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基于全转录组学的野生蕉(Musa itinerans)低温胁迫响应机制研究

摘要第10-15页
ABSTRACT第15-20页
第一章 引言第21-30页
    1 植物响应低温胁迫的生理生化研究进展第22-23页
    2 植物低温胁迫响应的分子生物学研究进展第23-24页
    3 植物响应低温胁迫的ncRNA研究进展第24-26页
    4 植物响应低温胁迫的转录组学研究进展第26-27页
    5 香蕉抗寒的分子生物学研究第27-28页
    6 本研究的意义及主要内容第28-30页
        6.1 本研究的意义第28页
        6.2 本研究的主要内容第28-30页
第二章 野生蕉低温胁迫过程中的生理生化变化分析第30-38页
    1 材料与方法第30-33页
        1.1 野生蕉的组培和移栽第30-31页
        1.2 野生蕉在不同低温下的胁迫处理与取样第31页
        1.3 试验器材及试剂第31页
        1.4 野生蕉低温胁迫过程中抗氧化系统酶活性和H202含量测定第31-33页
    2 结果与分析第33-35页
        2.1 野生蕉移栽后和低温胁迫后长势情况分析第33-34页
        2.2 野生蕉低温胁迫过程中若干抗氧化酶活性和H202的含量的变化分析第34页
        2.3 野生蕉低温胁迫过程中蔗糖含量的变化分析第34-35页
    3 讨论第35-38页
第三章 野生蕉低温响应的miRNAs分析第38-67页
    1 材料与方法第38-39页
        1.1 材料第38页
        1.2 方法第38-39页
    2 结果与分析第39-59页
        2.1 野生蕉抗寒性分析第39-40页
        2.2 野生蕉小RNAs数据产出、分类及长度分布第40-41页
        2.3 野生蕉低温胁迫下已知miRNAs、novel miRNAs和trans-acting siRNA(ta-siRNAs)的鉴定第41-42页
        2.4 野生蕉差异表达miRNAs的分析第42-44页
        2.5 差异表达miRNAs靶基因的预测与功能分析第44-47页
        2.6 野生蕉miRNAs具有大量转录因子型靶基因第47-48页
        2.7 野生蕉miRNAs靶基因中蛋白激酶(Protein Kinases)、DUFs、TPRs、ATPases、核糖体蛋白(Ribosomal proteins)和水解酶(hydrolyticenzymes)出现频率较高第48页
        2.8 野生蕉差异表达miRNAs靶基因参与硫代谢和硫传递途径以及含硒复合物代谢途径第48-50页
        2.9 野生蕉差异表达miRNAs耙基因参与类倍半萜和三萜化合物生物合成途径第50页
        2.10 野生蕉差异表达miRNAs靶基因参与类胡萝卜素生物合成和类黄酮生物合成途径第50-52页
        2.11 野生蕉差异表达miRNAs靶基因参与生物钟途径第52-53页
        2.12 野生蕉差异表达miRNAs靶基因参与其他代谢途径第53-58页
        2.13 野生蕉低温胁迫下差异表达miRNAs及其靶基因表达的qPCR分析第58-59页
    3 讨论第59-67页
        3.1 野生蕉低温响应miRNAs及与其他物种的比较分析第59-60页
        3.2 野生蕉低温响应miRNAs的靶基因存在多种响应途径第60-61页
        3.3 野生蕉低温胁迫过程中信号感知和传导第61页
        3.4 野生蕉启动ROS清除和DNA修复应对低温胁迫第61-62页
        3.5 野生蕉延缓生长和气孔关闭以响应低温胁迫第62-63页
        3.6 野生蕉通过激活光合作用和呼吸作用代谢过程中的光呼吸、TCA和PPP途径以响应低温胁迫第63页
        3.7 野生蕉维持渗透平衡以应对低温胁迫第63-64页
        3.8 野生蕉可能通过激活CBF途径并由生物钟关联的CBF调节环(CBF regulating loop associated with the circadian rhythm)的调控以应对低温胁迫第64-65页
        3.9 野生蕉miR172可能通过调控CKⅡ和生物钟在响应低温胁迫过程中起核心协调作用第65-67页
第四章 野生蕉低温响应的mRNAs-lncRNAs分析第67-85页
    1 材料与方法第68-69页
        1.1 材料与低温胁迫处理第68页
        1.2 RNA的提取第68页
        1.3 文库构建和高通量测序第68页
        1.4 野生蕉mRNAs与lncRNAs生物信息学鉴定第68-69页
        1.5 野生蕉差异表达mRNAs、lncRNAs及其靶基因的qPCR验证第69页
    2 结果与分析第69-83页
        2.1 野生蕉响应低温胁迫差异表达基因的鉴定第69-73页
        2.2 野生蕉低温响应lncRNAs的鉴定第73-77页
        2.3 野生蕉lncRNAs和mRNAs表达水平与结构的比较分析第77-78页
        2.4 野生蕉差异表达转录本的表达水平和染色体分布的比较分析第78-80页
        2.5 野生蕉低温胁迫过程中差异表达mRNA以及lncRNAs与靶基因表达关系的验证第80-83页
    3 讨论第83-85页
        3.1 RNA-seq揭示了野生蕉响应低温胁迫的特异机制第83页
        3.2 野生蕉低温胁迫过程中差异表达lncRNAs的可能功能第83-85页
第五章 野生蕉若干抗寒相关miRNAs的前体克隆及分子特性与表达分析第85-142页
    第一节 野生蕉miR172的前体克隆及分子特性与表达分析第85-109页
        1 材料与方法第86-88页
        2 结果与分析第88-107页
            2.1 植物miR172家族成员物种分布分析第88-90页
            2.2 植物miR172家族成员前体及成熟体进化特性分析第90-92页
            2.3 4个科的科内物种、同物种不同成员以及不同物种的同一成员的miR172家族成员进化关系特点第92-97页
            2.4 植物miR172家族二级结构特点第97页
            2.5 植物miR172家族成员二级结构预测以及其生成成熟体的特点分析第97-99页
            2.6 植物miR172家族成员的靶基因预测及分析第99-100页
            2.7 野生蕉miR172a、miR172c前体的克隆第100-102页
            2.8 野生蕉miR172a、miR172c前体二级结构及生成成熟体特性分析结果第102-103页
            2.9 植物miR172a、miR172c前体进化树构建结果分析第103-104页
            2.10 pri-miR172a、pri-miR172c转录起始位点预测分析结果第104-105页
            2.11 miR172a、miR172c启动子顺式作用元件预测分析结果第105-106页
            2.12 野生蕉miR172a、miR172c-3p在不同温度、不同组织部位的相对表达量分析结果第106-107页
        3 讨论第107-109页
            3.1 植物miR172家族成员的进化特点第107-108页
            3.2 植物miR172家族成员参与植物花器官形成和成花调控及应对逆境胁迫第108-109页
    第二节 野生蕉miR408b的前体克隆及分子特性与表达分析第109-131页
        1 材料与方法第110-111页
        2 结果与分析第111-129页
            2.1 植物miR408家族成员的物种分布第111-114页
            2.2 植物miR408家族成员前体及成熟体进化特性第114-116页
            2.3 植物科内物种的miR408家族成员以及种间物种miR408a前体和成熟体进化特性第116-118页
            2.4 植物miR408家族成员成熟体序列分析结果第118-121页
            2.5 植物miR408家族成员染色体分布情况第121-122页
            2.6 植物miR408家族成员二级结构预测分析结果第122页
            2.7 植物miR408家族成员靶基因预测分析结果第122-124页
            2.8 野生蕉miR408b前体的克隆第124-125页
            2.9 野生蕉miR408b前体二级结构及生成成熟体特性分析结果第125-126页
            2.10 植物miR408b前体进化树构建结果分析第126-127页
            2.11 pri-miR408b转录起始位点预测分析结果第127页
            2.12 miR408b启动子顺式作用元件预测分析结果第127-128页
            2.13 野生蕉miR408b在不同温度、不同组织部位的相对表达量分析结果第128-129页
        3 讨论第129-131页
            3.1 苔藓类植物可能是植物miR408家族进化上的祖先第129页
            3.2 植物miR408进化上保守性与特异性并存第129页
            3.3 植物miR408家族成员参与逆境胁迫应答及生长发育第129-131页
    第三节 野生蕉miR395a的前体克隆与进化特性与及启动子分析第131-142页
        1 材料与方法第132-133页
        2 结果与分析第133-140页
            2.1 野生蕉miR395a前体的克隆第133-134页
            2.2 植物miR395a前体物种分布及进化特性分析结果第134-136页
            2.3 植物miR395a成熟体序列分析结果第136-137页
            2.4 野生蕉miR395a前体二级结构及生成成熟体特性分析结果第137-138页
            2.5 pri-miR395a转录起始位点预测分析结果第138页
            2.6 miR395a启动子顺式作用元件预测分析结果第138-139页
            2.7 野生蕉miR395a在不同温度、不同组织部位的相对表达量分析结果第139-140页
        3 讨论第140-142页
            3.1 野生蕉miR395a的进化特性第140页
            3.2 野生蕉miR395a可能在激素信号转导以及各种胁迫方面起重要作用第140-142页
第六章 野生蕉CKⅡ基因家族的全基因组鉴定及表达分析第142-164页
    1 材料与方法第143-144页
        1.1 香蕉A基因、B基因组CKⅡ基因家族鉴定第143页
        1.2 三明野生蕉和栽培蕉天宝蕉CKⅡ基因家族成员的克隆第143页
        1.3 香蕉A基因组、野生蕉和栽培蕉天宝蕉CKⅡ基因家族成员生物信息学分析第143页
        1.4 野生蕉CKⅡ基因家族成员qRT-PCR试验材料与处理第143-144页
        1.5 低温胁迫下野生蕉CKⅡ基因家族成员qRT-PCR试验及分析第144页
    2 结果与分析第144-162页
        2.1 香蕉A基因组、B基因组CKⅡ基因家族成员鉴定分析第144-148页
        2.2 野生蕉和栽培蕉天宝蕉CKⅡ基因家族成员克隆第148-151页
        2.3 香蕉A基因组、三明野生蕉和天宝蕉CKⅡ基因家族成员亚细胞定位预测分析第151-154页
        2.4 芭蕉属植物CKⅡ基因家族成员染色体分布情况分析第154-156页
        2.5 香蕉A基因组、三明野生蕉和天宝蕉CKⅡ基因家族成员基因结构分析第156-157页
        2.6 香蕉A基因组、三明野生蕉和天宝蕉CKⅡ基因家族成员磷酸化位点预测分析第157页
        2.7 香蕉A基因组、三明野生蕉和天宝蕉CKⅡ基因家族成员保守基序分析第157-159页
        2.8 三明野生蕉CKⅡ基因家族成员在不同温度、不同组织部位的表达情况分析第159-162页
    3 讨论第162-164页
        3.1 CKⅡ基因家族在拟南芥和芭蕉属植物中可能起着不同的功能第162页
        3.2 CKⅡ基因家族在野生蕉和栽培蕉中可能起着不同的功能第162-164页
第七章 基于基因组的野生蕉4个抗寒相关重叠基因的分析第164-185页
    第一节 天宝蕉重叠基因cDNA、gDNA及启动子克隆与生物信息学分析第164-175页
        1 材料与方法第165-167页
        2 结果与分析第167-173页
            2.1 香蕉A基因组重叠基因的发现及分析第167-168页
            2.2 天宝蕉重叠基因ORF及3,和5'末端序列的获得及序列分析第168页
            2.3 天宝蕉重叠基因gDNA序列的获得及序列分析第168-169页
            2.4 天宝蕉重叠基因710、720和730启动子序列的获得及序列分析第169-170页
            2.5 天宝蕉与香蕉A基因组重叠基因序列比对分析及基因结构分析第170-172页
            2.6 天宝蕉重叠基因710、720-730启动子序列分析第172-173页
        3 讨论第173-175页
    第二节 野生蕉重叠基因序列分析第175-180页
        1 材料与方法第175页
        2 结果与分析第175-179页
            2.1 阿宽蕉重叠基因存在情况及与天宝蕉重叠基因比较第175-176页
            2.2 阿宽蕉与天宝蕉重叠基因序列比对分析第176-179页
        3 讨论第179-180页
    第三节 野生蕉重叠基因在不同温度和组织部位中的表达分析第180-185页
        1 材料与方法第180-181页
        2 结果与分析第181-183页
            2.1 野生蕉4个重叠基因在不同温度下的相对表达量变化分析第181-182页
            2.2 野生蕉4个重叠基因在不同组织部位的表达量变化分析第182-183页
        3 讨论第183-185页
第八章 结论与展望第185-192页
参考文献第192-219页
附录第219-261页
    附录Ⅰ 三明野生蕉低温响应的全转录组学分析附图第219-240页
    附录Ⅱ 三明野生蕉低温响应的全转录组学分析附表第240-261页
在读博士期间发表论文情况与参加学术会议情况第261-263页
    一、在读博士期间发表论文情况第261-262页
    二、在读博士期间参加学术会议情第262-263页
致谢第263页

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