| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-21页 |
| 1 癌症 | 第15-17页 |
| ·癌症概述 | 第15-16页 |
| ·抗癌药物概况 | 第16页 |
| ·微生物来源的抗癌新药 | 第16-17页 |
| 2 细胞自噬 | 第17-19页 |
| ·自噬的概述 | 第17页 |
| ·自噬形成的分子机制 | 第17-18页 |
| ·自噬与肿瘤 | 第18-19页 |
| ·自噬体的检测 | 第19页 |
| 3 展望 | 第19-20页 |
| 4 立题依据 | 第20-21页 |
| 第二章 具有抗肿瘤活性的放线菌代谢产物的筛选 | 第21-29页 |
| 1 实验材料 | 第21-23页 |
| ·药品与试剂 | 第21-22页 |
| ·实验耗材 | 第22页 |
| ·实验仪器 | 第22-23页 |
| ·主要培养基、试剂配方 | 第23页 |
| 2 实验方法 | 第23-26页 |
| ·微生物待测活性样品的制备 | 第23-24页 |
| ·细胞培养 | 第24-25页 |
| ·MTT法初筛 | 第25页 |
| ·PI染色流式细胞仪技术复筛 | 第25-26页 |
| 3 实验结果 | 第26-28页 |
| ·MTT初筛结果 | 第26-27页 |
| ·PI染色流式仪复筛结果 | 第27-28页 |
| 4 小结 | 第28-29页 |
| 第三章 菌株1070活性产物初步分离 | 第29-36页 |
| 1 实验材料 | 第29-30页 |
| ·药品与试剂 | 第29-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-31页 |
| ·菌株1070活性产物提取分离 | 第30页 |
| ·活性物质组成的研究 | 第30-31页 |
| 3 实验结果 | 第31-34页 |
| ·菌株1070代谢产物甲醇沉淀物及各分离组分对HGC、A549细胞生长的影响 | 第31-32页 |
| ·菌株1070不同分子量的代谢产物对HGC、A549细胞生长的影响 | 第32页 |
| ·活性物质全波长紫外扫描的结果 | 第32页 |
| ·活性物质的茚三酮显色实验结果 | 第32-33页 |
| ·Molish反应法检测活性样品中糖类物质 | 第33页 |
| ·酸水解菌株1070活性组分纸层析结果 | 第33-34页 |
| 4 小结 | 第34-36页 |
| 第四章 菌株1070活性组分抑制A549细胞生长机制研究 | 第36-56页 |
| 1 实验材料 | 第36-38页 |
| ·药品与试剂 | 第36-37页 |
| ·部分试剂配方 | 第37-38页 |
| 2 实验方法 | 第38-43页 |
| ·菌株1070活性物质抑制A549细胞生长的IC_(50)值的测定 | 第38页 |
| ·扫描电镜观察 | 第38-39页 |
| ·透射电镜观察 | 第39页 |
| ·细胞总基因DNA组电泳 | 第39-40页 |
| ·Annexin V-FITC and PI双染流式细胞仪检测 | 第40页 |
| ·活细胞罗丹明123荧光染色流式细胞仪检测 | 第40-41页 |
| ·活细胞单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色流式细胞仪检测 | 第41页 |
| ·活细胞吖啶橙(AO)染色 | 第41-42页 |
| ·Western-blot蛋白质杂交 | 第42-43页 |
| ·菌株1070活性物质急性毒性研究。 | 第43页 |
| 3 实验结果 | 第43-54页 |
| ·菌株1070抗肿瘤活性物质作用A549的IC_(50)的检测 | 第43-45页 |
| ·光学显微镜下菌株1070活性组分作用后的A549细胞形态的变化 | 第45页 |
| ·扫描电镜观察A549细胞形态的变化 | 第45-46页 |
| ·透射电镜观察A549细胞形态的变化 | 第46-47页 |
| ·细胞总基因组DNA电泳实验结果 | 第47-48页 |
| ·Annexin V-FITC and PI双染流式结果 | 第48-49页 |
| ·活细胞罗丹明123染色法检测细胞线粒体损伤 | 第49页 |
| ·MDC染色法定量检测A549细胞自噬体的数量 | 第49-52页 |
| ·AO染色法检测A549细胞自噬泡的产生 | 第52-53页 |
| ·Western-blot检测细胞自噬相关蛋白表达量的变化 | 第53-54页 |
| ·1070活性组分小鼠急性毒性实验结果 | 第54页 |
| 4 小结 | 第54-56页 |
| 第五章 菌株1070的鉴定 | 第56-68页 |
| 1 实验材料 | 第56-58页 |
| ·药品与试剂 | 第56-57页 |
| ·部分培养基、试剂配方 | 第57-58页 |
| 2 实验方法 | 第58-60页 |
| ·菌落及菌丝形态的观察 | 第58页 |
| ·菌株1070生理生化特性的考察 | 第58-59页 |
| ·16S rDNA体外扩增测序 | 第59-60页 |
| 3 实验结果 | 第60-67页 |
| ·菌落形态 | 第60-61页 |
| ·甲基红(MR)和乙酰甲基甲醇(VP)实验结果 | 第61页 |
| ·碳源利用情况 | 第61-62页 |
| ·氮源利用情况 | 第62页 |
| ·16S rDNA体外扩增测序 | 第62页 |
| ·菌株1070 16S rDNA基因进化树的绘制 | 第62-67页 |
| 4 小结 | 第67-68页 |
| 第六章 结论与讨论 | 第68-73页 |
| 1 结论 | 第68页 |
| 2 讨论 | 第68-73页 |
| ·MTT体外筛选抗肿瘤药物法 | 第68-69页 |
| ·菌株1070活性产物的分离 | 第69页 |
| ·菌株1070活性成分的IC_(50) | 第69页 |
| ·自体吞噬与抗肿瘤药物 | 第69-70页 |
| ·线粒体膜电位变化与细胞损伤 | 第70页 |
| ·MDC检测发生比率较低的自噬 | 第70页 |
| ·AO染色定性检测自噬小体 | 第70-71页 |
| ·细胞自噬、细胞凋亡与细胞坏死 | 第71页 |
| ·LC3蛋白表达量的改变 | 第71-72页 |
| ·细胞超微结构的观察 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 发表文章目录 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
