中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
引言 | 第12-39页 |
1 影响猪脂肪沉积的基因 | 第12-33页 |
·甘油三酯转移酶(DGAT)基因 | 第12-20页 |
·DGAT 基因的类型及蛋白特性 | 第13-14页 |
·DGAT 基因的定位及结构 | 第14-15页 |
·DGAT 基因的生物学功能 | 第15-18页 |
·DGAT 基因多态性的研究进展 | 第18-20页 |
·瘦素(leptin)基因 | 第20-25页 |
·leptin 及其载体的发现 | 第20-21页 |
·leptin 基因在能量代谢及脂肪细胞中的功能 | 第21-22页 |
·leptin 基因的激素功能 | 第22-24页 |
·leptin 对周围组织器官的作用 | 第24页 |
·leptin 基因多态性的研究进展 | 第24-25页 |
·苹果酸酶1(ME1)基因 | 第25-30页 |
·ME 的类型和相关蛋白特性 | 第25-26页 |
·ME1 基因的结构及定位 | 第26-27页 |
·ME1 基因的表达调控 | 第27-29页 |
·ME1 基因与相关性状研究 | 第29-30页 |
·脂肪酸结合蛋白(FABP)基因的研究概况 | 第30-31页 |
·黑素皮质素及其受体(MCRs)的研究概况 | 第31-33页 |
·脂蛋白酶(LPL)基因简介 | 第33页 |
2 基因表达检测技术 | 第33-39页 |
·荧光定量PCR 技术 | 第33-35页 |
·荧光定量PCR 技术的原理 | 第33-34页 |
·荧光探针和荧光染料 | 第34-35页 |
·定量方法 | 第35页 |
·Northern 杂交 | 第35-36页 |
·酶联免疫法(Enzyme—Linked Immunosorbent Assay, ELISA) | 第36-38页 |
·ELISA 的基本原理 | 第36页 |
·ELISA 的方法 | 第36-38页 |
·Western 杂交 | 第38-39页 |
·Western 杂交原理 | 第38页 |
·Western 杂交的检测方法 | 第38-39页 |
研究目的及意义 | 第39-40页 |
材料与方法 | 第40-47页 |
1 试验材料 | 第40-41页 |
·试验动物和样品采集 | 第40页 |
·主要仪器 | 第40-41页 |
·酶和试剂 | 第41页 |
·主要数据库及生物软件 | 第41页 |
2 试验方法 | 第41-47页 |
·常用试剂的配制 | 第41-42页 |
·背膘厚测定 | 第42-43页 |
·猪耳组织基因组DNA 的提取 | 第43页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第43-44页 |
·猪脂肪组织总RNA 的提取 | 第44-45页 |
·反转录获得cDNA | 第45页 |
·荧光定量PCR | 第45页 |
·统计分析 | 第45-46页 |
·转录因子结合位点分析 | 第46-47页 |
研究内容 | 第47-71页 |
1 不同猪种DGAT1 基因启动子区-241 位点的多态性及其与猪背膘厚和mRNA 表达水平的关系 | 第47-54页 |
·试验方法 | 第47-48页 |
·PCR 扩增及DGAT1 基因-241 位点的多态性检测 | 第47页 |
·荧光定量PCR 检测DGAT1 mRNA 的表达 | 第47-48页 |
·结果 | 第48-52页 |
·核酸提取结果 | 第48页 |
·PCR 扩增及基因型分析结果 | 第48-49页 |
·不同猪种 DGAT1 基因-241 位点的多态性分析 | 第49-50页 |
·DGAT1 基因-241 位点多态性与背膘厚的关联分析 | 第50-51页 |
·DGAT1 基因-241 位点多态性与猪背膘组织中 mRNA 表达量的关系 | 第51页 |
·DGAT1 基因-241 位点附近序列特征分析结果 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
·DGAT1 基因多态性与生产性状关系的研究 | 第52页 |
·DGAT1 基因-241 位点基因及基因型频率的分布特征及其对背膘厚的影响 | 第52-53页 |
·DGAT1 基因-241 位点多态的生物信息学预测分析 | 第53-54页 |
2 猪背膘组织中DGAT1 与DGAT2 基因的发育性表达分析 | 第54-60页 |
·荧光定量PCR 用到的引物 | 第54页 |
·结果 | 第54-58页 |
·DGAT1 基因在猪背膘组织中的发育性表达变化 | 第54页 |
·DGAT2 基因在猪背膘组织中的发育性表达变化 | 第54-55页 |
·DGAT1 和DGAT2 基因发育性表达变化的对比 | 第55-58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
3 猪瘦素基因(leptin)5′调控区 G-2825A 位点的多态 性检测及其与背膘厚和表达水平的关系 | 第60-67页 |
·试验方法 | 第60页 |
·PCR 扩增和leptin 基因G-2825A 位点的多态性检测 | 第60页 |
·荧光定量PCR 检测leptin 基因表达的引物 | 第60页 |
·ELISA 测定血清中leptin 蛋白含量 | 第60页 |
·结果 | 第60-64页 |
·PCR 扩增与基因型分析结果 | 第60-61页 |
·不同猪种leptin 基因G-2825A 位点的多态性分析 | 第61-62页 |
·leptin 基因G-2825A 位点多态性与背膘厚的关联分析 | 第62-63页 |
·leptin 基因G-2825A 位点多态性与猪背膘组织中mRNA 表达量的关系 | 第63页 |
·leptin 基因G-2825A 位点不同基因型与血清中leptin 蛋白表达量的关系 | 第63-64页 |
·讨论 | 第64-67页 |
·G-2825A 位点所在区域序列分析 | 第64页 |
·leptin 基因多态性与生产性状关系的研究 | 第64-67页 |
4 ME1 基因A-1068G 位点多态性及其与mRNA 表达水平的关系 | 第67-71页 |
·试验引物 | 第67页 |
·结果 | 第67-68页 |
·PCR 扩增及ME1 基因A-1068G 位点基因型分析结果 | 第67-68页 |
·ME1 基因A-1068G 位点多态性与背膘组织中mRNA 表达量的关系 | 第68页 |
·讨论 | 第68-71页 |
·ME1 5′调控区的序列分析 | 第68-69页 |
·猪ME1 多态位点与生产性状的关系 | 第69-71页 |
结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-84页 |
致谢 | 第84页 |