摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-25页 |
·我国结核病现状 | 第11-12页 |
·DNA螺旋酶在结核病防治中的重要作用 | 第12页 |
·DNA拓扑异构酶研究进展 | 第12-18页 |
·DNA拓扑异构酶的分类 | 第13-14页 |
·DNA拓扑异构酶的功能 | 第14-15页 |
·DNA螺旋酶的功能结构域 | 第15-17页 |
·DNA螺旋酶的作用机理 | 第17-18页 |
·蛋白质相互作用研究进展 | 第18-25页 |
·酵母双杂交 | 第19-20页 |
·免疫共沉淀 | 第20-21页 |
·噬菌体展示 | 第21-22页 |
·Pull down | 第22页 |
·表面等离子共振 | 第22-23页 |
·荧光共振能量转移 | 第23-24页 |
·石英晶体微天平 | 第24-25页 |
2 研究目的与意义 | 第25-26页 |
3 材料与方法 | 第26-39页 |
·材料 | 第26-27页 |
·培养基 | 第26页 |
·质粒与菌株 | 第26-27页 |
·各种分子生物学酶、试剂盒及常用试剂 | 第27页 |
·方法 | 第27-39页 |
·结核分枝杆菌螺旋酶基因及其片段的PCR扩增与鉴定 | 第27-32页 |
·gyrA基因和gyrB基因片段PCR产物的回收纯化与克隆 | 第32-35页 |
·酵母双杂交试验 | 第35-37页 |
·蛋白质表达 | 第37-39页 |
4 结果与分析 | 第39-58页 |
·GYRA基因GYRB基因及其片段克隆到酵母载体 | 第39-45页 |
·靶基因GYRA和GYRB在酵母菌中自激活报告基因的检测 | 第45-46页 |
·螺旋酶B亚基C端系列缺失突变体与A亚基的相互作用 | 第46-48页 |
·螺旋酶B亚基N端系列缺失突变体与A亚基的相互作用 | 第48-49页 |
·螺旋酶B亚基TOPRIM域缺失突变体与A亚基的相互作用 | 第49-51页 |
·螺旋酶B亚基及其突变体与A亚基的蛋白表达和纯化 | 第51-58页 |
·表达载体的构建 | 第51-54页 |
·蛋白质的表达与纯化 | 第54-58页 |
5 讨论 | 第58-59页 |
6 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
致谢 | 第67页 |