目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-10页 |
ABSTRACT | 第10-14页 |
第一章 绪论 | 第14-30页 |
·丝状真菌瑞氏木霉(Trichoderma reesei)简介 | 第14-15页 |
·丝状真菌转化系统 | 第15-18页 |
·丝状真菌转化方法 | 第15-16页 |
·丝状真菌转化标记 | 第16-17页 |
·转化DNA的整合 | 第17-18页 |
·糖基化修饰途径研究进展 | 第18-28页 |
·蛋白质糖基化 | 第18-20页 |
·糖基化工程 | 第20-23页 |
·糖基转移酶 | 第23-26页 |
·糖链解析 | 第26-28页 |
·本文主要研究内容 | 第28-30页 |
第二章 对T.reesei alg3基因的敲除和外源ST6GalI基因的表达 | 第30-50页 |
·材料和方法 | 第30-36页 |
·菌株和质粒 | 第30-31页 |
·培养基和试剂 | 第31页 |
·普通分子生物学实验方法 | 第31页 |
·重组质粒pS△M的构建 | 第31-32页 |
·瑞氏木霉的转化方法 | 第32-33页 |
·瑞氏木霉染色体DNA的提取与纯化 | 第33-34页 |
·瑞氏木霉转化子的PCR验证 | 第34-35页 |
·瑞氏木霉转化子RNA的提取 | 第35-36页 |
·瑞氏木霉转化子的RT-PCR验证 | 第36页 |
·瑞氏木霉转化子的Real Time RT-PCR验证 | 第36页 |
·结果与讨论 | 第36-48页 |
·pS△M的构建 | 第36-40页 |
·pS△M对T.reesei M23的转化 | 第40-41页 |
·瑞氏木霉转化子的PCR筛选和分离纯化 | 第41-42页 |
·瑞氏木霉转化子324、875、924和Z43的分子生物学分析 | 第42-46页 |
·瑞士木霉转化子b-8-1的分子生物学分析 | 第46-48页 |
·本章小结 | 第48-50页 |
第三章 外源GnTI和GalT基因在T.reesei中的表达 | 第50-60页 |
·材料和方法 | 第50-53页 |
·菌株和质粒 | 第50页 |
·培养基和试剂 | 第50-51页 |
·普通分子生物学实验方法 | 第51页 |
·重组质粒pGG的构建 | 第51页 |
·瑞氏木霉的转化方法 | 第51-52页 |
·瑞氏木霉染色体DNA的提取与纯化 | 第52页 |
·瑞氏木霉转化子的PCR验证 | 第52-53页 |
·瑞氏木霉转化子总RNA的提取 | 第53页 |
·瑞氏木霉转化子的RT-PCR验证 | 第53页 |
·瑞氏木霉转化子的Real Time RT-PCR验证 | 第53页 |
·结果与讨论 | 第53-59页 |
·pGG的构建 | 第53-56页 |
·瑞氏木霉转化子的PCR验证 | 第56-57页 |
·瑞氏木霉转化子的RT-PCR验证 | 第57页 |
·瑞氏木霉转化子的Real Time RT-PCR验证 | 第57-59页 |
·本章小结 | 第59-60页 |
全文总结 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
致谢 | 第66页 |