| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第14-39页 |
| 1.1 我国农用沼气池的发展现状 | 第14页 |
| 1.2 青海农用沼气池发展现状与存在问题 | 第14-19页 |
| 1.2.1 发展现状与利用效率 | 第14-18页 |
| 1.2.2 存在问题 | 第18-19页 |
| 1.3 沼气发酵 | 第19-36页 |
| 1.3.1 沼气发酵原理 | 第19-25页 |
| 1.3.2 沼气发酵微生物 | 第25-32页 |
| 1.3.3 温度对沼气发酵的影响 | 第32-36页 |
| 1.4 沼气发酵微生物群落与功能的研究方法 | 第36-38页 |
| 1.4.1 DGGE技术 | 第36页 |
| 1.4.2 16S rRNA基因高通量测序技术 | 第36-37页 |
| 1.4.3 宏基因组与微生物功能 | 第37-38页 |
| 1.5 课题研究意义 | 第38-39页 |
| 第二章 青海不同地区农用沼气池微生物群落结构研究 | 第39-64页 |
| 2.1 引言 | 第39页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第39-42页 |
| 2.2.1 污泥样品采集 | 第39页 |
| 2.2.2 菌株和质粒 | 第39页 |
| 2.2.3 工具酶与其它试剂 | 第39-40页 |
| 2.2.4 培养基 | 第40页 |
| 2.2.5 常用缓冲液 | 第40页 |
| 2.2.6 引物与测序 | 第40页 |
| 2.2.7 污泥样品理化特征的测定 | 第40-41页 |
| 2.2.8 污泥基因组DNA提取和检测 | 第41页 |
| 2.2.9 16S rRNA基因的PCR扩增 | 第41页 |
| 2.2.10 DGGE分析体系建立与数据分析 | 第41-42页 |
| 2.2.11 DGGE条带测序与系统发育分析 | 第42页 |
| 2.2.12 微生物群落与环境因子相关性分析 | 第42页 |
| 2.3 结果与分析 | 第42-61页 |
| 2.3.1 青海不同地区农用沼气池及样品特征描述 | 第42-44页 |
| 2.3.2 农用沼气池16S rDNA的PCR扩增 | 第44-45页 |
| 2.3.3 DGGE图谱及多样性分析 | 第45-48页 |
| 2.3.4 不同泥样微生物群落的相似性分析 | 第48-49页 |
| 2.3.5 不同地区沼气池微生物群落结构组成 | 第49-59页 |
| 2.3.6 微生物群落与环境因子相关分析 | 第59-61页 |
| 2.4 讨论 | 第61-64页 |
| 2.4.1 不同地区农用沼气池微生物群落结构研究 | 第61-62页 |
| 2.4.2 沼气微生物群落与环境因子相关性分析 | 第62-64页 |
| 第三章 温度对沼气池发酵微生物群落结构影响的研究 | 第64-93页 |
| 3.1 引言 | 第64页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第64-66页 |
| 3.2.1 污泥样品来源与采集 | 第64-65页 |
| 3.2.2 工具酶与其它试剂 | 第65页 |
| 3.2.3 常用缓冲液 | 第65页 |
| 3.2.4 引物与测序 | 第65页 |
| 3.2.5 农用沼气池温度的测定与统计 | 第65页 |
| 3.2.6 PCR-DGGE研究微生物多样性 | 第65页 |
| 3.2.7 污泥基因组DNA的提取和检测 | 第65-66页 |
| 3.2.8 高通量测序及优化 | 第66页 |
| 3.2.9 物种分类和多样性分析 | 第66页 |
| 3.2.10 相似性聚类分析 | 第66页 |
| 3.3 结果与分析 | 第66-88页 |
| 3.3.1 全年沼气池内外温度的动态变化分析 | 第66-71页 |
| 3.3.2 PCR-DGGE分析微生物多样性的动态变化 | 第71-77页 |
| 3.3.3 高通量测序统计分析 | 第77-78页 |
| 3.3.4 微生物丰富度及多样性 | 第78-80页 |
| 3.3.5 细菌群落组成和结构 | 第80-84页 |
| 3.3.6 古菌群落组成和结构 | 第84-88页 |
| 3.4 讨论 | 第88-93页 |
| 3.4.1 沼气池发酵温度与产气密切相关 | 第88页 |
| 3.4.2 高通量测序和DGGE分析青海农用沼气池发酵微生物群落的技术评价 | 第88-90页 |
| 3.4.3 温度对青海农用沼气池发酵微生物群落结构的影响 | 第90-93页 |
| 第四章 青海农用沼气池发酵微生物功能及代谢研究 | 第93-117页 |
| 4.1 引言 | 第93页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第93-95页 |
| 4.2.1 样品来源与采集 | 第93页 |
| 4.2.2 试剂 | 第93-94页 |
| 4.2.3 污泥样品宏基因组DNA的提取和检测 | 第94页 |
| 4.2.4 宏基因组测序及数据分析流程 | 第94-95页 |
| 4.3 结果与分析 | 第95-114页 |
| 4.3.1 宏基因组数据分析与基因预测 | 第95-96页 |
| 4.3.2 物种注释与功能注释 | 第96-99页 |
| 4.3.3 微生物群落代谢途径的差异性分析 | 第99-102页 |
| 4.3.4 温度变化与微生物群落碳代谢关系解析 | 第102-107页 |
| 4.3.5 温度变化与微生物群落氮代谢关系解析 | 第107-111页 |
| 4.3.6 温度变化与微生物群落硫代谢关系解析 | 第111-112页 |
| 4.3.7 温度变化与微生物群落甲烷代谢关系解析 | 第112-114页 |
| 4.4 讨论 | 第114-117页 |
| 第五章 结论与展望 | 第117-120页 |
| 5.1 结论 | 第117-118页 |
| 5.2 创新点 | 第118页 |
| 5.3 展望 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-134页 |
| 附录 | 第134-142页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第142-143页 |
| 致谢 | 第143页 |
