| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-35页 |
| 1.1 小鼠生殖细胞的发育过程 | 第15-21页 |
| 1.1.1 生殖细胞 | 第15-16页 |
| 1.1.2 原始生殖细胞 | 第16-18页 |
| 1.1.3 雄性小鼠减数分裂过程 | 第18-21页 |
| 1.2 piRNA和小鼠精子发生 | 第21-26页 |
| 1.2.1 PIWI蛋白家族 | 第21-22页 |
| 1.2.2 piRNA | 第22-23页 |
| 1.2.3 其它PIWI通路相关组分蛋白 | 第23-24页 |
| 1.2.4 雄性小鼠中Nuage和piRNA/PIWI通路 | 第24-26页 |
| 1.3 线粒体研究概况 | 第26-35页 |
| 1.3.1 线粒体结构 | 第26页 |
| 1.3.2 线粒体功能 | 第26-27页 |
| 1.3.3 线粒体动力学 | 第27-31页 |
| 1.3.4 线粒体和雄性生殖细胞发育 | 第31-35页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第35-68页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-44页 |
| 2.1.1 细胞 | 第35页 |
| 2.1.2 质粒 | 第35-36页 |
| 2.1.3 抗体 | 第36-37页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第37-40页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第40-41页 |
| 2.1.6 引物序列 | 第41-44页 |
| 2.2 实验方法 | 第44-68页 |
| 2.2.1 质粒构建 | 第44-47页 |
| 2.2.2 稳转细胞株的建立与筛选 | 第47-49页 |
| 2.2.3 细胞免疫荧光 | 第49页 |
| 2.2.4 Mito-Tracker染色 | 第49-50页 |
| 2.2.5 线粒体形态分析 | 第50-51页 |
| 2.2.6 聚乙二醇融合分析 | 第51-52页 |
| 2.2.7 透射电镜 | 第52-53页 |
| 2.2.8 免疫印迹 | 第53-54页 |
| 2.2.9 免疫共沉淀 | 第54-55页 |
| 2.2.10 小鼠胚胎干细胞的培养 | 第55-56页 |
| 2.2.11 拟胚体(EB)培养 | 第56-57页 |
| 2.2.12 SSEA1染色 | 第57-58页 |
| 2.2.13 碱性磷酸酶染色 | 第58-59页 |
| 2.2.14 实时定量PCR | 第59-61页 |
| 2.2.15 小鼠交配管理 | 第61-63页 |
| 2.2.16 小鼠睾丸石蜡切片 | 第63-64页 |
| 2.2.17 苏木精-伊红染色 | 第64-65页 |
| 2.2.18 组织免疫荧光 | 第65-66页 |
| 2.2.19 mtDNA拷贝数检测 | 第66-67页 |
| 2.2.20 主要软件 | 第67页 |
| 2.2.21 统计学分析 | 第67-68页 |
| 第三章 Asz1的线粒体定位对其功能影响和机制研究 | 第68-98页 |
| 3.1 引言 | 第68-70页 |
| 3.2 实验结果 | 第70-95页 |
| 3.2.1 Asz1蛋白特异性定位于线粒体外膜 | 第70-73页 |
| 3.2.2 Asz1 -COOH端线粒体定位信号肽的生物信息学分析 | 第73-76页 |
| 3.2.3 S25信号肽对Asz1线粒体定位起关键作用 | 第76-77页 |
| 3.2.4 Asz1与线粒体相关功能的关系 | 第77-78页 |
| 3.2.5 Asz1与Mili相互作用且作为支架蛋白使Mili锚定于线粒体 | 第78-80页 |
| 3.2.6 Asz1线粒体定位对其促进PGCs形成的功能必不可少 | 第80-81页 |
| 3.2.7 Asz1可以形成同源二聚体,引起线粒体聚集 | 第81-83页 |
| 3.2.8 Asz1影响线粒体形态 | 第83-85页 |
| 3.2.9 Asz1与Mfn1/Mfn2蛋白相互作用 | 第85-86页 |
| 3.2.10 Asz1对线粒体形态的维持依赖于Mfn1/Mfn2 | 第86-87页 |
| 3.2.11 Asz1可促进线粒体融合且依赖于Mfn1/Mfn2 | 第87-88页 |
| 3.2.12 Asz1信号肽敲除型小鼠睾丸形态学和组织学比较 | 第88-91页 |
| 3.2.13 Asz1信号肽敲除型小鼠中PIWI蛋白组分改变 | 第91-93页 |
| 3.2.14 Asz1信号肽敲除型小鼠影响Nuage形成 | 第93-94页 |
| 3.2.15 Asz1信号肽敲除型小鼠中还原转座子表达受抑制 | 第94-95页 |
| 3.3 小结和讨论 | 第95-98页 |
| 3.3.1 小结 | 第95-96页 |
| 3.3.2 讨论 | 第96-98页 |
| 第四章 Mfn1敲除导致雄性小鼠生殖发育障碍 | 第98-110页 |
| 4.1. 引言 | 第98-100页 |
| 4.2. 实验结果 | 第100-107页 |
| 4.2.1 线粒体融合分裂蛋白在小鼠组织和EB中的表达 | 第100页 |
| 4.2.2 Mfn1 Vasa-cre敲除型小鼠睾丸形态学和组织学特征 | 第100-103页 |
| 4.2.3 Mfn1 CKO Vasa-cre小鼠中对PIWI蛋白的影响 | 第103-104页 |
| 4.2.4 Mfn1 CKO Vasa-cre小鼠睾丸细胞线粒体电镜特征 | 第104-105页 |
| 4.2.5 Mfn1 CKO Vasa-cre小鼠对还原转座子的影响 | 第105-106页 |
| 4.2.6 Mfn1 CKO Stra8-cre小鼠中对精子形成有影响 | 第106-107页 |
| 4.3 小结和讨论 | 第107-110页 |
| 4.3.1 小结 | 第107-108页 |
| 4.3.2 讨论 | 第108-110页 |
| 第五章 本文总结和展望 | 第110-113页 |
| 参考文献 | 第113-133页 |
| 附录 | 第133-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
