摘要 | 第9-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-20页 |
1.1 研究背景与科学意义 | 第12-13页 |
1.1.1 现代肉鸡育种及生产的需要 | 第12页 |
1.1.2 探索脂肪生成的相关调控机制 | 第12-13页 |
1.2 文献综述 | 第13-18页 |
1.2.1 长链非编码RNA研究进展 | 第13-15页 |
1.2.2 脂肪性状相关的lncRNA研究进展 | 第15-17页 |
1.2.3 NRON及NFAT基因研究进展 | 第17-18页 |
1.2.4 lncRNA与自噬通路 | 第18页 |
1.3 本研究的目标、内容和研究方案 | 第18-20页 |
1.3.1 研究目标 | 第18页 |
1.3.2 研究内容 | 第18页 |
1.3.3 研究方案 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-30页 |
2.1 实验材料 | 第20-22页 |
2.1.1 实验动物 | 第20页 |
2.1.2 组织样采取 | 第20页 |
2.1.3 主要药品与试剂 | 第20页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第20-21页 |
2.1.5 缓冲液与常用试剂的配制 | 第21-22页 |
2.1.6 主要分子生物学软件 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-30页 |
2.2.1 总RNA的提取 | 第22-23页 |
2.2.2 总RNA的反转录 | 第23-24页 |
2.2.3 引物设计与合成 | 第24-25页 |
2.2.4 Real-time RT-PCR | 第25页 |
2.2.5 PCR扩增 | 第25-26页 |
2.2.6 酶切反应 | 第26页 |
2.2.7 基因效应分析 | 第26-27页 |
2.2.8 鸡前脂肪细胞的分离培养及诱导分化 | 第27页 |
2.2.9 鸡前脂肪细胞系(ICP-1)的培养 | 第27-28页 |
2.2.10 油红O染色、提取比色及蛋白校正 | 第28页 |
2.2.11 蛋白免疫印迹 | 第28-29页 |
2.2.12 统计分析 | 第29-30页 |
3 结果与分析 | 第30-41页 |
3.1 鸡NRON基因多态性检测 | 第30-34页 |
3.1.1 SNP位点发现 | 第30页 |
3.1.2 多态性检测分析 | 第30-33页 |
3.1.3 连锁不平衡分析 | 第33-34页 |
3.2 鸡NRON和NFAT基因表达规律 | 第34-36页 |
3.2.1 NRON基因在肉鸡不同组织中的表达规律 | 第34页 |
3.2.2 NFAT基因在肉鸡腹部脂肪组织中的表达规律 | 第34-35页 |
3.2.3 NRON及NFAT基因在诱导分化的前脂肪细胞中表达规律 | 第35-36页 |
3.3 在诱导分化前脂肪细胞中抑制钙调磷酸酶 | 第36页 |
3.4 自噬相关基因在细胞和组织中的表达规律 | 第36-41页 |
3.4.1 ATG5和BECN1 mRNA在腹部脂肪组织中的表达规律 | 第36-37页 |
3.4.2 ATG5和BECN1蛋白在腹部脂肪组织中的表达规律 | 第37-38页 |
3.4.3 ATG5和BECN1 mRNA在诱导分化前脂肪细胞中的表达规律 | 第38-41页 |
4 讨论 | 第41-45页 |
4.1 NRON基因与肌肉生长发育 | 第41页 |
4.2 NRON及NFAT基因的转录调控 | 第41-42页 |
4.3 自噬与脂肪生成 | 第42-45页 |
4.3.1 脂肪组织和前脂肪细胞中的自噬发生 | 第42-43页 |
4.3.2 钙调磷酸酶介导的自噬发生 | 第43-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
6 展望 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-58页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58页 |