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芽变‘红早酥梨的花青苷与类黄酮合成机理解析

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 文献综述第16-27页
    1.1 类黄酮的结构与功能第16-18页
        1.1.1 类黄酮的化学结构第16-17页
        1.1.2 类黄酮的功能第17-18页
    1.2 类黄酮的合成与运输第18-20页
        1.2.1 类黄酮的合成第18-19页
        1.2.2 类黄酮的运输第19-20页
    1.3 MYB转录因子参与调控的类黄酮代谢第20-22页
        1.3.1 MYB转录因子的结构和功能第21页
        1.3.2 涉及调控植物体内类黄酮合成与转运的MYB转录因子第21-22页
        1.3.3 MYB参与形成的转录复合体及其调控的类黄酮代谢第22页
        1.3.4 MYB转录因子的结构域特征与对下游靶基因的选择性第22页
    1.4 外部环境和内部激素调控植物类黄酮代谢的分子机制第22-25页
        1.4.1 外部环境调控植物类黄酮代谢的分子机制第22-24页
        1.4.2 植物发育过程中的类黄酮代谢变化规律第24-25页
    1.5 本研究的目的与意义第25-27页
第二章 筛选梨中可能参与类黄酮调控的MYB转录因子第27-38页
    2.1 引言第27页
    2.2 材料和方法第27-29页
        2.2.1 实验材料与处理第27页
        2.2.2 类黄酮组分提取的鉴定第27-28页
        2.2.3 筛选梨基因组中的R2R3型MYB转录因子第28页
        2.2.4 MYB转录因子的同源进化分析第28页
        2.2.5 梨组织中RNA的提取第28-29页
        2.2.6 相关基因的表达分析第29页
    2.3 结果分析第29-36页
        2.3.1 可能参与梨类黄酮调控的MYB转录因子的分离第29-32页
        2.3.2 ‘早酥’梨与‘红早酥’梨果实中,类黄酮组分的合成模式与合成基因的表达模式第32-33页
        2.3.3 ‘早酥’梨与‘红早酥’梨果实中,候选MYB基因的表达模式第33-35页
        2.3.4 PbMYB10、PbMYB10b、PbMYB9和PbMYB3 的表达模式与梨果实中的类黄酮积累模式相关第35-36页
    2.4 讨论第36-38页
第三章 PbMYB10b和 PbMYB9 是梨果实中不同类黄酮代谢支路的正调控转录因子第38-44页
    3.1 引言第38页
    3.2 材料和方法第38-39页
        3.2.1 实验材料第38页
        3.2.2 基因克隆与序列分析第38-39页
        3.2.3 基于病毒介导基因沉默(virus-inducedgenesilencing:VIGS)体系的梨幼果果实上的RNA干扰(RNAi)第39页
        3.2.4 目的基因在梨幼果上的瞬时过表达第39页
        3.2.5 基因表达水平的定量检测与类黄酮组分的定量检测第39页
    3.3 结果分析第39-43页
        3.3.1 PbMYB10,PbMYB10b,PbMYB9和PbMYB3 的克隆和序列分析第39-41页
        3.3.2 PbMYB10b、PbMYB9和PbMYB3 是调节不同类黄酮代谢支路的MYB转录因子第41-43页
    3.4 讨论第43-44页
        3.4.1 PbMYB10b是原花青素代谢支路和花青苷代谢支路的正调控因子第43页
        3.4.2 PbMYB9 能够正向调控梨果实原花青素、花青苷与黄酮醇代谢支路第43页
        3.4.3 PbMYB3 可能通过调控MYB10 的表达来影响梨果实中的类黄酮代谢第43-44页
第四章 ‘红早酥’的特殊着色模式与规律鉴定第44-55页
    4.1 引言第44页
    4.2 材料和方法第44-45页
        4.2.1 实验材料第44页
        4.2.2 组织学观察第44页
        4.2.3 ‘早酥’和‘红早酥’幼果的维管束标记第44-45页
        4.2.4 花青苷的测定第45页
        4.2.5 钙离子分布荧光呈像第45页
        4.2.6 总钙离子的测定第45页
    4.3 结果分析第45-54页
        4.3.1 ‘红早酥’果皮上的红色条纹与其下方的表皮维管组织一一对应第45-47页
        4.3.2 花青苷在‘红早酥’不同部位、不同组织的积累均与维管束分布有关第47-50页
        4.3.3 花青苷在‘红早酥’幼叶与花托中的分布、以及‘红早酥’果皮条纹的形成与钙分布有关第50-54页
    4.4 讨论第54-55页
第五章 与‘红早酥’突变性状相关的基因筛选第55-67页
    5.1 引言第55页
    5.2 材料与方法第55-56页
        5.2.1 实验材料第55页
        5.2.2 RNA提取第55页
        5.2.3 RNA测序及分析第55-56页
        5.2.4 GA2ox8 基因的启动子克隆与甲基化水平分析第56页
        5.2.5 相关基因的表达分析第56页
    5.3 结果分析第56-65页
        5.3.1 表达模式与‘红早酥’突变性状相关的基因筛选第56-62页
        5.3.2 ‘红早酥’为母本的杂交群体中,表达模式始终与突变性状相关的基因筛选第62-63页
        5.3.3 PbGA2ox8 与‘红早酥’突变性状连锁第63-64页
        5.3.4 ‘红早酥’中PbGA2ox8 启动子区域甲基化水平发生重塑并与其在‘红早酥’内的异常表达一致第64页
        5.3.5 PbGA2ox8 的表达模式第64-65页
    5.4 讨论第65-67页
第六章 PbGA2ox8 可以在‘早酥’梨上引起维管束依赖型的着色第67-72页
    6.1 引言第67页
    6.2 材料与方法第67-68页
        6.2.1 实验材料与处理第67页
        6.2.2 PbGA2ox8 编码序列的克隆、过表达载体构建与瞬时转化第67页
        6.2.3 GA的测定第67-68页
    6.3 结果分析第68-71页
        6.3.1 ‘早酥’和‘红早酥’中不同组织的GA4 含量第68页
        6.3.2 过表达PbGA2ox8 能够诱导‘早酥’幼果花青苷的积累第68-70页
        6.3.3 `能够在梨组培苗幼叶上引起依赖于钙信号的维管束附近的花青苷的积累第70-71页
    6.4 讨论第71-72页
第七章 结论和创新点第72-74页
    7.1 结论第72-73页
    7.2 创新点第73-74页
参考文献第74-82页
附录第82-114页
致谢第114-115页
作者简介第115-116页

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