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赭曲霉毒素A对PCV2的复制促进及硒的阻断作用与机制研究

摘要第9-12页
ABSTRACT第12-15页
符号与缩略语第16-17页
前言第17-18页
第一篇 文献综述第18-56页
    第一章 赭曲霉毒素A的研究概述第18-32页
        1. 赭曲霉毒素A的简介第18-20页
            1.1 OTA的理化性质第18页
            1.2 赭曲霉毒素A的产生与合成第18-19页
            1.3 赭曲霉毒素A在动物体内的代谢第19-20页
        2. 赭曲霉毒素A的污染情况第20-21页
            2.1 谷物及相关产品第20-21页
            2.2 动物性食品第21页
            2.3 其他植物性食品及相关产品第21页
        3. 赭曲霉毒素A的毒性第21-23页
            3.1 OTA的肾毒性第21-22页
            3.2 OTA的肝毒性第22页
            3.3 OTA的免疫毒性第22-23页
            3.4 OTA的致癌致畸致突变作用第23页
        4. 赭曲霉毒素A的致毒机理第23-24页
            4.1 引起氧化损伤第23页
            4.2 诱导细胞凋亡的发生第23-24页
            4.3 对细胞信号转导的影响第24页
            4.4 与其他物质的共同作用第24页
        5. 赭曲霉毒素A的脱毒方法第24-26页
        参考文献第26-32页
    第二章 猪圆环病毒2型的研究概述第32-44页
        1. 猪圆环病毒2型的生物学特性第32页
        2. 猪圆环病毒2型的流行病学第32-34页
            2.1 传染源第33页
            2.2 易感动物第33页
            2.3 传播途径第33页
            2.4 发病率和死亡率第33页
            2.5 流行分析第33-34页
        3. 猪圆环病毒病的临床表现第34-35页
            3.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)第34页
            3.2 猪皮炎肾病综合征(PDNS)第34页
            3.3 PCV2相关性肠炎第34-35页
            3.4 PCV2相关性肺炎第35页
            3.5 PCV2相关性繁殖障碍第35页
            3.6 PCV2相关性神经病变第35页
        4. 猪圆环病毒病的诊断第35-36页
        5. 猪圆环病毒病的防治第36-38页
            5.1 免疫接种第36页
            5.2 加强饲养管理第36-37页
            5.3 控制混合感染第37页
            5.4 注意猪群营养结构第37页
            5.5 引种检疫第37页
            5.6 疫病监测第37-38页
        参考文献第38-44页
    第三章 硒对毒素和病毒的影响研究概述第44-56页
        1. 硒的理化性质及其在自然界中的分布第44-45页
            1.1 硒的理化性质第44页
            1.2 硒在自然界中的分布第44-45页
        2. 硒在动物体内的分布及代谢第45-46页
            2.1 硒在动物体内的分布第45页
            2.2 硒在动物体内的代谢第45-46页
        3. 硒的生物学功能及硒蛋白第46-47页
        4. 硒与毒素的关系第47-48页
        5. 硒与病毒的关系第48页
        6. 硒与机体免疫的关系第48-49页
        7. 硒及其产品在猪生产中的应用第49-51页
            7.1 亚硒酸钠在猪生产上的应用第49页
            7.2 富硒益生菌在猪生产上的应用第49-51页
        参考文献第51-56页
第二篇 试验研究第56-132页
    第四章 赭曲霉毒素A对PCV2复制的作用研究第56-72页
        1. 材料与方法第57-60页
            1.1 体外试验第57-58页
            1.2 体内试验第58-60页
        2. 试验结果第60-67页
            2.1 体外试验结果第60-62页
            2.2 体内试验结果第62-67页
        3. 讨论第67-69页
        参考文献第69-72页
    第五章 赭曲霉毒素A对PCV2复制作用的机制研究第72-92页
        1. 材料与方法第73-77页
            1.1 仪器与试剂第73页
            1.2 细胞培养和病毒扩增第73页
            1.3 细胞毒性测定第73页
            1.4 绝对荧光定量PCR测定PCV2 DNA拷贝数第73-74页
            1.5 间接免疫荧光测定PCV2阳性感染细胞数第74页
            1.6 相对荧光定量PCR测定基因mRNA水平第74-75页
            1.7 还原型谷胱甘肽和丙二醛的测定第75页
            1.8 流式细胞术测定活性氧和氧化物水平第75页
            1.9 Western blot测定蛋白水平第75-77页
            1.10 RNA干扰第77页
            1.11 统计分析第77页
        2. 试验结果第77-86页
            2.1 OTA处理可引起PK15细胞氧化应激第77-79页
            2.2 OTA处理可引起PK15细胞p38和ERK1/2磷酸化第79-80页
            2.3 NAC可阻断OTA对PCV2复制的促进作用第80-82页
            2.4 ERK和p38抑制剂可阻断OTA对PCV2复制的促进作用第82-84页
            2.5 ERK和p38特异性siRNA可阻断OTA对PCV2复制的促进作用第84-86页
        3. 讨论第86-88页
        参考文献第88-92页
    第六章 硒阻断OTA促进PCV2复制的作用与机制研究第92-108页
        1. 材料与方法第93-98页
            1.1 细胞培养和病毒感染第93页
            1.2 高表达SelS PK15细胞系的构建第93页
            1.3 低表达SelS PK15细胞系的构建第93-94页
            1.4 细胞活力测定第94页
            1.5 绝对荧光定量PCR测定PCV2 DNA拷贝数第94页
            1.6 间接免疫荧光测定PCV2阳性感染细胞数第94-95页
            1.7 相对荧光定量PCR测定相关基因mRNA水平第95页
            1.8 还原型谷胱甘肽和丙二醛的测定第95页
            1.9 流式细胞术测定活性氧水平第95页
            1.10 Western blot测定蛋白水平第95-97页
            1.11 统计分析第97-98页
        2. 试验结果第98-104页
            2.1 硒阻断OTA对PCV2复制的促进作用第98页
            2.2 SelS在高表达SelS和低表达SelS PK15细胞株的表达第98-100页
            2.3 不同PK15细胞株的活力第100页
            2.4 硒蛋白S可调节OTA对PCV2复制的促进作用第100-101页
            2.5 硒蛋白S可调节细胞氧化还原状态第101-103页
            2.6 硒蛋白S调节p38磷酸化水平第103-104页
        3. 讨论第104-105页
        参考文献第105-108页
    第七章 硒对OTA引起的肾毒性的作用与机制研究第108-132页
        1. 材料与方法第109-114页
            1.1 细胞培养第109页
            1.2 MTT法测定细胞毒性第109页
            1.3 乳酸脱氢酶的测定第109页
            1.4 Caspase-3的测定第109-110页
            1.5 磷脂结合蛋白的测定第110页
            1.6 活性氧的测定第110页
            1.7 还原型谷胱甘肽的测定第110页
            1.8 谷胱甘肽过氧化物酶1活性的测定第110-111页
            1.9 荧光定量PCR测定硒蛋白mRNA水平第111页
            1.10 western blot测定硒蛋白GPx1水平第111-113页
            1.11 RNA干扰第113页
            1.12 统计分析第113-114页
        2. 试验结果第114-123页
            2.1 不同浓度的赭曲霉毒素A和硒对PK15细胞的毒性作用第114-115页
            2.2 不同浓度的硒对OTA引起的PK15细胞毒性的保护作用第115页
            2.3 不同浓度的硒对OTA诱导的PK15细胞凋亡的保护作用第115-116页
            2.4 OTA诱导的PK15细胞毒性和凋亡与其氧化应激有关第116-118页
            2.5 不同浓度的硒对PK15细胞抗氧化能力的影响第118-120页
            2.6 不同浓度的硒对PK15细胞中硒酶表达的影响第120-121页
            2.7 GPx1干扰后对PK15细胞中GPx1表达的影响第121页
            2.8 GPx1干扰后对硒蛋氨酸保护OTA诱导的细胞毒性和凋亡的影响第121-123页
        3. 讨论第123-126页
        参考文献第126-132页
全文结论第132-134页
本文创新点第134-136页
致谢第136-138页
攻读博士学位期间取得的科研成果第138-139页

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