| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 绪论 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-31页 |
| 1． 1 引言 | 第12页 |
| 1． 2 壳低聚糖和壳寡糖 | 第12-16页 |
| 1． 2． 1 壳低聚糖和壳寡糖的应用 | 第12-15页 |
| 1． 2． 1． 1 基因载体 | 第12-14页 |
| 1． 2． 1． 2 减脂吸脂 | 第14-15页 |
| 1． 2． 1． 3 抗菌抑菌 | 第15页 |
| 1． 2． 2 壳低聚糖和壳寡糖的生产 | 第15-16页 |
| 1． 3 壳聚糖酶 | 第16-19页 |
| 1． 3． 1 壳聚糖酶的分离纯化 | 第17页 |
| 1． 3． 2 壳聚糖酶的性质 | 第17-19页 |
| 1． 3． 2． 1 相对分子质量 | 第17-18页 |
| 1． 3． 2． 2 温度和pH对壳聚糖酶活性的影响 | 第18页 |
| 1． 3． 2． 3 促进剂和抑制剂 | 第18页 |
| 1． 3． 2． 4 酶解方式 | 第18-19页 |
| 1． 4 常见蛋白质分离纯化技术基本原理 | 第19-28页 |
| 1． 4． 1 超滤 | 第19-20页 |
| 1． 4． 2 沉淀 | 第20-22页 |
| 1． 4． 2． 1 盐析沉淀 | 第20-21页 |
| 1． 4． 2． 2 有机溶剂沉淀 | 第21-22页 |
| 1． 4． 3 层析 | 第22-25页 |
| 1． 4． 3． 1 凝胶过滤 | 第22-23页 |
| 1． 4． 3． 2 离子交换 | 第23-25页 |
| 1． 4． 4 电泳 | 第25-28页 |
| 1． 4． 4． 1 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第26-27页 |
| 1． 4． 4． 2 等电聚焦 | 第27-28页 |
| 1． 5 壳聚糖检测 | 第28-30页 |
| 1． 5． 1 壳聚糖浓度测试 | 第28-29页 |
| 1． 5． 2 壳聚糖相对分子质量测试 | 第29-30页 |
| 1． 6 本文研究内容 | 第30-31页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第31-35页 |
| 2． 1 材料 | 第31页 |
| 2． 1． 1 菌种及保藏 | 第31页 |
| 2． 1． 2 培养基 | 第31页 |
| 2． 1． 3 主要材料 | 第31页 |
| 2． 2 仪器设备 | 第31页 |
| 2． 3 分析方法 | 第31-35页 |
| 2． 3． 1 还原糖浓度测定 | 第31-33页 |
| 2．3． 2 壳聚糖酶活力的测定 | 第33页 |
| 2． 3． 3 蛋白质浓度的测定 | 第33-35页 |
| 第三章 壳聚糖酶的分离纯化 | 第35-51页 |
| 3． 1 引言 | 第35-36页 |
| 3． 2 材料和方法 | 第36-42页 |
| 3． 2． 1 实验材料 | 第36页 |
| 3． 2． 2 实验设备 | 第36页 |
| 3． 2． 3 实验方法 | 第36-42页 |
| 3． 2． 3． 1 超滤浓缩粗酶液 | 第36页 |
| 3． 2． 3． 2 (NH_4) _2SO_4分级和冰乙醇沉淀壳聚糖酶 | 第36-37页 |
| 3． 2． 3． 3 凝胶过滤法纯化蛋白质及脱盐 | 第37-38页 |
| 3． 2． 3． 4 样品的浓缩 | 第38页 |
| 3． 2． 3． 5 等电聚焦法测定等电点 | 第38-39页 |
| 3． 2． 3． 6 离子交换和凝胶过滤分离壳聚糖酶 | 第39-40页 |
| 3． 2． 3． 7 SDS-PAGE | 第40-42页 |
| 3． 3 结果与讨论 | 第42-50页 |
| 3． 3． 1 粗酶液超滤浓缩 | 第42页 |
| 3． 3． 2 有机溶剂沉淀和(NH_4) _2SO_4分级沉淀 | 第42-44页 |
| 3． 3． 3 壳聚糖酶等电点测试 | 第44-46页 |
| 3． 3． 4 离子交换法初步分离壳聚糖酶 | 第46-48页 |
| 3． 3． 5 凝胶过滤法提纯壳聚糖酶 | 第48-49页 |
| 3． 3． 6 壳聚糖酶收率 | 第49-50页 |
| 3． 4 小结 | 第50-51页 |
| 第四章 壳聚糖酶学性质测试 | 第51-61页 |
| 4． 1 引言 | 第51页 |
| 4． 2 材料和方法 | 第51-52页 |
| 4． 2． 1 实验材料 | 第51页 |
| 4． 2． 2 实验方法 | 第51-52页 |
| 4． 2． 2． 1 凝胶过滤法测定蛋白质相对分子质量 | 第51页 |
| 4． 2． 2． 2 纸层析法测试降解产物 | 第51-52页 |
| 4． 2． 2． 3 HPLC法测试降解产物 | 第52页 |
| 4． 3 结果与讨论 | 第52-60页 |
| 4． 3． 1 相对分子质量测试 | 第52-55页 |
| 4． 3． 1． 1 凝胶过滤法 | 第52页 |
| 4． 3． 1． 2 SDS-PAGE | 第52-55页 |
| 4． 3． 2 pH对酶解反应的影响 | 第55页 |
| 4． 3． 3 温度对酶解反应的影响 | 第55-57页 |
| 4． 3． 3． 1 最适酶解温度 | 第55-56页 |
| 4． 3． 3． 2 失活曲线 | 第56-57页 |
| 4． 3． 4 金属离子对酶解反应的影响 | 第57页 |
| 4． 3． 5 底物对酶解反应的影响 | 第57-58页 |
| 4． 3． 6 酶解方式讨论 | 第58-60页 |
| 4． 4 小结 | 第60-61页 |
| 第五章 壳低聚糖制备的初步研究 | 第61-72页 |
| 5． 1 引言 | 第61页 |
| 5． 2 材料和方法 | 第61-63页 |
| 5． 2． 1 实验材料 | 第61页 |
| 5． 2． 2 实验设备 | 第61页 |
| 5． 2． 3 实验方法 | 第61-63页 |
| 5． 2． 3． 1 测定壳聚糖浓度 | 第61-62页 |
| 5． 2． 3． 2 测定壳聚糖的相对分子质量 | 第62-63页 |
| 5． 2． 3． 3 检测壳聚糖的质量 | 第63页 |
| 5． 3 结果和讨论 | 第63-71页 |
| 5． 3． 1 壳低聚糖分子量测试方法建立 | 第63-68页 |
| 5． 3． 1． 1 壳低聚糖溶液特性粘度的测定 | 第63-66页 |
| 5． 3． 1． 2 测定壳低聚糖的相对重均分子质量 | 第66-67页 |
| 5． 3． 1． 3 MHS方程常数的确定 | 第67-68页 |
| 5． 3． 2 用混合酶制备壳低聚糖 | 第68-70页 |
| 5． 3． 3 用内切壳聚糖酶ChA制备壳低聚糖 | 第70-71页 |
| 5． 4 小结 | 第71-72页 |
| 第六章 结论与建议 | 第72-74页 |
| 6． 1 结论 | 第72-73页 |
| 6． 2 建议 | 第73-74页 |
| 符号说明 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 发表论文 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
