| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-26页 |
| ·节杆菌背景介绍 | 第11-13页 |
| ·节杆菌简介 | 第11页 |
| ·节杆菌研究意义 | 第11-13页 |
| ·电转化概述 | 第13-16页 |
| ·电转化特征 | 第13-14页 |
| ·电转化原理 | 第14页 |
| ·影响电转化效率的因素 | 第14-16页 |
| ·节杆菌遗传转化体系研究进展 | 第16-18页 |
| ·节杆菌中的质粒载体 | 第16-17页 |
| ·节杆菌电转化方法研究进展 | 第17-18页 |
| ·海藻糖概述 | 第18-24页 |
| ·海藻糖及其分布 | 第18页 |
| ·海藻糖生物学功能 | 第18-20页 |
| ·海藻糖合成途径 | 第20-22页 |
| ·海藻糖合成途径的代谢调控 | 第22-23页 |
| ·6-磷酸海藻糖酯酶研究概述 | 第23-24页 |
| ·本论文研究目的与意义 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-34页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·菌种和质粒 | 第26-27页 |
| ·扩增引物 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-34页 |
| ·节杆菌电转化方法 | 第28-29页 |
| ·Arthrobacter sp.A3 tpp基因的克隆和序列分析 | 第29-30页 |
| ·Arthrobacter sp.A3 tpp基因在大肠杆菌中的表达 | 第30-31页 |
| ·重组TPP的分离纯化 | 第31-32页 |
| ·重组TPP酶学性质测定 | 第32-33页 |
| ·细胞生存率测定 | 第33-34页 |
| 第三章 结果 | 第34-65页 |
| ·节杆菌电转化方法的优化 | 第34-48页 |
| ·细胞壁弱化剂处理对转化效率的影响 | 第35-39页 |
| ·细胞生长条件的优化 | 第39-40页 |
| ·电击缓冲液的优化 | 第40-41页 |
| ·电击条件的优化 | 第41-42页 |
| ·DNA浓度和孵育时间的优化 | 第42-43页 |
| ·复苏培养基和复苏时间的优化 | 第43-45页 |
| ·感受态细胞存储对转化效率的影响 | 第45-46页 |
| ·其他因素对电转化效率的影响 | 第46-47页 |
| ·优化方法在其他节杆菌中的应用 | 第47页 |
| ·转化子的验证 | 第47-48页 |
| ·Arthrobacter sp.A3 tpp基因的克隆和生物信息学分析 | 第48-56页 |
| ·Arthrobacter sp.A3 tpp基因的克隆 | 第48-49页 |
| ·Arthrobacter sp.A3 tpp基因生物信息学分析 | 第49-56页 |
| ·Arthrobacter sp.A3 TPP的表达与纯化 | 第56-57页 |
| ·重组TPP酶学性质测定 | 第57-63页 |
| ·磷酸钠标准曲线 | 第57页 |
| ·重组TPP最适pH分析 | 第57-58页 |
| ·重组TPP最适温度和热稳定性的分析 | 第58-59页 |
| ·金属离子对重组TPP活性的影响 | 第59-60页 |
| ·Arthrobacter sp.A3重组TPP与已验证功能的TPP比较 | 第60-61页 |
| ·重组TPP动力学特性分析 | 第61-63页 |
| ·过表达tpp对Arthrobacter sp.A3低温生存率的影响 | 第63-65页 |
| 第四章 讨论 | 第65-69页 |
| ·节杆菌电转化方法的优化 | 第65-67页 |
| ·节杆菌6-磷酸海藻糖酯酶基因的功能研究 | 第67-69页 |
| 第五章 结论与展望 | 第69-71页 |
| ·结论 | 第69-70页 |
| ·未来研究工作展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-81页 |
| 缩写词 | 第81-82页 |
| 在学期间的研究成果 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
