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瑞氏木霉N-糖基化途径的人源化改造初探

目录第1-6页
摘要第6-10页
ABSTRACT第10-14页
第一章 绪论第14-30页
   ·丝状真菌瑞氏木霉(Trichoderma reesei)简介第14-15页
   ·丝状真菌转化系统第15-18页
     ·丝状真菌转化方法第15-16页
     ·丝状真菌转化标记第16-17页
     ·转化DNA的整合第17-18页
   ·糖基化修饰途径研究进展第18-28页
     ·蛋白质糖基化第18-20页
     ·糖基化工程第20-23页
     ·糖基转移酶第23-26页
     ·糖链解析第26-28页
   ·本文主要研究内容第28-30页
第二章 对T.reesei alg3基因的敲除和外源ST6GalI基因的表达第30-50页
   ·材料和方法第30-36页
     ·菌株和质粒第30-31页
     ·培养基和试剂第31页
     ·普通分子生物学实验方法第31页
     ·重组质粒pS△M的构建第31-32页
     ·瑞氏木霉的转化方法第32-33页
     ·瑞氏木霉染色体DNA的提取与纯化第33-34页
     ·瑞氏木霉转化子的PCR验证第34-35页
     ·瑞氏木霉转化子RNA的提取第35-36页
     ·瑞氏木霉转化子的RT-PCR验证第36页
     ·瑞氏木霉转化子的Real Time RT-PCR验证第36页
   ·结果与讨论第36-48页
     ·pS△M的构建第36-40页
     ·pS△M对T.reesei M23的转化第40-41页
     ·瑞氏木霉转化子的PCR筛选和分离纯化第41-42页
     ·瑞氏木霉转化子324、875、924和Z43的分子生物学分析第42-46页
     ·瑞士木霉转化子b-8-1的分子生物学分析第46-48页
   ·本章小结第48-50页
第三章 外源GnTI和GalT基因在T.reesei中的表达第50-60页
   ·材料和方法第50-53页
     ·菌株和质粒第50页
     ·培养基和试剂第50-51页
     ·普通分子生物学实验方法第51页
     ·重组质粒pGG的构建第51页
     ·瑞氏木霉的转化方法第51-52页
     ·瑞氏木霉染色体DNA的提取与纯化第52页
     ·瑞氏木霉转化子的PCR验证第52-53页
     ·瑞氏木霉转化子总RNA的提取第53页
     ·瑞氏木霉转化子的RT-PCR验证第53页
     ·瑞氏木霉转化子的Real Time RT-PCR验证第53页
   ·结果与讨论第53-59页
     ·pGG的构建第53-56页
     ·瑞氏木霉转化子的PCR验证第56-57页
     ·瑞氏木霉转化子的RT-PCR验证第57页
     ·瑞氏木霉转化子的Real Time RT-PCR验证第57-59页
   ·本章小结第59-60页
全文总结第60-62页
参考文献第62-66页
致谢第66页

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