摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 绪论 | 第8-17页 |
1.1 膜泡运输简介 | 第8-9页 |
1.1.1 膜泡运输的功能 | 第8页 |
1.1.2 膜泡运输的过程 | 第8-9页 |
1.2 SM蛋白的研究现状 | 第9-15页 |
1.2.1 SM蛋白的结构 | 第9页 |
1.2.2 SM蛋白的分类及分布 | 第9-11页 |
1.2.3 SM蛋白的功能 | 第11-15页 |
1.3 与SM蛋白协同作用的因子 | 第15-17页 |
1.3.1 MINTs | 第15页 |
1.3.2 Doc2 | 第15页 |
1.3.3 Rabs | 第15-16页 |
1.3.4 Tomosyn | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-31页 |
2.1 实验材料 | 第17页 |
2.2 载体构建 | 第17-22页 |
2.2.1 酶切连接方法构建载体 | 第17-21页 |
2.2.2 利用Gateway系统构建载体 | 第21-22页 |
2.3 转基因植株制作 | 第22-23页 |
2.3.1 农杆菌感受态细胞制备 | 第22-23页 |
2.3.2 农杆菌转化 | 第23页 |
2.3.3 农杆菌侵染 | 第23页 |
2.4 抗体制备 | 第23-25页 |
2.4.1 抗原制备 | 第23-24页 |
2.4.2 抗体制备 | 第24-25页 |
2.5 酵母双杂交 | 第25-27页 |
2.5.1 Y2H用质粒载体的构建 | 第25页 |
2.5.2 试剂配制 | 第25-26页 |
2.5.3 酵母的复苏 | 第26页 |
2.5.4 酵母感受态的制备 | 第26页 |
2.5.5 待测质粒的转化 | 第26页 |
2.5.6 酵母双杂交相互作用的分析 | 第26-27页 |
2.6 Western杂交 | 第27-29页 |
2.6.1 样品制备 | 第27页 |
2.6.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第27-29页 |
2.7 Pull Down | 第29页 |
2.7.1 试剂配制 | 第29页 |
2.7.2 材料准备 | 第29页 |
2.7.3 pull down | 第29页 |
2.8 银染 | 第29-31页 |
2.8.1 试剂配制 | 第29-30页 |
2.8.2 银染 | 第30-31页 |
3 结果与讨论 | 第31-41页 |
3.1 AtSLY1的发现 | 第31页 |
3.2 AtSLY1抗体的制备与检测 | 第31-32页 |
3.2.1 AtSLY1抗体制备的目的 | 第31页 |
3.2.2 AtSLY1抗体的制备 | 第31-32页 |
3.2.3 AtSLY1抗体的检测 | 第32页 |
3.3 atsly1突变体的筛选 | 第32-35页 |
3.3.1 atsly1 T-DNA插入突变体的筛选 | 第32-33页 |
3.3.2 AtSLY1 RNAi转基因植株的制作 | 第33-34页 |
3.3.3 atsly1突变体表型观察 | 第34-35页 |
3.4 AtSLY1过表达植物的制作与检测 | 第35-36页 |
3.4.1 AtSLY1过表达植物的制作 | 第35页 |
3.4.2 AtSLY1过表达植物的检测 | 第35-36页 |
3.5 AtSLY1可视化转基因植物的制作与检测 | 第36-37页 |
3.5.1 AtSLY1可视化转基因植物的制作 | 第36页 |
3.5.2 AtSLY1可视化转基因植物的检测 | 第36-37页 |
3.6 AtSLY1的器官表达情况 | 第37页 |
3.7 AtSLY1与其他蛋白的相互作用关系 | 第37-40页 |
3.7.1 pull-down分析AtUfe1与AtSLY1的相互作用 | 第37-38页 |
3.7.2 酵母双杂交验证AtSLY1与AtUfe1的相互作用 | 第38-40页 |
3.8 探究AtSLY1的新型作用因子 | 第40-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |