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拟南芥蛋白运输中SM蛋白AtSLY1功能探究

摘要第4-5页
Abstract第5页
1 绪论第8-17页
    1.1 膜泡运输简介第8-9页
        1.1.1 膜泡运输的功能第8页
        1.1.2 膜泡运输的过程第8-9页
    1.2 SM蛋白的研究现状第9-15页
        1.2.1 SM蛋白的结构第9页
        1.2.2 SM蛋白的分类及分布第9-11页
        1.2.3 SM蛋白的功能第11-15页
    1.3 与SM蛋白协同作用的因子第15-17页
        1.3.1 MINTs第15页
        1.3.2 Doc2第15页
        1.3.3 Rabs第15-16页
        1.3.4 Tomosyn第16-17页
2 材料与方法第17-31页
    2.1 实验材料第17页
    2.2 载体构建第17-22页
        2.2.1 酶切连接方法构建载体第17-21页
        2.2.2 利用Gateway系统构建载体第21-22页
    2.3 转基因植株制作第22-23页
        2.3.1 农杆菌感受态细胞制备第22-23页
        2.3.2 农杆菌转化第23页
        2.3.3 农杆菌侵染第23页
    2.4 抗体制备第23-25页
        2.4.1 抗原制备第23-24页
        2.4.2 抗体制备第24-25页
    2.5 酵母双杂交第25-27页
        2.5.1 Y2H用质粒载体的构建第25页
        2.5.2 试剂配制第25-26页
        2.5.3 酵母的复苏第26页
        2.5.4 酵母感受态的制备第26页
        2.5.5 待测质粒的转化第26页
        2.5.6 酵母双杂交相互作用的分析第26-27页
    2.6 Western杂交第27-29页
        2.6.1 样品制备第27页
        2.6.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第27-29页
    2.7 Pull Down第29页
        2.7.1 试剂配制第29页
        2.7.2 材料准备第29页
        2.7.3 pull down第29页
    2.8 银染第29-31页
        2.8.1 试剂配制第29-30页
        2.8.2 银染第30-31页
3 结果与讨论第31-41页
    3.1 AtSLY1的发现第31页
    3.2 AtSLY1抗体的制备与检测第31-32页
        3.2.1 AtSLY1抗体制备的目的第31页
        3.2.2 AtSLY1抗体的制备第31-32页
        3.2.3 AtSLY1抗体的检测第32页
    3.3 atsly1突变体的筛选第32-35页
        3.3.1 atsly1 T-DNA插入突变体的筛选第32-33页
        3.3.2 AtSLY1 RNAi转基因植株的制作第33-34页
        3.3.3 atsly1突变体表型观察第34-35页
    3.4 AtSLY1过表达植物的制作与检测第35-36页
        3.4.1 AtSLY1过表达植物的制作第35页
        3.4.2 AtSLY1过表达植物的检测第35-36页
    3.5 AtSLY1可视化转基因植物的制作与检测第36-37页
        3.5.1 AtSLY1可视化转基因植物的制作第36页
        3.5.2 AtSLY1可视化转基因植物的检测第36-37页
    3.6 AtSLY1的器官表达情况第37页
    3.7 AtSLY1与其他蛋白的相互作用关系第37-40页
        3.7.1 pull-down分析AtUfe1与AtSLY1的相互作用第37-38页
        3.7.2 酵母双杂交验证AtSLY1与AtUfe1的相互作用第38-40页
    3.8 探究AtSLY1的新型作用因子第40-41页
结论第41-42页
参考文献第42-46页
攻读学位期间发表的学术论文第46-47页
致谢第47-48页

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