| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1 动物防御素的研究进展 | 第11-16页 |
| ·动物防御素的分布及表达 | 第11-12页 |
| ·动物防御素的分子结构 | 第12-13页 |
| ·动物防御素的抗菌活性及影响因素 | 第13-14页 |
| ·动物防御素的抗菌机理 | 第14页 |
| ·动物防御素的抗病毒活性 | 第14-15页 |
| ·动物防御素的细胞毒性作用 | 第15页 |
| ·防御素类抗菌肽在畜牧生产中的应用 | 第15-16页 |
| 2 猪β-防御素的研究概况 | 第16-19页 |
| ·猪β-防御素的结构 | 第16-18页 |
| ·猪β-防御素的分布及表达 | 第18页 |
| ·猪β-防御素抑制细菌和病毒的活性 | 第18-19页 |
| 3 研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 猪β-防御素-2的重组表达及体外抑菌和抗病毒试验研究 | 第20-47页 |
| 1 材料与方法 | 第20-33页 |
| ·材料 | 第20-24页 |
| ·质粒和菌株 | 第20页 |
| ·病毒和细胞 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| ·主要试剂及配制 | 第21-23页 |
| ·主要应用的软件 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-33页 |
| ·猪pBD-2基因片段的设计 | 第24-25页 |
| ·猪pBD-2基因PCR扩增 | 第25页 |
| ·大肠杆菌DH5α或BL21(DE3)感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第25-26页 |
| ·pBD-2/pGEX-KG重组表达质粒的构建、转化 | 第26-27页 |
| ·pBD-2/DGEX-KG重组表达质粒的鉴定 | 第27页 |
| ·重组子pBD-2/pGEX-KG的诱导表达 | 第27-28页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第28-29页 |
| ·表达产物的提取以及融合蛋白的纯化 | 第29-30页 |
| ·蛋白的浓度测定 | 第30页 |
| ·融合蛋白的酶切 | 第30页 |
| ·酶切后蛋白的凝胶过滤层析 | 第30-31页 |
| ·pBD-2对猪红细胞的溶血活性 | 第31页 |
| ·pBD-2的抑菌活性检测 | 第31-32页 |
| ·pBD-2的抗病毒活性 | 第32-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-42页 |
| ·pBD-2的PCR扩增 | 第33页 |
| ·pBD-2PCR扩增产物的双酶切 | 第33页 |
| ·pGEX-KG载体的双酶切 | 第33-34页 |
| ·pBD-2/DGEX-KG重组表达质粒的鉴定 | 第34-36页 |
| ·pBD-2/DGEX-KG重组表达质粒的PCR鉴定 | 第34页 |
| ·pBD-2/DGEX-KG重组表达质粒的双酶切鉴定 | 第34-35页 |
| ·pBD-2/DGEX-KG重组表达质粒的测序鉴定 | 第35-36页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第36-37页 |
| ·表达产物的纯化和融合蛋白的酶切 | 第37-39页 |
| ·融合蛋白的SDS-PAGE分析 | 第38-39页 |
| ·融合蛋白酶切后的SDS-PAGE分析 | 第39页 |
| ·酶切后蛋白的凝胶过滤层析 | 第39-40页 |
| ·pBD-2对猪红细胞的溶血活性 | 第40页 |
| ·pBD-2的抑菌活性检测 | 第40-41页 |
| ·pBD-2的抗病毒活性检测 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-46页 |
| ·猪β-防御素的重组表达 | 第42-43页 |
| ·基因片段的合成 | 第43页 |
| ·表达系统的选择 | 第43-44页 |
| ·pBD-2对猪红细胞的溶血活性 | 第44页 |
| ·pBD-2的抑菌和抗病毒活性 | 第44-46页 |
| 4 结论 | 第46页 |
| 5 本试验的创新点与不足 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
