页 |
·活化C蛋白 | 第19页 |
·人体内活化C蛋白水平的诊断 | 第19-20页 |
·血栓调节蛋白和内皮细胞C蛋白受体 | 第20页 |
·来源于蛇毒的作用于血液系统的蛋白质 | 第20-29页 |
·蛇毒类凝血酶 | 第21-22页 |
·理化性质 | 第21-22页 |
·临床应用 | 第22页 |
·蛇毒凝血酶 | 第22-24页 |
·蛇毒C蛋白激活剂 | 第24-25页 |
·蛇毒凝血酶原激活剂 | 第25-26页 |
·蛇毒凝血因子V激活剂 | 第26页 |
·蛇毒凝血因子X激活剂 | 第26页 |
·蛇毒血小板聚集抑制因子 | 第26-27页 |
·凝血酶抑制剂 | 第27-28页 |
·蛇毒纤溶酶原激活剂 | 第28-29页 |
·本课题的立题意义和研究内容 | 第29-31页 |
·立题意义 | 第29-30页 |
·研究内容 | 第30-31页 |
第二章 在不同蛇毒中筛选活化C蛋白样物质的研究 | 第31-36页 |
·材料 | 第31-32页 |
·蛇毒 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31-32页 |
·主要仪器和设备 | 第32页 |
·试验方法 | 第32页 |
·活化部分凝血活酶时间的测定 | 第32页 |
·蛇毒水解显色肽能力的测定 | 第32页 |
·试验结果 | 第32-34页 |
·不同蛇毒对人血浆活化部分凝血活酶时间的影响 | 第32-33页 |
·不同蛇毒对活化C蛋白特异显色肽水解的能力 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
·小结 | 第35-36页 |
第三章 蝮蛇毒中活化C蛋白样物质的分离纯化及其特性的研究 | 第36-58页 |
·材料 | 第37-38页 |
·蛇毒 | 第37页 |
·层析填料 | 第37页 |
·主要生化试剂 | 第37页 |
·主要仪器和设备 | 第37-38页 |
·试验方法 | 第38-46页 |
·阴离子交换层析分离蝮蛇毒 | 第38页 |
·凝胶过滤层析 | 第38-39页 |
·延长活化部分凝血活酶时间的测定 | 第39页 |
·水解显色肽能力的测定 | 第39页 |
·精氨酸酯酶活性的测定 | 第39页 |
·胆碱酯酶 | 第39页 |
·蛋白水解酶 | 第39-40页 |
·L-氨基酸氧化酶 | 第40页 |
·考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 | 第40-41页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第41-43页 |
·制备分离胶及浓缩胶 | 第41-42页 |
·样品的处理与上样 | 第42页 |
·电泳 | 第42-43页 |
·固定、染色、脱色 | 第43页 |
·等电聚焦电泳法(IEF)测定蛋白质的等电点 | 第43-45页 |
·凝胶液的配制 | 第43页 |
·装管及聚合 | 第43-44页 |
·电泳 | 第44页 |
·剥胶 | 第44页 |
·固定及染色 | 第44-45页 |
·HPLC检测纯度 | 第45页 |
·凝胶过滤预装柱检测纯度 | 第45页 |
·酶促反应中Km禾Vmax的测定 | 第45-46页 |
·结果 | 第46-57页 |
·阴离子交换层析 | 第46-47页 |
·活化部分凝血活酶时间的测定 | 第47页 |
·水解显色肽能力的测定 | 第47-49页 |
·凝胶过滤层析纯化 | 第49-51页 |
·SDS-PAGE纯度检测 | 第51-52页 |
·凝胶过滤预装柱检测纯度 | 第52-53页 |
·HPLC检测纯度 | 第53页 |
·分子量测定 | 第53-54页 |
·等电点测定 | 第54-55页 |
·其它几种酶活性的检测 | 第55页 |
·蛋白酶抑制剂对酶促反应的影响 | 第55页 |
·酶促反应中Km和Vmax的测定 | 第55-57页 |
·讨论 | 第57页 |
·小结 | 第57-58页 |
第四章 活化C蛋白样物质对脓毒症试验动物的作用 | 第58-63页 |
·材料 | 第58-59页 |
·实验动物 | 第58页 |
·主要试剂 | 第58-59页 |
·试验方法 | 第59-60页 |
·LPS对小鼠LD100的测定 | 第59页 |
·在增敏剂作用下LPS对小鼠LD100的测定 | 第59页 |
·APCL对正常小鼠毒性测定 | 第59页 |
·APCL降低脓毒症小鼠死亡率的考察 | 第59-60页 |
·结果 | 第60-62页 |
·LPS对小鼠LD100的测定 | 第60页 |
·在放线菌素D增敏作用下LPS对小鼠LD100的测定 | 第60-61页 |
·APCL对正常小鼠毒性测定 | 第61页 |
·APCL降低脓毒症小鼠死亡率 | 第61-62页 |
·讨论 | 第62页 |
·小结 | 第62-63页 |
第五章 活化C蛋白样物质的聚乙二醇修饰 | 第63-76页 |
·材料 | 第64页 |
·层析填料 | 第64页 |
·主要仪器设备 | 第64页 |
·主要试剂 | 第64页 |
·试验方法 | 第64-67页 |
·APCL与mPEG-SPA(MW5000)的反应 | 第64-65页 |
·聚乙二醇化APCL的分离纯化 | 第65页 |
·SDS-PAGE分析聚乙二醇化APCL | 第65页 |
·凝胶过滤预装柱分析聚乙二醇化APCL | 第65页 |
·HPLC分析聚乙二醇化APCL | 第65页 |
·延长活化部分凝血活酶时间的测定 | 第65页 |
·水解显色肽能力的测定 | 第65-66页 |
·稳定性比较试验 | 第66页 |
·双向琼脂扩散试验 | 第66-67页 |
·结果 | 第67-74页 |
·聚乙二醇化APCL的分离纯化 | 第67-68页 |
·SDS-PAGE分析聚乙二醇化APCL | 第68页 |
·凝胶过滤预装柱分析聚乙二醇化APCL | 第68-70页 |
·HPLC分析聚乙二醇化APCL | 第70-71页 |
·延长活化部分凝血活酶时间的测定 | 第71-72页 |
·水解显色肽能力的测定 | 第72页 |
·稳定性比较试验 | 第72-74页 |
·双向琼脂扩散试验 | 第74页 |
·讨论 | 第74-75页 |
·小结 | 第75-76页 |
结论 | 第76-77页 |
展望 | 第77-78页 |
参考文献: | 第78-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
综述报告和发表论文 | 第86页 |