| 中文摘要 | 第1-16页 |
| ABSTRACT | 第16-21页 |
| 符号说明 | 第21-24页 |
| 第一章 绪论 | 第24-48页 |
| ·糖类的结构特点与生物合成 | 第25-31页 |
| ·糖类的组成 | 第25页 |
| ·N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)和N-乙酰氨基半乳糖(GalNAc) | 第25-26页 |
| ·糖类的结构多样性 | 第26页 |
| ·糖类的生物合成 | 第26-27页 |
| ·细菌表面多糖 | 第27-31页 |
| ·结构均一化寡糖的合成 | 第31-34页 |
| ·化学法合成寡糖 | 第31-33页 |
| ·酶法(化学-酶法)合成寡糖 | 第33-34页 |
| ·糖核苷酸及其合成 | 第34-40页 |
| ·糖核苷酸的种类 | 第34页 |
| ·生物体内糖核苷酸的合成 | 第34-36页 |
| ·糖核苷酸的制备 | 第36-40页 |
| ·非天然糖及化学选择性反应的应用 | 第40-42页 |
| ·糖芯片与糖阵列 | 第42-46页 |
| ·论文内容大纲 | 第46-48页 |
| 第二章 GIcNAc/GalNAc-1-P及其结构类似物的酶法合成 | 第48-70页 |
| ·引言 | 第48-50页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-58页 |
| ·长双歧杆菌N-乙酰氨基己糖1-位激酶基因(nahK)的克隆 | 第51-53页 |
| ·长双歧杆菌N-乙酰氨基己糖1-位激酶(NahK)的表达和纯化 | 第53-54页 |
| ·NahK酶活检测 | 第54-55页 |
| ·GlcNAc-1-P大量合成反应酶浓度的优化 | 第55页 |
| ·GlcNAc-1-P的大量合成 | 第55页 |
| ·GlcNAc-1-P的纯化 | 第55-56页 |
| ·NahK对GalNAc、GlcNAc/GalNAc结构类似物和ATP结构类似物的活性检测 | 第56页 |
| ·GlcNAc/GalNAc-1-P结构类似物的合成 | 第56-58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-68页 |
| ·长双歧杆菌N-乙酰氨基己糖1-位激酶基因(nahK)的克隆 | 第58页 |
| ·NahK蛋白的表达和纯化 | 第58页 |
| ·NahK酶活检测 | 第58-60页 |
| ·GIcNAc-1-P大量合成反应酶浓度的优化 | 第60页 |
| ·GIcNAc-1-P的大量合成及纯化 | 第60-62页 |
| ·NahK对GalNAc、GlcNAc/GalNAc结构类似物和ATP结构类似物的活性检测及合成反应收率 | 第62-68页 |
| ·本章小结 | 第68-70页 |
| 第三章 UDP-GlcNAc/GalNAc及其结构类似物的酶法合成 | 第70-92页 |
| ·引言 | 第70-71页 |
| ·实验材料 | 第71-72页 |
| ·实验方法 | 第72-78页 |
| ·人源UDP-GalNAc焦磷酸化酶基因(agxl)的克隆 | 第72-74页 |
| ·GlmU和AGX1的表达和纯化 | 第74页 |
| ·GlmU和AGX1酶活检测 | 第74页 |
| ·UDP-GlcNAc/GalNAc合成反应的条件优化 | 第74-75页 |
| ·UDP-GlcNAc/GalNAc的大量合成 | 第75页 |
| ·UDP-GlcNAc/GalNAc的纯化 | 第75-76页 |
| ·GlmU和AGX1对GlcNAc/GalNAc-1-P及其结构类似物的活性检测 | 第76页 |
| ·可作为GlmU和/或AGX1的底物的GlcNAc/GalNAc-1-P结构类似物对应的糖核苷酸的合成及纯化 | 第76-78页 |
| ·结果与讨论 | 第78-90页 |
| ·人源UDP-GalNAc焦磷酸化酶基因(agxl)的克隆 | 第78页 |
| ·GlmU和AGX1的表达和纯化 | 第78页 |
| ·GlmU和AGX1酶活检测 | 第78-80页 |
| ·UDP-GlcNAc/GalNAc合成反应的条件优化 | 第80页 |
| ·UDP-GlcNAc/GalNAc的大量合成及纯化 | 第80-82页 |
| ·GlmU和AGX1对GlcNAc/GalNAc-1-P结构类似物的活性检测及糖核苷酸合成反应收率 | 第82-90页 |
| ·本章小结 | 第90-92页 |
| 第四章 UDP-GlcNAc/GalNAc结构类似物在脑膜炎奈瑟氏球菌β1,3-GlcNAc转移酶性质研究中的应用 | 第92-108页 |
| ·引言 | 第92-93页 |
| ·实验材料 | 第93-94页 |
| ·实验方法 | 第94-98页 |
| ·脑膜炎奈瑟氏球菌β1,3-N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶(LgtA)的表达和纯化 | 第94页 |
| ·LgtA酶活检测 | 第94页 |
| ·自组装单分子层的制备 | 第94页 |
| ·LgtA的糖基供体底物特异性研究 | 第94-97页 |
| ·UDP(βS)-GlcNAc在LgtA转糖基反应中的性质研究 | 第97-98页 |
| ·结果与讨论 | 第98-105页 |
| ·脑膜炎奈瑟氏球菌β1,3-N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶(LgtA)的表达和纯化 | 第98页 |
| ·LgtA酶活检测 | 第98-99页 |
| ·LgtA的糖基供体底物特异性研究 | 第99-103页 |
| ·UDP(βS)-GlcNAc的性质研究 | 第103-105页 |
| ·本章小结 | 第105-108页 |
| 第五章 含非天然糖的细菌多糖的合成研究 | 第108-126页 |
| ·引言 | 第108-109页 |
| ·实验材料 | 第109-112页 |
| ·实验方法 | 第112-115页 |
| ·GlcNAc结构类似物2-ketoGlc在大肠杆菌的体内整合 | 第112页 |
| ·LPS提取与分析 | 第112页 |
| ·巴斯德氏菌透明质酸合酶可溶段基因(pmhas(t)的克隆 | 第112-113页 |
| ·PmHAS(T)的表达和纯化 | 第113页 |
| ·PmHAS(T)酶活检测 | 第113-114页 |
| ·PmHAS(T)合成HA的条件优化 | 第114页 |
| ·PmHAS(T)对UDP-GlcNAc结构类似物的活性检测 | 第114-115页 |
| ·结果与讨论 | 第115-124页 |
| ·GlcNAc结构类似物2-ketoGlc在大肠杆菌的体内整合 | 第115-118页 |
| ·LPS的标记 | 第118-119页 |
| ·巴斯德氏菌透明质酸合酶可溶段基因(pmhas(t))的克隆 | 第119页 |
| ·PmHAS(T)的表达和纯化 | 第119页 |
| ·PmHAS(T)酶活检测 | 第119-121页 |
| ·PmHAS(T)合成HA的条件优化 | 第121页 |
| ·PmHAS(T)对UDP-GlcNAc结构类似物的活性检测 | 第121-124页 |
| ·本章小结 | 第124-126页 |
| 全文总结 | 第126-128页 |
| 附录和附图 | 第128-158页 |
| Ⅰ. 本论文合成的GlcNAc/GalNAc-1-P结构类似物中的新化合物的NMR、MS鉴定 | 第129-146页 |
| Ⅱ. 本论文合成的UDP-GlcNAc/GalNAc结构类似物中的新化合物的NMR、MS鉴定 | 第146-156页 |
| Ⅲ. 人源基因UAP1(NM_003115)cDNA克隆的产品说明 | 第156-158页 |
| 参考文献 | 第158-180页 |
| 致谢 | 第180-182页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第182-184页 |
| 外文论文 | 第184-230页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第230页 |
