摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
符号与缩略语 | 第16-17页 |
前言 | 第17-18页 |
第一篇 文献综述 | 第18-56页 |
第一章 赭曲霉毒素A的研究概述 | 第18-32页 |
1. 赭曲霉毒素A的简介 | 第18-20页 |
1.1 OTA的理化性质 | 第18页 |
1.2 赭曲霉毒素A的产生与合成 | 第18-19页 |
1.3 赭曲霉毒素A在动物体内的代谢 | 第19-20页 |
2. 赭曲霉毒素A的污染情况 | 第20-21页 |
2.1 谷物及相关产品 | 第20-21页 |
2.2 动物性食品 | 第21页 |
2.3 其他植物性食品及相关产品 | 第21页 |
3. 赭曲霉毒素A的毒性 | 第21-23页 |
3.1 OTA的肾毒性 | 第21-22页 |
3.2 OTA的肝毒性 | 第22页 |
3.3 OTA的免疫毒性 | 第22-23页 |
3.4 OTA的致癌致畸致突变作用 | 第23页 |
4. 赭曲霉毒素A的致毒机理 | 第23-24页 |
4.1 引起氧化损伤 | 第23页 |
4.2 诱导细胞凋亡的发生 | 第23-24页 |
4.3 对细胞信号转导的影响 | 第24页 |
4.4 与其他物质的共同作用 | 第24页 |
5. 赭曲霉毒素A的脱毒方法 | 第24-26页 |
参考文献 | 第26-32页 |
第二章 猪圆环病毒2型的研究概述 | 第32-44页 |
1. 猪圆环病毒2型的生物学特性 | 第32页 |
2. 猪圆环病毒2型的流行病学 | 第32-34页 |
2.1 传染源 | 第33页 |
2.2 易感动物 | 第33页 |
2.3 传播途径 | 第33页 |
2.4 发病率和死亡率 | 第33页 |
2.5 流行分析 | 第33-34页 |
3. 猪圆环病毒病的临床表现 | 第34-35页 |
3.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS) | 第34页 |
3.2 猪皮炎肾病综合征(PDNS) | 第34页 |
3.3 PCV2相关性肠炎 | 第34-35页 |
3.4 PCV2相关性肺炎 | 第35页 |
3.5 PCV2相关性繁殖障碍 | 第35页 |
3.6 PCV2相关性神经病变 | 第35页 |
4. 猪圆环病毒病的诊断 | 第35-36页 |
5. 猪圆环病毒病的防治 | 第36-38页 |
5.1 免疫接种 | 第36页 |
5.2 加强饲养管理 | 第36-37页 |
5.3 控制混合感染 | 第37页 |
5.4 注意猪群营养结构 | 第37页 |
5.5 引种检疫 | 第37页 |
5.6 疫病监测 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-44页 |
第三章 硒对毒素和病毒的影响研究概述 | 第44-56页 |
1. 硒的理化性质及其在自然界中的分布 | 第44-45页 |
1.1 硒的理化性质 | 第44页 |
1.2 硒在自然界中的分布 | 第44-45页 |
2. 硒在动物体内的分布及代谢 | 第45-46页 |
2.1 硒在动物体内的分布 | 第45页 |
2.2 硒在动物体内的代谢 | 第45-46页 |
3. 硒的生物学功能及硒蛋白 | 第46-47页 |
4. 硒与毒素的关系 | 第47-48页 |
5. 硒与病毒的关系 | 第48页 |
6. 硒与机体免疫的关系 | 第48-49页 |
7. 硒及其产品在猪生产中的应用 | 第49-51页 |
7.1 亚硒酸钠在猪生产上的应用 | 第49页 |
7.2 富硒益生菌在猪生产上的应用 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
第二篇 试验研究 | 第56-132页 |
第四章 赭曲霉毒素A对PCV2复制的作用研究 | 第56-72页 |
1. 材料与方法 | 第57-60页 |
1.1 体外试验 | 第57-58页 |
1.2 体内试验 | 第58-60页 |
2. 试验结果 | 第60-67页 |
2.1 体外试验结果 | 第60-62页 |
2.2 体内试验结果 | 第62-67页 |
3. 讨论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-72页 |
第五章 赭曲霉毒素A对PCV2复制作用的机制研究 | 第72-92页 |
1. 材料与方法 | 第73-77页 |
1.1 仪器与试剂 | 第73页 |
1.2 细胞培养和病毒扩增 | 第73页 |
1.3 细胞毒性测定 | 第73页 |
1.4 绝对荧光定量PCR测定PCV2 DNA拷贝数 | 第73-74页 |
1.5 间接免疫荧光测定PCV2阳性感染细胞数 | 第74页 |
1.6 相对荧光定量PCR测定基因mRNA水平 | 第74-75页 |
1.7 还原型谷胱甘肽和丙二醛的测定 | 第75页 |
1.8 流式细胞术测定活性氧和氧化物水平 | 第75页 |
1.9 Western blot测定蛋白水平 | 第75-77页 |
1.10 RNA干扰 | 第77页 |
1.11 统计分析 | 第77页 |
2. 试验结果 | 第77-86页 |
2.1 OTA处理可引起PK15细胞氧化应激 | 第77-79页 |
2.2 OTA处理可引起PK15细胞p38和ERK1/2磷酸化 | 第79-80页 |
2.3 NAC可阻断OTA对PCV2复制的促进作用 | 第80-82页 |
2.4 ERK和p38抑制剂可阻断OTA对PCV2复制的促进作用 | 第82-84页 |
2.5 ERK和p38特异性siRNA可阻断OTA对PCV2复制的促进作用 | 第84-86页 |
3. 讨论 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-92页 |
第六章 硒阻断OTA促进PCV2复制的作用与机制研究 | 第92-108页 |
1. 材料与方法 | 第93-98页 |
1.1 细胞培养和病毒感染 | 第93页 |
1.2 高表达SelS PK15细胞系的构建 | 第93页 |
1.3 低表达SelS PK15细胞系的构建 | 第93-94页 |
1.4 细胞活力测定 | 第94页 |
1.5 绝对荧光定量PCR测定PCV2 DNA拷贝数 | 第94页 |
1.6 间接免疫荧光测定PCV2阳性感染细胞数 | 第94-95页 |
1.7 相对荧光定量PCR测定相关基因mRNA水平 | 第95页 |
1.8 还原型谷胱甘肽和丙二醛的测定 | 第95页 |
1.9 流式细胞术测定活性氧水平 | 第95页 |
1.10 Western blot测定蛋白水平 | 第95-97页 |
1.11 统计分析 | 第97-98页 |
2. 试验结果 | 第98-104页 |
2.1 硒阻断OTA对PCV2复制的促进作用 | 第98页 |
2.2 SelS在高表达SelS和低表达SelS PK15细胞株的表达 | 第98-100页 |
2.3 不同PK15细胞株的活力 | 第100页 |
2.4 硒蛋白S可调节OTA对PCV2复制的促进作用 | 第100-101页 |
2.5 硒蛋白S可调节细胞氧化还原状态 | 第101-103页 |
2.6 硒蛋白S调节p38磷酸化水平 | 第103-104页 |
3. 讨论 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-108页 |
第七章 硒对OTA引起的肾毒性的作用与机制研究 | 第108-132页 |
1. 材料与方法 | 第109-114页 |
1.1 细胞培养 | 第109页 |
1.2 MTT法测定细胞毒性 | 第109页 |
1.3 乳酸脱氢酶的测定 | 第109页 |
1.4 Caspase-3的测定 | 第109-110页 |
1.5 磷脂结合蛋白的测定 | 第110页 |
1.6 活性氧的测定 | 第110页 |
1.7 还原型谷胱甘肽的测定 | 第110页 |
1.8 谷胱甘肽过氧化物酶1活性的测定 | 第110-111页 |
1.9 荧光定量PCR测定硒蛋白mRNA水平 | 第111页 |
1.10 western blot测定硒蛋白GPx1水平 | 第111-113页 |
1.11 RNA干扰 | 第113页 |
1.12 统计分析 | 第113-114页 |
2. 试验结果 | 第114-123页 |
2.1 不同浓度的赭曲霉毒素A和硒对PK15细胞的毒性作用 | 第114-115页 |
2.2 不同浓度的硒对OTA引起的PK15细胞毒性的保护作用 | 第115页 |
2.3 不同浓度的硒对OTA诱导的PK15细胞凋亡的保护作用 | 第115-116页 |
2.4 OTA诱导的PK15细胞毒性和凋亡与其氧化应激有关 | 第116-118页 |
2.5 不同浓度的硒对PK15细胞抗氧化能力的影响 | 第118-120页 |
2.6 不同浓度的硒对PK15细胞中硒酶表达的影响 | 第120-121页 |
2.7 GPx1干扰后对PK15细胞中GPx1表达的影响 | 第121页 |
2.8 GPx1干扰后对硒蛋氨酸保护OTA诱导的细胞毒性和凋亡的影响 | 第121-123页 |
3. 讨论 | 第123-126页 |
参考文献 | 第126-132页 |
全文结论 | 第132-134页 |
本文创新点 | 第134-136页 |
致谢 | 第136-138页 |
攻读博士学位期间取得的科研成果 | 第138-139页 |