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四个脂肪沉积相关基因的多态性、表达特征及其与猪背膘厚的关系

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
引言第12-39页
 1 影响猪脂肪沉积的基因第12-33页
   ·甘油三酯转移酶(DGAT)基因第12-20页
     ·DGAT 基因的类型及蛋白特性第13-14页
     ·DGAT 基因的定位及结构第14-15页
     ·DGAT 基因的生物学功能第15-18页
     ·DGAT 基因多态性的研究进展第18-20页
   ·瘦素(leptin)基因第20-25页
     ·leptin 及其载体的发现第20-21页
     ·leptin 基因在能量代谢及脂肪细胞中的功能第21-22页
     ·leptin 基因的激素功能第22-24页
     ·leptin 对周围组织器官的作用第24页
     ·leptin 基因多态性的研究进展第24-25页
   ·苹果酸酶1(ME1)基因第25-30页
     ·ME 的类型和相关蛋白特性第25-26页
     ·ME1 基因的结构及定位第26-27页
     ·ME1 基因的表达调控第27-29页
     ·ME1 基因与相关性状研究第29-30页
   ·脂肪酸结合蛋白(FABP)基因的研究概况第30-31页
   ·黑素皮质素及其受体(MCRs)的研究概况第31-33页
   ·脂蛋白酶(LPL)基因简介第33页
 2 基因表达检测技术第33-39页
   ·荧光定量PCR 技术第33-35页
     ·荧光定量PCR 技术的原理第33-34页
     ·荧光探针和荧光染料第34-35页
     ·定量方法第35页
   ·Northern 杂交第35-36页
   ·酶联免疫法(Enzyme—Linked Immunosorbent Assay, ELISA)第36-38页
     ·ELISA 的基本原理第36页
     ·ELISA 的方法第36-38页
   ·Western 杂交第38-39页
     ·Western 杂交原理第38页
     ·Western 杂交的检测方法第38-39页
研究目的及意义第39-40页
材料与方法第40-47页
 1 试验材料第40-41页
   ·试验动物和样品采集第40页
   ·主要仪器第40-41页
   ·酶和试剂第41页
   ·主要数据库及生物软件第41页
 2 试验方法第41-47页
   ·常用试剂的配制第41-42页
   ·背膘厚测定第42-43页
   ·猪耳组织基因组DNA 的提取第43页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第43-44页
   ·猪脂肪组织总RNA 的提取第44-45页
   ·反转录获得cDNA第45页
   ·荧光定量PCR第45页
   ·统计分析第45-46页
   ·转录因子结合位点分析第46-47页
研究内容第47-71页
 1 不同猪种DGAT1 基因启动子区-241 位点的多态性及其与猪背膘厚和mRNA 表达水平的关系第47-54页
   ·试验方法第47-48页
     ·PCR 扩增及DGAT1 基因-241 位点的多态性检测第47页
     ·荧光定量PCR 检测DGAT1 mRNA 的表达第47-48页
   ·结果第48-52页
     ·核酸提取结果第48页
     ·PCR 扩增及基因型分析结果第48-49页
     ·不同猪种 DGAT1 基因-241 位点的多态性分析第49-50页
     ·DGAT1 基因-241 位点多态性与背膘厚的关联分析第50-51页
     ·DGAT1 基因-241 位点多态性与猪背膘组织中 mRNA 表达量的关系第51页
     ·DGAT1 基因-241 位点附近序列特征分析结果第51-52页
   ·讨论第52-54页
     ·DGAT1 基因多态性与生产性状关系的研究第52页
     ·DGAT1 基因-241 位点基因及基因型频率的分布特征及其对背膘厚的影响第52-53页
     ·DGAT1 基因-241 位点多态的生物信息学预测分析第53-54页
 2 猪背膘组织中DGAT1 与DGAT2 基因的发育性表达分析第54-60页
   ·荧光定量PCR 用到的引物第54页
   ·结果第54-58页
     ·DGAT1 基因在猪背膘组织中的发育性表达变化第54页
     ·DGAT2 基因在猪背膘组织中的发育性表达变化第54-55页
     ·DGAT1 和DGAT2 基因发育性表达变化的对比第55-58页
   ·讨论第58-60页
 3 猪瘦素基因(leptin)5′调控区 G-2825A 位点的多态 性检测及其与背膘厚和表达水平的关系第60-67页
   ·试验方法第60页
     ·PCR 扩增和leptin 基因G-2825A 位点的多态性检测第60页
     ·荧光定量PCR 检测leptin 基因表达的引物第60页
     ·ELISA 测定血清中leptin 蛋白含量第60页
   ·结果第60-64页
     ·PCR 扩增与基因型分析结果第60-61页
     ·不同猪种leptin 基因G-2825A 位点的多态性分析第61-62页
     ·leptin 基因G-2825A 位点多态性与背膘厚的关联分析第62-63页
     ·leptin 基因G-2825A 位点多态性与猪背膘组织中mRNA 表达量的关系第63页
     ·leptin 基因G-2825A 位点不同基因型与血清中leptin 蛋白表达量的关系第63-64页
   ·讨论第64-67页
     ·G-2825A 位点所在区域序列分析第64页
     ·leptin 基因多态性与生产性状关系的研究第64-67页
 4 ME1 基因A-1068G 位点多态性及其与mRNA 表达水平的关系第67-71页
   ·试验引物第67页
   ·结果第67-68页
     ·PCR 扩增及ME1 基因A-1068G 位点基因型分析结果第67-68页
     ·ME1 基因A-1068G 位点多态性与背膘组织中mRNA 表达量的关系第68页
   ·讨论第68-71页
     ·ME1 5′调控区的序列分析第68-69页
     ·猪ME1 多态位点与生产性状的关系第69-71页
结论第71-72页
参考文献第72-84页
致谢第84页

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