| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-19页 |
| ·细粒棘球蚴病的研究进展 | 第13-17页 |
| ·前言 | 第13页 |
| ·细粒棘球蚴的病原学分析 | 第13-14页 |
| ·细粒棘球蚴病的预防和控制 | 第14-15页 |
| ·EG95重组抗原的研究进展 | 第15-17页 |
| ·C3d分子免疫佐剂的研究 | 第17-18页 |
| ·前言 | 第17页 |
| ·C3d的作用原理 | 第17页 |
| ·C3d的研究进展 | 第17-18页 |
| ·研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 羊C3d基因与细粒棘球蚴EG95s基因在杆状病毒中的串联表达 | 第19-38页 |
| ·前言 | 第19页 |
| ·实验材料 | 第19-24页 |
| ·菌株和载体 | 第19页 |
| ·细胞及培养用试剂 | 第19-20页 |
| ·分子生物学试剂 | 第20页 |
| ·免疫学试剂 | 第20页 |
| ·主要化学试剂 | 第20页 |
| ·溶液及其配制方法 | 第20-24页 |
| ·方法 | 第24-31页 |
| ·EG95-(C3d)_3原核表达质粒的构建 | 第24-27页 |
| ·重组转移载体的构建及鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组转移载体的转座及重组转座子的提取与鉴定 | 第28-30页 |
| ·转染 | 第30页 |
| ·重组杆状病毒的表达及鉴定 | 第30-31页 |
| ·实验结果 | 第31-36页 |
| ·原核表达质粒的构建 | 第31-32页 |
| ·重组转移载体的构建及鉴定 | 第32-34页 |
| ·重组杆状病毒的表达及鉴定 | 第34-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 细粒棘球蚴EG95s基因的单克隆抗体制备及鉴定 | 第38-49页 |
| ·前言 | 第38页 |
| ·材料 | 第38-40页 |
| ·菌株、细胞及实验动物 | 第38页 |
| ·纯化重组蛋白的相关试剂 | 第38页 |
| ·细胞培养用溶液及其配制 | 第38-39页 |
| ·MAbs制备相关试剂及其配制 | 第39页 |
| ·酶联免疫吸附实验(ELISA)使用试剂及其配制 | 第39-40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-44页 |
| ·重组EG95蛋白的表达与纯化 | 第40-41页 |
| ·动物免疫 | 第41页 |
| ·间接ELISA筛选方法的建立 | 第41-42页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第42-43页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第43页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存及复苏 | 第43页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44-48页 |
| ·重组Eg95s蛋白的表达与纯化 | 第44-45页 |
| ·阴阳性临界值(即cutoff值)的确定 | 第45页 |
| ·细胞融合与筛选 | 第45-46页 |
| ·杂交瘤细胞培养上清液及腹水效价的测定 | 第46页 |
| ·MAbs的亚类鉴定 | 第46页 |
| ·Western-blot检测 | 第46-47页 |
| ·相加指数法测定单抗识别表位 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 细粒棘球蚴基因的原核与真核表达产物的比较 | 第49-54页 |
| ·前言 | 第49页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·菌株及细胞 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49-50页 |
| ·方法 | 第50页 |
| ·pET-EG95-(C3d)_3原核表达重组蛋白表达 | 第50页 |
| ·EG95 MAbs对pET-EG95-(C3d)_3进行Western-blot检测 | 第50页 |
| ·EG95 MAbs对杆状病毒表达的EG95-(C3d)_3重组蛋白进行免疫荧光检测 | 第50页 |
| ·实验结果 | 第50-53页 |
| ·pET-EG95-(C3d)_3重组蛋白表达 | 第50-51页 |
| ·EG95单克隆抗体对pET-EG95-(C3d)_3重组蛋白Western-blot检测 | 第51-52页 |
| ·EG95单克隆抗体对Bacmid-EG95-(C3d)_3重组蛋白间接免疫荧光检测 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| 第五章 全文结论 | 第54-56页 |
| ·EG95-(C3d)_3基因在杆状病毒中的串联表达 | 第54页 |
| ·细粒棘球蚴EG95s基因的单克隆抗体制备 | 第54页 |
| ·细粒棘球蚴基因的原核与真核表达产物的比较 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简历 | 第62页 |
