| 摘要 | 第11-12页 |
| ABSTRACT | 第12页 |
| 第一章 绪论 | 第13-44页 |
| 1.1 引言 | 第13-14页 |
| 1.2 地磁场及地磁导航 | 第14-21页 |
| 1.2.1 地磁场 | 第15-16页 |
| 1.2.2 地磁导航技术 | 第16-21页 |
| 1.3 生物地磁导航 | 第21-34页 |
| 1.3.1 生物地磁导航的研究现状 | 第21-23页 |
| 1.3.2 生物地磁导航机理的研究 | 第23-34页 |
| 1.4 隐花色素Cry的克隆表达情况 | 第34-41页 |
| 1.4.1 隐花色素Cry基因的克隆 | 第34页 |
| 1.4.2 隐花色素Cry蛋白的不同系统表达 | 第34-41页 |
| 1.5 本文选题依据和研究内容 | 第41-44页 |
| 第二章 ClCry1基因的各表达载体构建 | 第44-62页 |
| 2.1 ClCry1基因序列的获取 | 第45-56页 |
| 2.1.1 ClCry1模板序列的分析 | 第45-50页 |
| 2.1.2 PCR引物的设计 | 第50-54页 |
| 2.1.3 ClCry1基因序列的获取 | 第54-56页 |
| 2.2 重组表达载体的构建 | 第56-61页 |
| 2.2.1 ClCry1基因序列和质粒载体的双酶切 | 第56-57页 |
| 2.2.2 ClCry1基因和质粒载体的连接 | 第57-61页 |
| 2.3 本章小结 | 第61-62页 |
| 第三章 ClCry1蛋白的原核表达 | 第62-80页 |
| 3.1 ClCry1蛋白的E.Coli表达与检测 | 第62-68页 |
| 3.1.1 ClCry1基因的密码子偏好性分析 | 第63-65页 |
| 3.1.2 ClCry1蛋白的E.Coli异源表达 | 第65-66页 |
| 3.1.3 包涵体和可溶性蛋白的分离 | 第66-67页 |
| 3.1.4 表达效果的检测 | 第67-68页 |
| 3.2 ClCry1蛋白原核表达条件的探索与优化 | 第68-79页 |
| 3.2.1 诱导表达温度对ClCry1表达的影响 | 第69-71页 |
| 3.2.2 诱导表达时间对ClCry1表达的影响 | 第71-73页 |
| 3.2.3 诱导剂IPTG浓度对ClCry1表达的影响 | 第73-75页 |
| 3.2.4 诱导剂类型对ClCry1表达的影响 | 第75-76页 |
| 3.2.5 表达载体对ClCry1表达的影响 | 第76-79页 |
| 3.3 本章小结 | 第79-80页 |
| 第四章 ClCry1蛋白的真核及无细胞表达 | 第80-94页 |
| 4.1 ClCry1蛋白的sf9真核异源表达 | 第80-86页 |
| 4.1.1 sf9细胞的培养 | 第81-83页 |
| 4.1.2 杆状病毒Bacmid-ClCry1的转染表达 | 第83-85页 |
| 4.1.3 sf9细胞表达ClCry1蛋白的检测 | 第85-86页 |
| 4.2 ClCry1蛋白的无细胞表达 | 第86-94页 |
| 4.2.1 ClCry1蛋白的E.Coli无细胞表达 | 第87-91页 |
| 4.2.2 ClCry1蛋白的sf21无细胞表达 | 第91-92页 |
| 4.2.3 无细胞系统表达ClCry1蛋白的展望 | 第92-94页 |
| 4.3 本章小结 | 第94页 |
| 第五章 ClCry1蛋白的纯化 | 第94-114页 |
| 5.1 纯化蛋白方法的选择与纯化目标 | 第95-96页 |
| 5.1.1 纯化方法的的选择 | 第95-96页 |
| 5.1.2 ClCry1蛋白的纯化目标 | 第96页 |
| 5.2 ClCry1纯化蛋白产量的提升 | 第96-103页 |
| 5.2.1 ClCry1结合效率的提高 | 第97-101页 |
| 5.2.2 ClCry1特异性洗脱效率的提高 | 第101-103页 |
| 5.3 ClCry1纯化蛋白纯度的提升 | 第103-105页 |
| 5.3.1 结合前表达液的纯度对纯化蛋白纯度的影响 | 第103-104页 |
| 5.3.2 杂蛋白洗脱程度对纯化蛋白纯度的影响 | 第104-105页 |
| 5.4 含辅基和无咪唑ClCry1蛋白的获取 | 第105-112页 |
| 5.4.1 优化纯化条件对ClCry1结合FAD的影响 | 第108-109页 |
| 5.4.2 表达时添加辅基分子对ClCry1结合FAD的影响 | 第109-110页 |
| 5.4.3 透析时添加辅基分子对ClCry1结合FAD的影响 | 第110-112页 |
| 5.5 本章小结 | 第112-114页 |
| 结束语 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115-121页 |
| 参考文献 | 第121-132页 |
| 作者在学期间取得的学术成果 | 第132-133页 |
| 附录A ClCry1密码子偏好性分析 | 第133-137页 |
| 附录B western-blot操作步骤 | 第137-139页 |
| 附录C 主要仪器 | 第139页 |
